筆架山論壇大咖齊聚共話臨床質譜和精準診療

分析測試百科網訊，逢深圳經濟特區成立40周年暨粵港澳大灣區及中國特色社會主義先行示范區建設關鍵之年，2020年12月18日，深圳市第二人民醫院主辦的“筆架山論壇：臨床質譜在精準醫療中的應用發展論壇”在深圳隆重舉辦。

筆架山論壇現場

本次論壇采取線下會議與線上授課相結合的方式，由分析測試百科網提供全程網絡直播和會議報道，現場100余位醫院和研究單位的代表、全國場外上千位聽眾參與了這場精彩的臨床質譜盛會。國內外精準醫學、質譜技術基礎研究與臨床應用領域的多位專家做精彩報告，從基礎研究、臨床應用、精準診療技術轉化及臨床質譜實驗室建設等方面深入探討臨床質譜技術的高質量發展，探討臨床質譜技術賦能精準醫學的實現途徑。

深圳市第二人民醫院李維平 副院長

在開幕式上，深圳市第二人民醫院李維平副院長致辭，他首先歡迎專家及與會者的到來并預祝論壇勝利召開，致辭中談到：在精準醫學浪潮下，質譜技術作為一項起到關鍵作用的新技術，在醫學領域具有廣闊的應用前景，除了已相對成熟的小分子、靶向生物標記物檢測及治療藥物監測，激素質譜檢測的準確定量使得激素替代治療的療效與安全性評估得以實現；許多基于質譜的蛋白大分子檢測如IGF-1精準檢測、淀粉樣變性分型檢測等被應用于臨床，質譜技術增強了蛋白質組學檢測準、深、快、穩的優勢；未來還可將質譜多組學研究結合大數據轉化為臨床應用，助力精準醫學發展。

深圳市第二人民醫院黨委書記、徐勇教授

深圳市第二人民醫院黨委書記、徐勇教授做“臨床質譜實驗室建設分析與思考”的報告。他從精準醫學講起，拜登在2016年任副總統時，即倡導癌癥“登月計劃”，從而提出人類該如何攻克癌癥的問題。接下來提出臨床質譜的背景與意義、和免疫法的區別，以及臨床質譜國內外現狀，比如臨床質譜檢驗項目美國有400余項中國只有約40項。差距也帶來了機遇，接下來介紹了深圳市第二人民醫院近年來在臨床質譜方面的發展。臨床質譜發展還需要解決幾大痛點問題：試劑準入、標準化操作、準確結果、穩定儀器等。臨床質譜的功能及定位是：特殊臨檢+科研。最后介紹了二院的臨床質譜發展思考。

中科院化學所國家杰出青年、聶宗秀研究員

中科院化學所國家杰出青年、聶宗秀研究員做“顆粒質譜與成像技術進展”的報告。針對顆粒質譜成像的的挑戰，課題組在分析器、離子源、檢測器方面改進，從而直接測定病毒等大分子顆粒的質量。課題組構建了較為完備的顆粒質譜成像的裝置，包括在微米尺度基于電荷檢測的離子阱顆粒質譜，在納米尺度基于光學檢測的顯微鏡-離子阱質譜，以及納米材料質譜成像小分子質譜成像。課題組還開發基于超聲噴霧基質噴灑的基質噴涂儀（SoniCoat）。在應用方面，聶宗秀介紹到質譜做顆粒成像的難點是：分子量巨大難于檢測，生物組織復雜完整顆粒難于脫附電離。課題組采用納米材料以及紫外激光等方法，取得顯著進展，后研究納米載體藥物原位藥物釋放質譜成像，單細胞表面寡糖、唾液酸等定量檢測。

重慶醫科大學附屬第三醫院檢驗科主任，鄧昆副教授

重慶醫科大學附屬第三醫院檢驗科主任，鄧昆副教授做“核酸質譜技術的應用及發展”的報告。2014年美國FDA即批準臨床核酸質譜的使用，中國也起草了臨床核酸質譜相關共識。相比一代、二代測序等技術，核酸質譜有很多優點。接下來介紹核酸質譜檢測方法的原理，包括樣本獲取、DNA提取、DNA質檢、PCR擴增/SAP純化/加入延伸引物單堿基延伸環節、MALDI-TOF測定以及數據分析處理。最后介紹了核酸質譜的多種應用如：藥物遺傳學代謝酶SNP分型、液體活檢、遺傳性疾病監測、腫瘤分析、甲基化鑒定、病原體檢測、樣品的完整性檢查等。舉例了醫院進行的高血壓基因檢測、基因拷貝數變異CNV分析、基因突變檢測、循環腫瘤-cDNA、DNA甲基化檢測等。最后對于COVID-19的核酸檢測方法定量PCR/MALDI-TOF等技術的對比中提出思考和挑戰，包括多重PCR引物設計，PCR及其污染因素、DNA質量控制，圖譜采集，設備校準，數據采集及分析等。

北京協和醫院檢驗科禹松林教授

北京協和醫院檢驗科禹松林教授做“質譜檢測兒茶酚胺臨床實踐分享”的報告。介紹了協和醫院已開展的臨床質譜項目。嗜鉻細胞瘤和副神經節瘤診斷治療的展架共識，首選LC-MS/MS法，比其它方法如HPLC-ECD法特異性更好，靈敏度更高，分析時間更短，只是自動化程度低，試劑也有不足。醫院在2018年構建了兒茶酚胺及其代謝物的檢測方法，并對方法進行了一系列的驗證。對在方法驗證后上臨床后遇到的一些問題，也進行了探討，比如血中DNA靈敏度、內標選擇、方法、質控、標準化、參考區間上限、穩定性等。

香港浸會大學環境與生物分析國家重點實驗室主任、長江學者、蔡宗葦教授

香港浸會大學環境與生物分析國家重點實驗室主任、長江學者、蔡宗葦教授做“基于質譜成像技術研究環境污染與疾病發生的關系”的報告。介紹了質譜成像（MSI）及環境毒理研究，主要介紹MALDI成像，包括基本流程及應用。比如BPS/BPF毒理研究尤其是腎毒性研究，包括標志物發現、3D質譜成像等。此外介紹了空氣污染中質譜成像的研究，比如造成腦損傷、跨代際毒性。針對子代行為變化研究，進行小鼠的記憶力、焦慮、抑郁測試等。根據脂質功能分析，質譜成像可看到脂質代謝異常和靶器官定位，子代的器官受損等。空間聚類、超分研究發現了胎兒腦區域整體其它器官得到了顯著區分，研究首次在亞器官水平發現PM2.5暴露相關靶器官：胎兒腦部的背側大腦皮層和海馬形成微區（Hpf）、中腦和髓質微區。蔡教授總結說，課題組的研究從環境毒理學、組織形態分析、脂質組學、質譜成像等多角度論證了妊娠期PM2.5暴露誘發子代小數的認知情緒行為障礙；篩選相關脂質代謝網絡，闡明與神經調節相關的脂質代謝異常并準確定位靶器官；研究結果有助于了解妊娠期PM2.5暴露對子代行為以及多器官重塑的影響，為闡明神經退行性疾病發生的分子機制提供依據。

天津大學藥學院藥劑科主任王征教授

天津大學藥學院藥劑科主任王征教授做“聚合物納米膠束用于刺激響應性藥物控制釋放”的報告。從癌癥講起，課題組主要研究如何精準地將藥物輸送到癌癥分子上，主要研究藥物納米載體中的聚合物膠束。王征介紹了聚合物膠束的結構和原理及其優點。課題組的研究表明：聚合物膠束包載的光敏微管抑制劑為腫瘤治療過程中的增效減毒提供了新思路；含有咪唑環的聚合物膠束在光敏劑產生的單線態氧作用下可實現疏水到親水膠束的轉變及膨脹，從而促進藥物在腫瘤部位的按需釋放。含有偶氮苯和硝基咪唑基團的雙重缺氧敏感聚合物膠束，在腫瘤低氧環境中增敏鐵死亡。這種氧化還原失衡只在低氧腫瘤環境中有效，而不影響器官，為鐵死亡抗腫瘤療法的增效減毒提供了依據。

中國醫科院藥物所賀玖明研究員

中國醫科院藥物所賀玖明研究員做“質譜成像與空間分辨代謝組學新方法及其應用”的報告。質譜分子成像免標記、時間短、耗費低，具有很好發展前景。課題組開發了敞開式AFAI-MSI質譜成像關鍵技術與創新方法，應用于分子組織學、臨床醫學、生命科學、新藥研發等。接下來介紹了課題組研制的空氣動力輔助的敞開式離子化技術的特點，可以實現3個數量級的寬動態范圍分析，檢測1500個代謝物峰和多種類代謝物的高覆蓋范圍，靈敏度可達到pg級水平，以及強辨識能力。接下來進行多種藥物在各組織中的3D成像研究。課題組還開發了基于大數據與人工智能的質譜成像軟件，研究代謝組學、分子病理診斷的應用。最后展望表示：質譜成像技術是一種高覆蓋、高靈敏、特異性的免標記原位可視化分析手段；當其與代謝組學相結合，可獲得全面、原位的分子時空動態變化信息，為臨床腫瘤代謝和病理機制研究、疾病（原位）標志物發現及疾病篩查提供新手段，有望發展成一個K級分子病理診斷工具。發展以質譜為核心的臨床檢查、分子診療新技術是實現精準醫學的重要途徑。

天津大學藥物科學與技術學院陳瑞冰教授

天津大學藥物科學與技術學院陳瑞冰教授做“蛋白質譜在腫瘤學研究中的應用”的報告。介紹了長非編碼RNA與蛋白質相互作用的質譜分析及其在探討腫瘤調控機制中的應用；腎癌臨床樣本的多組學分析；利用單細胞質譜技術探討胰腺癌免疫微環境。首先介紹了DDA、DIA、PRM（平行反應監測）等蛋白質組學方法。課題組建立了基于定量質譜分析的lncRNA相互作用蛋白檢測的新方法，并利用該方法發現lncRNA HULC通過直接結合糖酵解代謝酶乳酸脫氫酶A（LDHA）和丙酮酸激酶M2型（PKM2）促進肝癌細胞有氧糖酵解的新機制。課題組對腎癌臨床樣本的多組學分析中，發現眾多上調和下調的通路，發現多個分型和用藥的靶點。在單細胞方面，課題組關注腫瘤免疫微環境，這是一個復雜動態的網絡體系，用質譜流式技術在單細胞水平上研究了胰腺癌免疫微環境。

鄭州大學第一附屬醫院藥學部孫志教授

鄭州大學第一附屬醫院藥學部孫志教授做“以質譜技術為核心的精準醫療科研、轉化與臨床應用”的報告。從精準醫療開始介紹臨床質譜平臺的重要性，并介紹了河南省精準一絲血臨床質譜工程研究中心/鄭州市臨床質譜重點實驗室。接下來介紹在代謝組學方面的工作。如腦膠質瘤代謝生物標志研究，早期篩查與精準診斷。另一項研究是口腔鱗癌前病變/狀態研究，用代謝組學方法發現了多種標志物。組學之外，課題組還開展很多毒物分析項目，尤其是高分辨質譜方法，介紹了兩例快速突發的情況，高分辨質譜法很快開發出方法，接下來介紹了課題組建立的>2000種高分辨質譜毒物庫，不僅可快速篩查中毒，還能篩查藥物非法添加。

深圳市第二人民醫院中心實驗室許蘊高級工程師

深圳市第二人民醫院中心實驗室許蘊高級工程師做“串聯質譜技術在臨床檢測中的應用”的報告。分別介紹了中心實驗室開展的新生兒遺傳代謝病篩查項目，血清11種維生素串聯質譜檢測項目，以及血液中兒茶酚胺及代謝物檢測，可精準篩查繼發性高血壓嗜鉻細胞瘤。接下來還介紹了15種膽汁酸串聯質譜檢測，阿爾茲海默癥外周血AD血清標志物的篩查，甾體激素譜的檢測等。

上海市徐匯區中心醫院中心實驗室李水軍主任

上海市徐匯區中心醫院中心實驗室李水軍主任做“臨床質譜實施應考慮的幾個問題”的報告。分別從幾大方面講述，包括：臨床目的、儀器選擇、場地設計、人員要求、方法開發與驗證、質量控制、管理要求、投資因素。比如臨床目的方面：在靈敏度不夠、特異性不夠、通量太低、成本太高時可以考慮臨床質譜，并舉例談了維生素檢測的主要問題。儀器選擇應考慮用途、靈敏度、通量、穩定性、成本預算等。介紹了影響臨床質譜方法質量的眾多原因，包括分析前、分析中、分析后方法不準確的來源，國內外目前都有很多臨床質譜的標準。質量控制方面介紹了QA和QC如何進行的經驗，包括室內質控、室間質評和方法運行后質量監測。分享了管理方面建立SOP的經驗；分享了醫院開展LDT的工作流程包括：臨床需求調研、方法開發和驗證、院內審批、LDT項目轉化。最后考慮投資的因素。

中山大學藥學院（深圳）謝智勇副院長

中山大學藥學院（深圳）謝智勇副院長做“腸道菌群-宿主對話及腸源性代謝組學”的報告。腸道菌群是“超級隱形器官”數量巨大，并影響大腦、腫瘤微環境，發表論文數節節高升，NSFC立項數逐年增多。腸道菌群幾乎同人類各種疾病有關，腸道菌群和機體之間的對話包括多種內外源性物質。課題組建立了多技術、多組學、多結合的“腸道菌群-宿主”對話研究平臺，舉例了研究如鷹嘴豆飲食干預T2DM的腸道菌群代謝網絡研究，吳茱萸堿改善腸炎與腸道微生物群調節之間的關系，小檗堿調節結腸炎腸道菌群-宿主共代謝對話的研究，建立了一系列定量代謝組學的方法，并開發了一系列產品。

深圳市第二人民醫院中心實驗室主任、劉文蘭研究員

深圳市第二人民醫院中心實驗室主任、劉文蘭研究員做“高血壓與質譜技術的緣分”的報告，系統介紹了對高血壓多種病因篩查的質譜檢測手段。中國高血壓患者2.5億，5個人中就有1個。繼發性高血壓占高血壓人群的5%-10%，找到該原因后有可能治療，其病因包括多種，其中內分泌性高血壓是其中一種。第一種是醛固酮引起的原醛癥，推薦醛固酮/腎素活性ARR為原醛癥首選（一線）篩查指標。另一種是庫欣綜合癥，主要檢測糖皮質激素。這兩種類固醇激素都可開發質譜檢測法，靈敏度高、特異性強并可標準化分析。美國J Clin Endocrinol Metab宣布2015年開始提交手稿只接受質譜方法進行的激素檢測。中心實驗室已建立19種類固醇激素的質譜檢測方法。甲亢、甲低也會引發內分泌高血壓，國際溯源性參考方法也是質譜檢測法。內分泌高血壓也會由嗜鉻細胞瘤引起，質譜法檢測兒茶酚胺及代謝產物7項也是金標準。此外，原發性高血壓中的H型高血壓（在高血壓中占75%）伴有同型半胱氨酸增加，同葉酸缺乏有關。實驗室發展了一種測定試劑盒可以同時檢測同型半胱氨酸、葉酸、B6、B12，可以了解具體的代謝通路問題。

作為主辦單位，劉文蘭研究員最后做會議總結，感謝各位專家精彩演講、贊助商和會務組的辛勤工作。會議得到賽旺生物、英盛生物、凱萊譜等單位的特別支持，也得到布魯克質譜、安捷倫、維科托、逗點生物的支持。

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