暗視野顯微鏡(dark field microscope)是光學顯微鏡的一種,也叫超顯微鏡(ultramicroscope )。暗視野顯微鏡(dark field microscope)的聚光鏡中央有擋光片,使照明光線不直接進入物鏡,只允許被標本反射和衍射的光線進入物鏡,因而視野的背景是黑的,物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見到小至 4~200nm的微粒子,分辨率可比普通顯微鏡高50倍。
暗視野顯微鏡是利用丁達爾(Tyndall)光學效應的原理,在普通光學顯微鏡的結構基礎上改造而成的。暗視野聚光器,使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光改變途徑,傾斜地照射在觀察的標本上,標本遇光發生反射或散射,散射的光線投入物鏡內, 因而整個視野是黑暗的。
暗視野顯微鏡的基本原理是丁達爾效應。當一束光線透過黑暗的房間,從垂直于入射光的方向可以觀察到空氣里出現的一條光亮的灰塵“通路”,這種現象即丁達爾效應。暗視野顯微鏡在普通的光學顯微鏡上換裝暗視野聚光鏡后,由于該聚光器內部拋物面結構的遮擋,照射在待檢物體表面的光線不能直接進入物鏡和目鏡,僅散射光能通過,因而視野是黑暗的。暗視野顯微鏡由于不將透明光射入直接觀察系統,無物體時,視野暗黑,不可能觀察到任何物體;當有物體時,以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見。在暗視野觀察物體,照明光大部分被折回,由于物體(標本)所在的位置結構,厚度不同,光的散射性,折光等都有很大的變化。
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