精準醫學時代舉足輕重的LCMS／MS

　　在精準醫學領域中，測序與質譜兩種技術是最為常見的檢測手段。在質譜檢測中，液質聯用技術（LC-MS/MS）是近二三十年來發展最快并逐漸成為臨床檢驗領城最富有生命力的新技術之一。LC-MS/MS技術在美歐等西方國家中的臨床應用非常廣泛，已經成為激素檢測、新生兒篩查、血藥濃度監測等常規應用方法。LCMS/MS技術使得許多疾病得以準確、快遠、經濟地檢測和診斷，發揮其他方法不可替代的作用。LC-MS/MS技術在特異性、靈敏度、多組分檢測能力等方面具有明顯的優勢，可以較好地克服免疫學方法的不足，在臨床檢驗城其價值得到充分晟現。隨著質譜儀靈敏度不斷提高、樣品處理技術持續改進、方法標準化和試劑的研發上市，可以預見LC-MS/MS技術將成為臨床檢驗常規應用的重要組成部分，在臨床診斷中發揮舉足輕重的作用。

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　　目前，人們已經將質譜技術應用在激素、新生兒篩查、血藥濃度檢測、維生素代謝、蛋白和多肽檢測等方面，隨著質譜技術和人們認知不斷發展、進步，將會有更多的項目加入到質譜檢測當中。接下來小編將對上述檢測內容的應用情況進行講述。

　　1.激素檢測

　　激素檢測是目前臨床檢驗領城最具挑戰性的檢測之一，因為許多激素具有相似的化學結構，對方法的特異性要求高。此外，大多數激素的濃度低，更有結合、游離形式和性別、年齡之分，對方法的靈敏度要求高。如性激素中的睪酮檢測，用現有的免疫學方法檢測男性睪酮水平性能尚可，但是難以準確檢測婦女、兒童的睪酮水平，因為二者的睪酮水平只有成年男性的1/20~1/10，檢測可靠性大打折扣。然而，使用 LC-MS/MS方法卻能便捷、準確的檢測婦女、兒童的睪酮水平。此外，睪酮的參考方法也有采用LC-MS/MS檢測方法。最后，對于某些復雜的疾病，由于代謝通路障礙，影響該通路上多種激素，需要同時檢測多個激素，面對這種情況，傳統的免疫法很難完成任務。如先天性腎上腺皮質增生癥的診斷可能需要同時檢測17-羥孕酮、11-脫氧皮質醇、雄烯二酮、皮質醇等一系列的激素才能對代謝障礙的具體類型準確區分，因此只有使用高通量的質譜技術才能在最短時間內完成任務。

　　除了性激素外，其它種類的激素，例如糖皮質激素、鹽皮質激素等都已經開始使用LC-MS/MS進行檢測。相比于傳統免疫檢測方法，質譜檢測可無視激素間的干擾，以高特異性、高靈敏度和寬線性范圍的性能實現高精度的定量分析。

　　2.新生兒篩查

　　遺傳代謝病種類多，但發病率低，因此新生兒篩查是診斷先天性代謝缺陷的最主要手段。20世紀90年代，質譜技術開始用于新生兒篩查。不同于以往每次只檢測一種分析物，質譜技術可以在數分鐘內測量幾十種標志物，檢測通量極高。目前，利用質譜技術可實現氨基酸、有機酸和脂肪酸等多種代謝缺陷病的高通量篩查，開辟了新生兒篩查的領城。相比于傳統技術，質譜檢測具有明顯的優點:（1）檢測通量高，數分鐘內可檢出幾十種遺傳代謝病，適于大規模篩查；（2）檢測準確性高，可監測各種分析物的比值，并且假陽性、假陰性率低；（3）采用干血點作為檢材，用血量少，易采集、易保存和運輸，省時方便。

　　3.血藥濃度監測

　　血藥濃度監測（TDM）主要針對治療指數低、個體差異大的藥物，其核心是以血藥濃度為指標，個體化調整用藥方案，變經驗用藥為科學用藥，實現安全有效、經濟合理的治療日標。由于LC-MS/MS在靶向定量分析具有顯著優勢，在早期藥物生物分析領城已經得到成熟應用。LC-MS/MS可以在單次檢測中同時定量分析多個化合物，對于一些合并給藥如免疫抑制劑抗病毒藥物、有活性代謝物、有干攏的代謝物等情況，LC-MS/MS具有特別優勢，從而有力地推動臨床實驗室利用LC-MS/MS建立藥物分析方法，用于治療藥物監測。目前LC-MS/MS在TDM的應用幾乎囊括了所有需要監測的藥物，如免疫抑制劑、抗病毒藥物、抗癲癇物、抗抑郁藥物、抗真菌藥物、抗心律失常藥物、抗生素、抗腫瘤藥物及非法濫用藥物等。

　　4.維生素D代謝產物

　　LC-MS/MS檢測維生素的應用中，維生素D代謝物的發展最為迅猛，影響最大。維生素D缺乏現象在一般人群中極為常見，據統計亞洲地區有78%~98%的普通人群和45%~98%的孕婦缺乏維生素D，即25-羥基維生素D水平低于20 ng/mL。25-羥基維生素（25OHD）是衡量維生素D營養狀態的最佳指標。使用LC-MS/MS可同時檢測25OHD-D2和25OHD -D3，因此被認為是評價維生素D營養狀況的“金標準”測定法明。

　　5.蛋白質

　　LC-MS/MS在蛋白質和多肽定量檢測中已逐漸成為傳統免疫方法之外的使用最多的方法。LC-MS/MS無需特殊的抗體試劑，是檢測翻譯后修飾較好的工具。近年來，不斷有新的LC-MS/MS蛋白質和多肽應用方法問世，包括C肽、胰島素、甲狀腺球蛋白、甲狀旁腺激素、糖化血紅蛋白（ HbAlc）等。樣本處理主要采用胰酶水解蛋白質，形成多肽，應用同位素標記。 LC-MS/MS檢測有望今后為臨床提供更多結果可靠、經濟、高通量、多組分的蛋白質和多肽分析平臺。雖然LC-MS/MS在蛋白質和多肽分析鋒芒初試，但是要變成臨床常規應用的技術還需要克服一些技術障礙，包括提高儀器靈敏度和分析準確度，改善樣品處理自動化程度、蛋白質富集技術、同位素內標等。

展望

　　毫無疑問，LC-MS/MS具有鮮明的特點。與現有的免疫技術相比，LC-MS/MS有靈敏度高、特異性好等方面的優點，但也存在自動化低、僅器復雜、初期投資大的不足。未來，LC-MS/MS講憑借其獨特的優勢在臨床檢驗領域占得一席之地，與免疫技術互補長短。隨著一些技術瓶頸不斷突破，LCMS/MS在臨床檢驗領將更大的突破和發展。