紫外分光光度法和高效液相色譜法測定利巴韋林片含量的比較

摘要 目的：建立紫外分光光度法測定利巴韋林片的含量。方法：采用紫外分光光度法和高效液相色譜法分別測定利巴韋林片的含量。結果：紫外分光光度法平均回收率為100.9%，RSD=0.57%(n=5);高效液相色譜法平均回收率為99.9%，RSD=0.86%(n=5)。結論：紫外分光光度法簡便、快速，兩種方法測定結果一致(P>0.05)。

Assay of Ribavirin Tablets by UV and HPLC

Abstract Objective：To establish an UV method for determining the content of ribavirin tablets.Methods：Ribavirin tablets were determined by ultraviolet spectmphotometer(UV)and high performance liquid chromatography(HPLC).Results：The average recovery of UV and HPLC was 100.9%(RSD=0.57%，n=5)，and 99.9%(RSD=0.86%，n=5)，respectively.Conclusion：UV method was simple and rapid，the result of two methods are similar(P>0.05).

利巴韋林為廣譜抗病毒藥。利巴韋林原料及制劑，《中國藥典》中采用高效液相色譜法(HPLC法)測定其含量，但該法操作時間較長，設備要求較高。筆者參照有關文獻，采用紫外分光光度法(UV法)測定利巴韋林片的含量，并與HPLC法進行比較，現報道如下。

1 儀器與試藥

UV-2401(PC)型紫外分光光度計(日本島津);338型HPLC儀(美國Bemkman公司)。利巴韋林對照品(中國藥品生物制品檢定所);利巴韋林片(0.1g/片，山西晉新雙鶴藥業有限責任公司);其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 UV法

2.1.1 測定波長的選擇：精密稱取經105℃干燥至恒重的利巴韋林對照品適量，加蒸餾水稀釋成濃度為5μg/mL的溶液，以蒸餾水為空白，在180～340nm波長范圍內掃描。可見利巴韋林在207nm波長處有最大吸收峰，與文獻報道基本一致。故選擇207nm波長為測定波長。

2.1.2 標準曲線的制備：精密稱取經105℃干燥至恒重的利巴韋林對照品100 mg，置100 mL量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度，精密取稀釋液0.2，0.4，0.8，1.0，1.6，2.0 mL，置100 mL容量瓶，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為2.0，4.0，8.0，10，16，20 μg/mL的利巴韋林對照品溶液。以蒸餾水為空白，在207nm波長處測定吸收度。以濃度(C)對吸收度(A)計算，得回歸方程為C=21.42A一0.5231(r=0.9998，n=5)。表明利巴韋林濃度在2～20μg/mL范圍內與吸收度呈良好的線性關系。

2.1.3 穩定性試驗：取2.1.2項下濃度為20μg/mL利巴韋林對照品溶液，在25℃，分別于0，1，3，5，10，24h內，207nm處測定吸收度，結果表明吸收度無明顯變化，本品在24h內穩定。

2.1.4 精密度試驗：取2.1.2項下濃度為2.0，10，20 μg/mL利巴韋林對照品溶液，依法測定吸收度，每種濃度重復測定5次。結果RSD分別為0.49%，0.33%，0.68%。

2.1.5 回收率試驗：取2、1、2項下濃度為2.O，8.0，10，2Oμg/mL利巴韋林對照品溶液，依法測定吸收度，由回歸方程求得含量，計算回收率。

2.1.6 樣品含量測定：取利巴韋林片20片，精密稱定，平均片重0.1452g，研細。精密稱取利巴韋林片粉適量，用蒸餾水配制成含利巴韋林1mg/mL的溶液，用干濾紙過濾，棄初濾液。取續濾液1.0mL于100mL量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度。按2.1.2項下方法操作，依法分別測定4批樣品的含量，重復3次，計算標示量%。

2.2 HPLC法

2.2.1 色譜條件：色譜柱為Kromasil C18柱;流動相為水，流速為1.0 mL/min，紫外檢測波長為207nm，柱溫30℃。

2.2.2 標準曲線的制備：精密稱取經105℃干燥至恒重的利巴韋林對照品100 mg，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取利巴韋林對照品溶液1，2，3，4，5 mL，分別置100mL量瓶中，加流動相稀釋并搖勻。按上述色譜條件分別取樣10μL測定。以利巴韋林對照品溶液濃度C對峰面積S進行回歸，得回歸方程S=24.8157C+0.2012(r=0.9999，n=5)。

2.2.3 回收率試驗：取2.2.2項下濃度為10，20，50μg/mL的利巴韋林對照品溶液，依法測定，結果回收率分別為99.5%，98.8%，101.4%，平均回收率為99.9%，RSD=0.86%(n=5)。

2.2.4 樣品含量測定：取利巴韋林片20片，精密稱定，研細。精密稱取利巴韋林片粉適量(約相當于利巴韋林2mg)，置100mL量瓶中，加流動相稀釋并搖勻，用干濾紙過濾，棄初濾液。取續濾液按上述色譜條件分別取樣l0 測定，重復3次，共測定4批樣品的含量，按外標法計算標示量(%)，并與uV法測定的結果進行統計學比較。

3 討論

利巴韋林又稱三氮唑核苷，從化學結構分析可知其具有紫外吸收特性。筆者所選的測定波長與文獻報道一致，經過紫外掃描顯示利巴韋林片中的賦形劑無干擾。利巴韋林易溶于水，所以利巴韋林片可用水為溶劑來配制樣品溶液;同時也以水作為HPLC法的流動相。UV法和HPLC法測定利巴韋林片的含量，賦形劑均無干擾。UV法穩定，快速準確，與HPLC法比較無顯著性差異(P>0.05)，二者測定結果一致，均可用于利巴韋林片的質量控制。

參考文獻：

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