羊源性成分核酸檢測PCR熒光探針試劑盒實驗參考標準

*、羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒規范曲線

1.定量辦法：規范曲線zui少由5個濃度組成，測定次數不少于5次，以斷定作業濃度規模和IC50規模。
2.定性辦法：作業濃度規模經過陰性、臨界值濃度和陽性的樣品測定來斷定，每個濃度重復不少于5次，濃度與響應值之間應有必定的。
第二、檢查限和定量限
1.檢查限：20份空白樣品測定均值加3倍規范差。
2.定量限：應大于規范曲線中zui低濃度點。關于定量辦法，應對該濃度樣品zui少測定6次進行驗證，而不能經過外延法揣度。
第三、臨界值（cut-off值）的斷定
關于有zui高殘留定量的藥物，檢查辦法的臨界值為20份增加MRL濃度的樣品重復3次測定的均值減去1.64倍規范差，即95%置信限處。
關于禁用藥物，檢查辦法的臨界值為定量限，該值應到達公認的目標。
第四、羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒精密度和準確度
關于有zui高殘留定量的藥物，增加濃度為MRL及MRL上下各一個濃度；關于禁用藥物，增加濃度為定量限和2倍定量限，每個增加濃度zui少測定5個平行樣，并zui少進行3批實驗（不一樣檢查日期，不一樣規范曲線，不一樣批次試劑盒）。
1.準確度：回收率規模大于40%或契合相應檢查規范的要求。
2.精密度：以變異系數表明。
批內變異系數：每批平行樣之間的變異系數小于或等于25%，關于禁用藥物小于或等于30%.
批間變異系數：一切樣品之間的變異系數值小于或等于30%，elisa試劑盒關于禁用藥物小于或等于40%.
定性辦法：陰性和陽性樣品各測定不少于50份，斷定假陽性率和假陰性率。
第五、穿插反應
試劑盒與待檢藥物類似物、代謝物或一起存在的藥物測定穿插反應率。
第六、保留期
保留期經過保留條件的穩定性實驗結果斷定。
第七、羊源性成分核酸檢測PCR-熒光探針試劑盒復核實驗
1.定量辦法：檢查限、IC50以及zui少兩個增加濃度的準確度和精密度，并與理化辦法（或與具代表性進口試劑盒）對比。
2.定性辦法：檢查限、假陽性率和假陰性率。