實驗概要
了解動物膽汁和胰液的分泌,以及神經、激素對它們分泌的調控。
實驗原理
胰液和膽汁的分泌受神經和體液兩種因素的調節。與神經調節相比較,體液調節更為重要。在稀鹽酸和蛋白質分解產物及脂肪的刺激作用下,十二指腸粘膜可以產生胰泌素和膽囊收縮素。胰泌素(促胰液素)主要作用于胰腺導管的上皮細胞,引起水和碳酸鹽的分泌;而膽囊收縮素主要引起膽汁的排出和促進胰酶的分泌。此外,膽鹽(或膽酸)亦可促進肝臟分泌膽汁,稱為利膽劑。
主要試劑
40%酒精生理鹽水合劑、0.4% HCl溶液、膽囊膽汁、腎上腺素1:10000、乙酰膽堿1:1000。
主要設備
兔手術臺、常用手術器械、注射器及針頭、各種粗細的塑料管(或玻璃套管)、紗布、絲線。
實驗材料
兔。
實驗步驟
1. 收集胰液和膽汁的方法
1) 按常規行氣管插管術后,于劍突下沿正中線切開腹壁10 cm,拉出胃;雙結扎肝胃韌帶從中間剪斷。將肝臟上翻找到膽囊及膽囊管;然后,用注射器抽取膽囊膽汁數毫升備用。
2) 膽管插管 通過膽囊及膽囊管的位置找到膽總管,插入膽管插管,并同時將膽總管十二指腸端結扎。
3) 胰管插管 從十二指腸末端找出胰尾,沿胰尾向上將附著于十二指腸的胰液組織用鹽水紗布輕輕剝離,約在尾部向上2~3 cm處可看到一個白色小管從胰腺穿入十二指腸,此為胰主導管。待認定胰主導管后,分離胰主導管并在下方穿線,盡量在靠近十二指腸處切開,插入胰管插管,并結扎固定。
2. 實驗項目
1) 觀察胰液和膽汁的基礎分泌: 未給予任何刺激情況下紀錄每分鐘分泌的滴數。膽汁為不間斷地少量分泌,而胰液分泌極少或不分泌。
2) 酸化十二指腸的作用: 將十二指腸上端和空腸上段的兩端用粗棉線扎緊,而后向十二指腸腔內注入37℃的0.4% HCl 25~40 ml,記錄潛伏期,觀察胰液和膽汁分泌有何變化(觀察時間約10~20 min)。
3) 耳緣靜脈注射膽囊膽汁l~2ml,觀察胰液和膽汁的分泌量有何變化。
4) 耳緣靜脈腎上腺素lml,觀察胰液和膽汁的分泌量有何變化。
5) 耳緣靜脈注射乙酰膽堿l~2 ml,觀察胰液和膽汁的分泌量有何變化。
注意事項
1. 術前應充分熟悉手術部位的解剖結構。
2. 手術操作應細心,盡量防止出血,若遇大量出血須完全止血后再行分離手術。
3. 剝離胰液管時要小心謹慎,操作時應輕巧仔細。
4. 實驗前2~3 h給動物少量喂食,用以提高胰液和膽汁的分泌量。
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