艾蒿花粉主要變應原的分離、純化與鑒定

【摘要】　目的　對我國蒿屬花粉中常見、重要的變應原艾蒿花粉進行分離、鑒定與純化。方法采用不同的提取液得到艾蒿花粉粗浸液,經飽和(NH4 ) 2 SO4 分級沉淀后用聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE) 分離蛋白質組分,并用凝膠成像系統測定各組分的相對分子質量( Mr ) ;采用Western blot 鑒定其主要及次要變應原;通過DEAE2Cellulose DE232 離子交換層析(ion exchange chromatography , IEC) 和Sephadex G275 凝膠層析(gel chromatography) 對艾蒿花粉變應原進行純化。結果　分離后得到20 多種
蛋白質組分,其中Mr 為58 ×103 、38 ×103 、25 ×103 、20 ×103 、16 ×103 等5 個條帶蛋白含量最豐富;分離到的蛋白質組分中有9 種蛋白能與確診的蒿屬花粉過敏患者血清中蒿屬花粉特異性IgE 結合,其中Mr 為62 ×103 、43 ×103 、38 ×103 的蛋白條帶的結合率最高;經純化后僅得到Mr 為62 ×103 的主要變應原。結論　艾蒿花粉的主要變應原Mr 分別為62 ×103 、43 ×103 和38 ×103 ,層析技術可以對Mr 為62 ×103 的主要變應原成分進行純化。