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  • 發布時間:2020-01-03 16:21 原文鏈接: 蛋白質提取純化的方法有哪些?

      蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛,要利用不同蛋白間內在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質的污染,而利用各蛋白質的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。

    圖片來源于網絡

      根據蛋白質溶解度不同,蛋白質的分離純化可分為鹽析法和等電點沉淀法。鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類而使溶解的物質析出的過程。如:向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液后,可以降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出。這是一種物理變化,可復原。

      等電點沉淀法是利用蛋白質在等電點時溶解度最低而各種蛋白質又具有不同等電點的特點進行分離提取的方法。在等電點時,蛋白質分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負電荷相等),此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒極易碰撞、凝聚而產生沉淀,所以蛋白質在等電點時,其溶解度最小,最易形成沉淀物。等電點時的許多物理性質如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小,從而有利于懸浮液的過濾。

      需要注意的是,不同的蛋白質,具有不同的等電點。在生產過程中應根據分離要求,除去目的產物之外的雜蛋白;若目的產物也是蛋白質,且等電點較高時,可先除去低于等電點的雜蛋白。同一種蛋白質在不同條件下,等電點不同。

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