血栓與止血的質量控制

     在血栓與止血檢驗的全過程中，實驗結果會受到諸多因素的影響。質量控制是保證實驗結果準確的重要措施。當實驗出現意想不到的結果時，應從各方面尋找原因，最后找到問題所在，通過改進措施，得到一個準確的結果。
一、受檢狀態的影響：
    受檢者的狀態，如被測者生理變化、飲食改變、環境因素、服用藥物等引起變化，在采集血標本時若未注意到這些因素也會對結果做出錯誤判斷。
    不同的藥物和某些生理狀況（如懷孕、情緒激動、劇烈運動）會對一些凝血結果造成影響。阿斯匹林、潘生丁和抵克利德等藥物能抑制血小板聚集，肝素和口服抗凝劑能抑制凝血機能。尿激酶（UK）和鏈激酶（SK）等可進促纖溶功能。口服避孕藥會使血小板粘附功能、血小板聚集功能、纖維蛋白原、凝血酶原以及凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ 因子活性明顯升高。劇烈運動和月經期纖溶活性明顯升高，高脂肪食物造成血脂升高可抑制纖溶活性。吸煙可使血小板聚集性明顯升高。飲酒可抑制血小板聚集性。劇烈運動或輸注腎上腺素時，Ⅷ因子活性會快速上升。
    因此，當出現一些意想不到的結果時，應考慮是否有以上因素的影響。
二、標本的采集：
1.確認病人的姓名，采血管上應注明病人的姓名，同檢驗申請單核對，避免張冠李帶。
2.受檢者必須在休息狀態下，并且在早餐前采血，對于觀察療效和預防臨床出血病人的監測最好在同一條件下采血。
3.采集血液必須用塑料或硅化的玻璃注射器，避免凝血因子激活，最好使用雙筒注射器采血，禁用血氣用的注射器。
4.針頭必須采用21號（外徑0.8mm）以上，兒童可用23號。
5.止血帶不應扎得過緊，最好不要超過5分鐘。
6.采血人員應技術熟練，“一針見血”，以防組織損傷，由于外源性凝血因子進入針管，會使凝血因子激活，可造成PT和APTT時間縮短。取血時，拉針的速度要慢并且均勻，使血液平穩地進入注射器，防止氣泡產生。泡沫的產生可使纖維蛋白原，因子V和因子Ⅶ變性。
7.迅速將血液與抗凝劑輕輕的顛倒混勻，避免用力振蕩而破壞凝血蛋白。
8.采集后的血液應放在加塞子的試管內，因為未加塞子的試管會使血液中的CO2丟失，PH升高，使PT和APTT時間延長。
9.分離血漿時用塑料吸頭移取，并盛放在塑料管內。因玻璃表面能激活凝血過程，從而使凝血時間縮短。
    總之，實驗人員采血最好，因為他們知道采血的注意事項，也能盡量縮短采血后至實驗前標本放置的時間。
三、標本的制備：
1.采血之后血液在室溫放置時間不能超過2小時。
2.全血貯存在4-10℃不超過2小時，最好在1小時內分離血漿，-20℃可保存2周，-80℃可保存18個月，冷凍血漿中的凝血因子在越低溫度下越穩定。
3.如果檢測冷凍血漿，必須在37℃水浴中快速溶解，冷凍過的血漿不能再次冷凍。冷凍血漿融化時，不能在室溫中讓其自然融化，這樣會使纖維蛋白原析出和凝血因子消耗。
4.溶血標本可造成PT和APTT輕微縮短。
5.血漿制備，血樣應在2000-2500g離心10-15分鐘。
四、抗凝劑
1.標本應采集在含有枸櫞酸鈉（109mmol/L）抗凝劑的試管內，抗凝劑與血的比例應為1：9，混勻要充分。
2.應準確把握抗凝劑的濃度。即Na3C6H5O7. 2H2O為3.2％, Na3C6H5O7. 5H2O為3.8％。
3.當Hct>0.55或Hct<0.25時，務必用MacGann推薦的公式計算抗凝劑的用量，抗凝劑的用量（ml）＝0.00185×全血量（ml）×〔1-Hct（%）〕，否則結果不可信，Hct低可使PT和APTT凝固時間縮短，Hct高可使PT和APTT凝固時間延長。
4.如果自配抗凝劑，枸櫞酸鈉應為基準試劑或分析純試劑。
5.抗凝劑＋抗聚劑：通常選用CTAD液，成份：枸櫞酸鈉0.11mol/L，茶堿15mmol/L，腺苷3.7mmol/L，潘生丁0.198mmo1/L。優點：采血后血小板很少活化，且保存時間可超過15小時。
6.抗凝劑＋抗纖溶劑：在溶栓治療的實驗室監測中，若用常用抗凝劑會使纖溶系統持續激活，可使纖維蛋白原及其降解產物（FDP）的定量比現差異。應該使用“抗凝劑十抗纖溶劑”的抗凝劑，抗纖溶劑可選用抑肽酶，它可以抑制激肽釋放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶、凝血因子和纖溶活性，能精確測定纖維蛋白原，但會引起凝血酶時間的延長。
五、試劑
1.蒸餾水：使用重蒸水比用去離子水好，蒸餾水的PH為6.0-7.0。水質不能有混濁，應無菌，無Ca2+、無致熱源。
2.有保護劑、抗生素、抗體或其它添加劑的水不能用于溶劑試劑。
3.復溶后的試劑，不用時應加蓋子，儲存在2-8℃，APTT和FIB均不要冷凍保存。冬天運輸時，注意防凍。
4.稀釋倍數要準確，并標明復溶或開瓶時間。復溶后在冰箱中貯存時間不能過長，國產試劑最長7天，復溶試劑需用幾天的，不應在預溫槽中放置時間過長，最好取出部分試劑，剩余即放回冰箱內冷藏。
5.試劑與質控品均應在有效期內使用。
6.溶解試劑時不能劇烈振搖，防止產生氣溶膠。

六、操作
1.檢查所有試劑和緩沖液是否有沉淀、污染等問題，發現異常情況應及時更換。
2.更換不同廠家或同一廠家不同批號的試劑時，使用之前必須重新進行定標，這一點必須切記！
3.檢查孵育或溫度設置是否正