血清對于在傳統培養基配方中生長和增殖的大多數細胞系來說是需要的,因為大多數單獨的培養基并不能提供細胞生長所需要的全部營養。
如MEM培養基,較為常用的量為8%~10%的比例,原代培養使用量為15%~20%,而特殊的低血清培養基血清量可降至3%左右,細胞的形態和功能不受影響。
用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等,如造血干細胞分化培養,馬血清是必加成分。選擇用牛血清培養細胞的原因主要是來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。
牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。小牛血清取自出生10~30天的小牛;新牛血清取自出生24 小時之內的新生牛;胎牛血清應取自剖腹產的胎牛。
顯然,胎牛血清是品質zui高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分zui少。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的。
但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適,牛血清中含有豐富的細胞生長必須的營養成份,具有極為重要的功能。
血清是非常復雜的混合物,成分多樣,對細胞生長具有促進作用
①提供基本營養物質,如氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質;
②提供激素和各種生長因子,如胰島素、腎上腺皮質激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)、成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等;
③提供結合蛋白,可攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵,在細胞代謝過程中起重要作用;有些情況下結合蛋白能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用;
④血清能提供促接觸和伸展因子,使細胞貼壁免受機械損傷,對培養中的細胞起到某些保護作用;
⑤能夠維持培養基的pH 值,起酸堿緩沖液作用;
⑥有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發現的,現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代;
⑦血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用;
⑧血清還含有一些微量元素和離子,它們在代謝穩定和解毒中起重要作用。
但是血清的加入也帶來了很多問題:
①血清的成分可能有幾百種之多,目前對其準確的成分、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;
②血清都是批量生產,各批量之間差異很大,這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等,而且與取血動物的來源關系密切。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環境因素都可能影響血清的質量。
要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制。因此選好了一種血清就要盡可能長期使用它。在需要更換時,也要盡量保持與原有的一批血清相似。現在很多公司都提供血清預留,你一旦選定了某個批次的血清,zui好備足一年的量,這樣可以避免很多麻煩;
③對大多數細胞,在體內狀態,血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態,血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞);
④血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺,補體、抗體、細菌毒素等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡;
⑤血清取材中可能帶入支原體、b毒,如具有爭議的黑膠蟲,對細胞產生潛在影響;
⑥大規模生產中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構成生產成本的主要部分。
科學家利用一名被毒蛇咬過數百次的男子身上的抗體制成了一種有效的抗蛇毒血清。這種療法可以保護老鼠免受包括眼鏡王蛇在內的19種致命蛇類的毒液侵害。5月2日,相關研究成果發表于《細胞》。這種抗蛇毒血清結合了......
通過使用對蛇毒具有自體超免疫的人類捐贈的抗體,科學家開發出了迄今為止最廣譜的抗蛇毒血清。小鼠試驗顯示,這種抗蛇毒血清能抵御黑曼巴蛇、王蛇和虎蛇等的蛇毒。該抗蛇毒血清結合了保護性抗體和小分子抑制劑,為通......
U.S.來源的血清是指采集自美國境內,并且采集地點持續接受美國農業部(USDA)檢查的地區生產的血清。而USDA來源的血清則是指采集自美國境外,但經過USDA批準允許進口到美國的地區生產的血清。這些地......
“原產地”是指血清采集的國家。而“可溯源性”是指追溯血清從源頭到生產加工和供應的文件。血清是一種因原產地國家不同而存在價格差異的商品。血清是取自動物體的生物制品,其品質主要取決于血液供體的健康狀態。例......
血清的來源(或原產地)是指采集未加工血液的國家。需要注意的是,這與血清分離、過濾或其他加工處理所在的國家是不同的,二者可能并不相同。因此,血清供應商的COA文件(證書)應該明確寫明血清的原產地和加工信......
血清是從生物來源提取的,其成分會因供體動物的年齡、生理狀況、營養狀態等因素而存在批次之間的差異。為了盡可能減少應用變化,廠家會對每個批次均執行嚴格的質量檢測,使用高質量標準,盡可能確保批間一致性。......
血清的顏色主要取決于其中的血紅蛋白濃度。血紅蛋白是一種含鐵的蛋白質,其顏色與鐵元素的狀態以及與氧氣的結合情況有關。血清中血紅蛋白濃度的不同會導致顏色的差異,但這種差異并不會影響血清的性能。因此,在使用......
熱滅活是一種通過在56°C水浴中處理30分鐘來破壞血清中補體的活性的常用處理方法。在免疫學應用、培養胚胎干細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,通常推薦使用熱滅活的血清。這是因為熱滅活可以去除補體蛋白的活性,......
γ輻照是一種利用放射性同位素鈷-60(??Co)產生的25-40kGy劑量γ射線對物質進行照射的技術。??Co通過β衰變放出高能γ射線,這些射線具有極強的穿透能力和殺菌作用,能滅活血清中的病毒和其他外......
血清中出現沉淀的原因多種多樣:1、反復凍融會導致血清中的脂蛋白變性,從而引起渾濁。可以通過將血清分裝成單次使用量來減少凍融次數,進而盡量避免這種情況的發生。2、血清是在低溫環境下快速加工的,以保持其生......