詳述液體內沉淀試驗

一、絮狀沉淀試驗

絮狀沉淀試驗為歷史較久，又較有用的方法。該法要點是：將抗原與抗體溶液混合在一起，在電解質存在下，抗原與抗體結合，形成絮狀沉淀物。這種沉淀試驗受到抗原和抗體比例的直接影響，因而產生了兩種最適比例的基本測定方法。

（一）抗原稀釋法

抗原稀釋法（Dean-Webb法）是將可溶性抗原作一系列稀釋，與恒定濃度的抗血清等量混合，置室溫或37℃反應后，產生的沉淀物隨抗原的變化而不同。表12-1系以牛血清白蛋白為例的實驗結果。

表12-1Dean-Webb定量沉淀試驗

單位：mmol/L

從表12-1可以看出，1～5管為抗體過剩管，7～10管為抗原過剩管，唯第6管沉淀物最多，兩者之比為16:1，即最適比。

（二）抗體稀釋法（Ramon）法

本法采用恒定的抗原量與不同程度稀釋的抗體反應，計算結果同上法，得出的是抗體結合價和最適比。

現今，為了取得抗原與抗體的最佳比例，已將以上兩法相結合，即抗原和抗體同時稀釋，稱為棋盤格法（亦稱方陣法），找出最佳配比。舉例見表12-2。

表12-2方陣最適比測定

“＋”為沉淀物量：為最適比

從表12-2可以看出，方陣法可較正確地找出抗原與抗體的最適比。如抗體用1:40。抗原則按1:320稀釋；如抗原是1:160，抗本則用1:20最為恰當。

二、環狀沉淀試驗

環狀沉淀試驗是Ascoli于1902年建立的，其方法是：先將抗血清加入內徑1.5～2mm小玻管中，約裝1/3高度，再用細長滴管沿管壁疊加抗原溶液。因抗血清蛋白濃度高，比重較抗原大，所以兩液交界處可形成清晰的界面。此處抗原抗體反應生成的沉淀在一定時間內不下沉。一般在室溫放置10min至數小時，在兩液交界處呈現白色環狀沉淀則為陽性反應。本技術的敏感度為3～20μg/ml抗原量。環狀試驗中抗原、抗體溶液須澄清。該試驗主要用于鑒定微量抗原，如法醫學中鑒定血跡，流行病學用于檢查媒介昆蟲體內的微量抗原等，亦可用于鑒定細菌多糖抗原。因該技術敏感度低，且不能作兩種以上抗原的分析鑒別，現已少用。

（責任編輯：xgh）