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  • 發布時間:2020-02-26 22:46 原文鏈接: 質粒純度不高的原因

    1 ) 混有蛋白:

    不要使用過多菌體。溶液P1、P2、P3 處理并離心后溶液應為澄清的,如果還混有微小蛋白懸浮物,可再次離心去除后再進行下一步驟。

    2 ) 混有 RNA :

    RNase A處理不徹底,請減少菌體用量或加入溶液P3之后室溫放置一段時間。如果溶液P1已保存6 個月以上,請在溶液P1中添加RNase A。

    3 ) 混有基因組 DNA :

    加入溶液P2和P3后應溫和混勻,如果劇烈振蕩,可能把基因組DNA剪切成碎片從而混雜在質粒中。如果加入溶液P2后過于粘稠,無法溫和混勻,請減少菌體用量。細菌培養時間過長會導致細胞和DNA的降解,不要超過16h。

    4 ) 質粒的二聚體和多聚體形式:

    質粒復制過程中形成的,與宿主菌相關,電泳可檢測出。


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