賽多利斯——制藥領域中的微生物風險監控

發布時間：2020-03-08 14:25 原文鏈接：賽多利斯——制藥領域中的微生物風險監控

如今的生物技術領域中，微生物和真核細胞作為特定的供試菌株、藥品成分有著越來越重要的意義了。設想一下，1928年，若不是Alexander Flemming醫生偶然從細菌產生的黃青霉中發現了青霉素，我們難以想象今天會是怎樣的世界。

目前，全球藥品生產領域以每年大約9620億美元（2012年數據）的銷售額而躍居為當今舉足輕重的工業領域。此領域提供的醫藥產品是人們日常生活中的必需品，并像其他工業產品一樣分為常規藥品和有規定的特殊藥品。但由于藥品的使用對象是人類或動物，它們被列為“特殊類型物資”，有著特殊的待遇。

圖1. Sterisart NF無菌檢測系統的泵包括顯示屏和條碼掃描儀，它可在無菌測試中輸送所需的介質

▇ GMP管理規范監管下的藥品生產

日常使用的眼藥水很易受到銅綠假單胞菌的污染，比如，1968年在瑞典發生的眼藥水污染事件，使用了受污染的眼藥水后人們的視力明顯降低，嚴重時會導致失明。如果病原體（細菌、病毒、真菌、寄生蟲）成功進入血液并不斷繁殖，則被稱為敗血癥，這是病原體或其毒素對人體免疫系統報復。

因此在藥品生產質量管理規范GMP中規定了藥品生產企業的義務，質量保證和質量管理部門采取一定的措施來保證藥品的安全可靠性。

GMP的內容不僅涉及到藥品本身，也涉及到藥品的生產、包裝和藥品檢驗以及供貨中所有的原材料，包括了機床設備和儀器儀表。GMP規范的核心是人：人的衛生、人的素質。藥品生產過程中重要的就是要把微生物的污染降低到低程度，終產品藥微生物污染的在線監控和殺菌是佳的，也是藥品生產基本的組成部分。

Sartorius就是這樣一個為制藥企業提供專業產品和技術服務的企業，他們認為產品的質量和安全可靠性和是藥品生產的重中之重。而藥品生產的質量監控也為藥品生產企業提供了可靠的解決方案。該公司提供的藥品生產質量監控產品包括了從分析天平開始到純凈水制造系統、吸液管和耗材，還包括領域中的創新產品。

比如：Microsart filter濾器、 Mycoplasmen檢測試劑盒和空氣采樣器。在注射藥物終產品的無菌測試中也有像Sterisart NF這樣的產品。

圖2. 集成式的條碼掃描儀方便了Sterisart NF無菌檢測系統原始包裝條碼的掃描和記錄

▇ 注射藥物正確的無菌測試

對注射、輸液或者移植到人、動物體內的藥品的無菌測試有著非常高的要求。無菌檢驗是關系到整批次產品是否合格的決定性評判標準。終產品的無菌檢測既可由來完成，也可由具有認證資質的獨立第三方來完成。

根據國際藥典（USP<71>， EP2.6.1， JP4.06， WHO QAS/11.413 final），無菌檢測不僅適用于注射藥物，也適用于眼藥水、軟膏、護膚霜、噴霧藥劑和固體形式的外科縫合材料。無菌測試樣本中微生物的培育方法早在1930年就已經出現了。需要檢測的藥用產品不是按照USP<71>或者EP2.6.1進行過濾，采用的方法是在沒有其他可能性的情況下直接“接種”微生物。

無菌測試是在受控的無菌環境中進行的，既可在具有潔凈室等級A級的隔離室中進行，也可在潔凈室等級A級的實驗室中潔凈室等級B級的環境中進行。應規定好無菌測試過程中關鍵區域，避免交叉污染，保證微生物不會影響無菌測試過程。

在環境條件的監控中要選擇一些合適的方法，例如利用MD8 Airscan臺式浮游菌采樣儀在不干擾潔凈室保護區的情況下主動采集空氣樣本。在要求特別嚴格的區域內，例如在灌裝、隔離室或在吹瓶-灌裝-密封系統的區域內，用戶對GMF明膠濾膜很高的病毒、微生物濾除和回收率很有信心。無菌測試對系統、材料以及執行無菌檢測人員的要求也很高，訓練有素的實驗員很有必要。

圖3. Sterisart NF無菌檢測系統的Septum變型也可以用于無菌測試，圖示的變型就是一種短雙針、可自動無菌通風的安全平臺式的變型

▇ 無菌測試應注意些什么？

首先要弄清楚醫藥產品銷售國的有關規定，這是進行無菌測試的前提條件。例如：幾乎在所有國家里無菌測試都是在兩種介質、兩個培養皿組成的系統中進行的。但在中國則必須使用三皿的變型系統進行無菌測試的菌株培育。

早在1975年時,席勒系統在德國非常，甚至在歐洲也得以普及。但它卻因為組裝耗時多、易出現假陽性結果等不被美國、日本等國接受。

對于無菌測試的步驟有明確規定：需要有符合潔凈室質量標準的壓縮空氣源，例如：蠕動泵負責將膜濾后的分析液輸送到無菌檢測單元中去；經膜濾設備（標準過濾精度0.45μm）過濾后，病菌都被截留在系統外；抗生素和其他生長抑制劑成分也可以輕松地被清除掉。

若被測藥品為粉末，則應先溶解后檢測，然后密封好兩個培育皿，添加合適的營養液，檢測好氧菌時加入CASO，檢測厭氧菌時添加流體硫乙醇酸鹽培養基。允許使用的沖洗器可以在USP<71>中查閱。一般情況下沖洗器或盛放產品的隔膜需要多次被刺穿，要注意針頭足夠鋒利。

為使無菌測試過程符合GMP管理規范要求，測試過程中所使用的所有元器件，包括無菌測試系統，都要有批量可追朔性；好是每一件包裝的條碼都可以掃描識讀，把數據按照“聯邦法規”（21CFR Part 11）的規定保存為PDF格式的文件。

圖4. Sterisart NF無菌檢測系統的Septum變型可以完成從培育容器中無菌取樣的操作，絕無交叉污染的風險

▇ 無菌制劑的安全可靠性

在檢測指定的無菌制劑時，Sartorius公司研發了終檢驗用的Sterisart NF 一次性檢測系統，它是封閉的、一次性使用的系統，可完成袋、注射器、瓶、安瓿和粉末的無菌檢測，其基本原理是膜過濾技術。研發SterisartNF系統的目標是：實現可重復再現的可靠結果，避免出現假陽性和假陰性檢測結果。

經過14天的交叉污染培育或產品變型后，可將無菌樣本從培養皿取出或加入營養液（如青霉素酶抑制抗生素）。如今，提取大多數都是通過穿刺針刺穿軟管、然后用滴液管加入溶液來完成的。這樣，不僅交叉污染的風險提高了，且實驗員被針頭誤傷的幾率也變高了。利用Septum版的Sterisart NF無菌檢測系統可明顯降低提取過程中的風險，方便提取操作。

Septum技術在醫藥領域得到了廣泛的認可，并成功被推廣應用。Septum系統可以用封口帽密封起來，必要時可用沾有異丙醇的濕巾擦拭。USP<71>建議：“...開始培育14天后，將一定份額（不少于1ml的介質）注入有營養液的新容器中...。”這里的液體提取轉移過程可用Septum版的無菌檢測系統可靠、安全的完成。

液體轉移可利用申請保護的雙針來實現。這種不銹鋼材料制成的雙針非常鋒利，在穿刺Septum系統時非常省力；另一方面，與傳統的單針相比較它的使用操作也非常方便，因為它無需使用單獨的通風過濾器。

Sterisart NF無菌檢測系統的泵可以有效的幫助完成被測產品向無菌檢測系統中的液體轉移過程中。系統中集成的條碼掃描儀可使用戶輕松完成所有無縫連接的可追朔記錄。例如完成所有介質、Sterisart NF無菌檢測系統的連接。

這種泵的一個重要特點就是：它是按照潔凈室使用條件設計的。泵表面使用的是316L號不銹鋼材料，可在純凈工作臺上使用，也可集成在隔離室中使用。

除了H2O2兼容性之外，它的每個零部件都有很好的抗紫外線照射消毒和耐高壓消毒的能力。這對于超凈工作臺上來說是很有必要的。這一滿足GMP藥品生產質量管理規范要求的Sterisart NF泵是全封閉的，一條通風換氣的縫隙都沒有。