實驗室里培育的油菜花 課題組供圖
近日,《植物通訊》上在線發表了題為《利用CRISPR編輯BnaIDA基因創建抗裂角、花器官不脫落和避菌核病甘藍型油菜新種質》的論文。該研究利用CRISPR/Cas9系統成功同時編輯了植物小肽基因BnaIDA-A07/C06,獲得了不含外源T-DNA的穩定遺傳雙突變株系;并顯示該株系具有避菌核病、花器官不脫落和抗裂角的優良性狀。
油菜是我國種植面積最廣的油料作物之一,是主要的食用油來源。我國每年需進口大量食用植物油,約占消費量的60%-70%,嚴重威脅食用油供給安全。現今,為充分發揮油菜多功能性,促進一二三產業融合發展,國內油菜不僅是我國主要食用油來源,也逐漸成為觀賞性植物,是我國鄉村振興重要經濟作物之一。菌核病是嚴重影響油菜產量的病害之一,通常在田間通過釋放子囊孢子在花瓣上進行初次萌發,最后掉落在濕度較大的油菜葉片和葉腋處大面積發病,帶來了巨大的產量損失。再加上油菜采收機械化程度較低,機械收割過程中籽粒損耗多,導致了生產成本高,種植油菜積極性不高等一系列問題。
在擬南芥中,花器官的脫落受到IDA小肽、HAE/HSL2受體、MAP級聯信號及其下游KNOX轉錄因子的調控;IDA信號通路主要調控花器官脫落的后期,通過促進細胞壁的酶解,直接誘導花器官的脫落。
該研究成功從油菜中克隆出IDA的同源基因:通過生物信息學方法比對后,發現BnaIDA-A07/C06基因與擬南芥IDA的親緣關系最近,且在花和角果中高表達。接著利用CRISPR/Cas9基因編輯系統對這兩個基因同時編輯,并通過自交,成功分離出外源Cas9蛋白,獲得的純合ida-d17突變體從開花期至角果完全成熟的過程中,花器官始終不脫落,可延長油菜花的觀光時間。
角果開裂也是一種細胞分離過程。由于角果成熟的不一致性,油菜籽粒的損失明顯。對ida-d17的成熟角果進行開裂力測試發現,ida-d17的角果抗裂能力增強。自然條件下,核盤菌子囊孢子在油菜凋落的花瓣中帶菌率最高,那么,阻斷花器官的脫落是否可防止菌核病的傳播呢?與野生型相比,課題組發現在人工條件下,盡管核盤菌子囊孢子仍在ida-d17突變體的花瓣中萌發,并表現出弱的病癥,但由于花瓣不脫落,核盤菌無法在濕度較大的油菜葉片和葉腋處大面積生長并致病,表明ida-d17突變體花器官的不脫落具有菌核病避病性狀。
綜上所述,該研究通過CRISPR編輯技術創制了一種新的種質資源,它既能減少機械化收獲過程中的損失,避菌核病,又有利于油菜觀光產業。
據悉,江蘇大學研究員譚小力為通訊作者,江蘇大學博士生耿瑞為論文第一作者。江蘇大學智能農機裝備理論與技術重點實驗室教授徐立章、挪威科學與文學學院院士Reidunn Aalen和挪威奧斯陸大學博士施春林參與了部分研究工作。該研究工作由江蘇省農業科技自主創新資金項目的資助完成。
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