貝萼皂苷元是一種齊墩果酸五環三萜類化合物,土貝母系葫蘆科植物土貝母的干燥塊莖,始載于清代《本草綱目拾遺》,具有散結、消腫、解毒之功效。皂苷類為土貝母的主要活性成分,含量較大。
有文獻研究表明貝萼皂苷元具有中等強度的糖原磷酸化酶抑制活性以及抗腫瘤等作用,可作為糖原磷酸化酶抑制劑。目前貝萼皂苷元的提取分離方法主要采用乙醇回流提取、大孔樹脂或硅膠柱層析、酸水解、堿調 PH,溶劑萃取、重結晶等步驟獲得貝萼皂苷元,這些方法生產周期長、樣品損失較大,所用有機溶劑毒性較大,不適用于大規模生產。
現在提供一種快速、高效分離土貝母中貝萼皂苷元的方法,即采用高速逆流色譜法從土貝母中分離制備貝萼皂苷元的方法。該分離方法分離效率高、分離時間短,能得到高純度的貝萼皂苷元。
第一步 取干燥土貝母鱗莖,粉碎,用石油醚脫脂后,以乙醇、甲醇、丙酮和水的混合溶劑超聲提取2-4次,提取混合溶劑與藥材質量比為8-20 : I,提取液濃縮至相對密度I. 11-1. 18,得總皂苷;
第二步 將總皂苷溶于水并以此加入酸液和乙酸乙酯后加熱進行酸水解,待水解完成后趁熱分取乙酸乙酯層并濃縮,得乙酸乙酯浸膏;
第三步 在分液漏斗中配制兩相溶劑系統,即正己烷-乙酸乙酯-甲醇-7K,體積比為(10-12) : (4-6) : (5-10) : (1-5),充分振搖后在室溫下靜置過夜,分取漏斗中的上相和下相,超聲脫氣,取步驟b中的乙酸乙酯浸膏用下相溶解,作為樣品溶液備用;將溶劑系統的上相注入高速逆流色譜儀分離管中,待上相充滿整個管路后,刺五加苷E調整主機轉速,泵入下相,待下相從柱出口流出,兩相在分離管中達到動態平衡后,由進樣閥注入樣品溶液,在210nm波長下檢測,根據色譜圖收集得到單體化合物貝萼皂苷元。
地膚子果實主要含三萜及其苷類、生物堿、黃酮類和脂肪油等成分,三萜皂苷包括齊墩果酸、木鱉子苷Ic (又名地膚子皂苷Ic),木鱉子苷II c等,其中地膚子皂苷Ic為其抗疹癢、抗炎和抗過敏作用的主要有效成分。