| 試劑、試劑盒 | 溶液與緩沖液 引物 |
|---|---|
| 儀器、耗材 | 試劑盒 MPC-E PCR儀 Gene PulserII 型系統 |
| 實驗步驟 |
實驗方案 A
1.通過加入下列物質來消化雙鏈 cDNA
2.在 37°C 下消化 lh。
3.65°C 孵育 20 min 熱失活限制性酶。
4.等體積 PCI 抽提后乙醇沉淀(實驗方案 A, 第 2 步)。
5.將沖洗風干的沉淀重新懸浮于 20 ul LoTE 中。
6.繼續進行第 4 步
實驗方案 B
1.從試管中移去第二股鏈反應混合物,并用 50ul 洗液洗滌 1 次,然后移去洗液。
2.用 50ul 的 1x 限制性緩沖液洗滌試管 1 次
3.移去緩沖液,然后加入:
4.在 37C 下消化 lh。
5.通過在 65℃ 下放置 20 min 熱失活限制性酶。
6.繼續進行第 5 步。
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