細胞表面存在負電荷,文獻稱為 anionicsites、anionicgroups 或 negativecharges,國內有人稱之為陰離子位點,因為它們在空間平面上呈點陣分布。此外,細胞的基膜上也存在陰離子位點,如血管內皮細胞基底膜,基膜的陰離子位點主要由硫酸肝素蛋白多糖構成,細胞膜與基底膜不同,其陰離子位點主要由唾液酸、某些蛋白的竣基等構成。關于其生物學作用,可能與細胞識別、通透性等有關系。病理情況下(如腎疾病),陰離子位點可減少或消失。由于其帶負電荷,因此可用陽離子探針進行標記,常用的有陽離子化鐵蛋白、聚乙烯亞胺等。對于陰離子位點的分布模式,電鏡觀察為線性排列(實際為點陣樣分布),顆粒直徑大多為 3~20 nm(視染色方法而異),顆粒間的距離大約為 60 nm。
| 實驗材料 | |
|---|---|
| 試劑、試劑盒 | |
| 實驗步驟 | 1. 0.1 mol/L磷酸緩沖液配制陽離子化鐵蛋白,濃度為0.2~0.5 mg/ml。 2. 組織樣品懸浮于陽離子化鐵蛋白液體中,室溫下反應30 min。 3. 0.1 mol/L磷酸緩沖液充分漂洗。 4. 3% 戊二醛固定,漂洗。 5. 1% 鋨酸后固定,包埋同常規。 6. 切片。必要時用硝酸鉍染色,以提高鐵蛋白反差。 |