陰離子位點顯示實驗——陽離子化鐵蛋白染色法
細胞表面存在負電荷，文獻稱為 anionicsites、anionicgroups 或 negativecharges，國內有人稱之為陰離子位點，因為它們在空間平面上呈點陣分布。此外，細胞的基膜上也存在陰離子位點，如血管內皮細胞基底膜，基膜的陰離子位點主要由硫酸肝素蛋白多糖構成，細胞膜與基底膜不同，其陰離子位點主要由唾液酸、某些蛋白的竣基等構成。關于其生物學作用，可能與細胞識別、通透性等有關系。病理情況下（如腎疾病），陰離子位點可減少或消失。由于其帶負電荷，因此可用陽離子探針進行標記，常用的有陽離子化鐵蛋白、聚乙烯亞胺等。對于陰離子位點的分布模式，電鏡觀察為線性排列（實際為點陣樣分布），顆粒直徑大多為 3～20 nm（視染色方法而異），顆粒間的距離大約為 60 nm。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒磷酸緩沖液陽離子化鐵蛋白液體戊二醛鋨酸實驗步驟1. 0.1 mol/L磷酸緩沖液配制陽離子化鐵蛋白，濃度為0.2～0.5 mg/ml。2......閱讀全文
陰離子位點顯示實驗——陽離子化鐵蛋白染色法
細胞表面存在負電荷，文獻稱為 anionicsites、anionicgroups 或 negativecharges，國內有人稱之為陰離子位點，因為它們在空間平面上呈點陣分布。此外，細胞的基膜上也存在陰離子位點，如血管內皮細胞基底膜，基膜的陰離子位點主要由硫酸肝素蛋白多糖構成，細胞膜與基底膜不同，
陰離子位點顯示實驗——聚乙烯亞胺染色法
實驗材料組織樣品試劑、試劑盒聚乙烯亞胺二甲胂酸鈉緩沖液戊二醛鋨酸實驗步驟1. 用 0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液配 1％ 聚乙烯亞胺，含 2％ 蔗糖。2. 組織切成小塊，浸泡在聚乙烯亞胺溶液中，室溫下反應 30 min。3. 0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液充分漂洗。4. 3％ 戊二醛固定
陰離子位點顯示實驗
實驗方法原理 實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 磷酸緩沖液陽離子化鐵蛋白液體戊二醛鋨酸實驗步驟 1. 0.1 mol/L磷酸緩沖液配制陽離子化鐵蛋白，濃度為0.2～0.5 mg/ml。2. 組織樣品懸浮于陽離子化鐵蛋白液體中，室溫下反應30 min。3. 0.1 mol/L磷酸緩沖液充分漂洗。4. 3
細胞骨架觀察實驗——鬼筆環肽顯示微絲蛋白染色法
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS三硝基甲苯甘油儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?蓋片培養細胞（70 %～80 %匯合），PBS洗3 次；2. ?2 %的甲醛/PBS 液（甲醛按37 %）固定3 分鐘；3. ?0.5 %的三硝基甲苯/PBS處理3 次，每次10 分鐘；4. ?PBS漂洗3 次；5. ?用羅
在含氧陰離子調控催化位點配位環境研究中獲進展
為實現零碳經濟，設計高效、低成本的陽極催化劑是達成電解水綠色制氫和生物質電氧化升級的關鍵。由于固有的氧化還原特性，鎳基非貴金屬電催化劑被認為是潛在的候選者，但關于鎳位點配位環境的活性調控機制尚缺乏深入研究。? 近日，中國科學院上海硅酸鹽研究所研究員王家成團隊前期研究發現磷酸根陰離子可有效調控鎳
有機陰離子和陽離子分析
隨著離子色譜技術的發展，新的分析設備和分離手段不斷出現，逐漸發展到分析生物樣品中的某些復雜的離子，目前較成熟的應用包括： 1、生物胺的檢測 Metrosep C1分離柱；2.5mM 硝酸/10%丙酮淋洗液； 3 µ；L進樣，可有效分析腐胺、組胺、尸胺等成分，已經成為刑事偵查系統和法
什么是弱陰離子，－弱陽離子
一般來說弱陰離子指的是吸引陽離子能力不強的陰離子，弱陽離子同理。比如在離子交樹脂領域，有弱陽離子交換樹脂，就是其陰離子是羧酸根、磷酸根、酚基等，這樣進行陽離子吸附對pH值要求比較高，洗脫也要容易，一般用作蛋白質吸附之用。
磷酸化位點分析實驗磷酸化位點的確定
實驗方法原理 磷酸化位點的確定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白質被純化，如果可能蛋白質要均一；磷蛋白被特異性的化學或酶反應切斷、產生肽混合物，其中含有一到兩個磷酸肽不同之處在干其分離磷酸肽的策略是為了確定氨基酸序列，定位肽段內磷酸化的殘基。上面所述的分離方法， 2D-PP 作圖、 HPLC 或 l
磷酸化位點分析實驗磷酸化位點的確定
磷酸肽的化學測序 磷酸肽的質譜分析 源后衰變 用酶和化學方法去磷酸化 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 磷酸化位點的確定也使用一
基因插入位點和模式實驗
實驗材料dCTP ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒乙醇 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?次氯酸鈉 ? ?
基因插入位點和模式實驗
實驗材料dCTP試劑、試劑盒乙醇次氯酸鈉β-葡萄糖醛酸酶基因活性測定液溴化乙錠儀器、耗材培養室MS 培養基實驗步驟一、轉基因插入位點的數目第一代（ T0）轉基因植株外源基因的插入位點數目，一般都是通過遺傳方法進行鑒定。雖然遺傳分析可以在任何世代進行，但是一般選擇轉基因植株自交，或與野生型測交后得到的
蛋白質結合位點的定義
分子中能與配體形成穩定相互作用的特定部位。蛋白質的結合位點通常是由多肽鏈上的一些相互分離的氨基酸殘基通過肽鏈折疊在空間上聚集到一起，形成特定的空間排布方式。
骨橋蛋白的結合位點的介紹
OPN分布廣泛并受多種因素的調控，能與許多物質結合。 (1)結合多種整合素受體:已發現αvβ1、αvβ3、αvβ5、α5β1、α8β1、α4β1和α9β1等7種整合素能與OPN結合，2個α4β1整合素結合部位位于OPN的N-末端凝血酶片酸的38 aa結構域上，α9β1能結合凝血酶斷裂的OPN
α微管蛋白：新的藥物結合位點
微管（Microtubule）是抗腫瘤藥物研發的重要靶點。微管是“細胞的骨架”主要成分之一，在許多細胞重要事件中起著關鍵作用。微管是由α-和β-微管蛋白(Tubulin)異二聚體可逆地組裝成而成的線性管裝結構（圖1）。 圖1：微管蛋白已知的六個結合位點及微管蛋白組裝形成微管示意圖 目前，微管
蛋白質凝膠染色法實驗
實驗步驟總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析，則首選不會引入共價蛋白
蛋白質凝膠染色法實驗
實驗步驟 總蛋白質的檢測 1. 總蛋白質色度法染色 簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀
細胞膜糖類電鏡顯示實驗——釕紅染色法
細胞膜糖類 電鏡 顯示技術 免疫組織化學實驗技術及應用 第十四章細胞膜糖類電鏡顯示實驗可以用于：觀察細胞膜上的糖蛋白和糖脂。其顯示技術較常用的是凝集素細胞化學技術，此外，還有釕紅染色法等。實驗方法原理釕紅染色法的原理是釕紅可以與羧基（酸性基）通過靜電結合，電鏡下呈電子密度高染色。實驗材料組織樣品試劑
基因插入位點和模式實驗（一）
實驗材料 dCTP試劑、試劑盒 乙醇次氯酸鈉β-葡萄糖醛酸酶基因活性測定液溴化乙錠儀器、耗材 培養室MS 培養基實驗步驟 一、轉基因插入位點的數目第一代（ T0）轉基因植株外源基因的插入位點數目，一般都是通過遺傳方法進行鑒定。雖然遺傳分析可以在任何世代進行，但是一般選擇轉基因植株自交，或與野
基因插入位點和模式實驗（二）
3. 跨世代 Southern 分析Southern 分析一般用于鑒定各個轉基因插入位點的排列形式（見 3 .2 節中“ Southern分析” ）。當然，通過對不同世代轉基因植株雜交檢測結果的比較，它也可以用于轉基因插入位點數的測定。例如，根 據 T。代和自交所得到凡代植株的 Sout
蛋白酶的分類及作用位點
蛋白酶分類作用位點已知抑制物氨基肽酶金屬蛋白酶帶有自由氨基的L-氨基酸氨基末端；不能分解由X-Pro、·D或·Q組成的肽鍵2，2，雙吡啶，1．1()-菲咯啉菠蘿蛋白酶巰基蛋白酶無特異性α2巨球蛋白，TPCK，TLCK，烷化羧肽酶A鋅金屬蛋白酶帶有自由氨基酸的L—氨基酸羧基端；不能分解R、P或羥脯氨酸
蛋白酶的分類及作用位點
?蛋白酶分類作用位點已知抑制物氨基肽酶金屬蛋白酶帶有自由氨基的L-氨基酸氨基末端；不能分解由X-Pro、·D或·Q組成的肽鍵2，2，雙吡啶，1．1()-菲咯啉菠蘿蛋白酶巰基蛋白酶無特異性α2巨球蛋白，TPCK，TLCK，烷化羧肽酶A鋅金屬蛋白酶帶有自由氨基酸的L—氨基酸羧基端；不能分解R、P或羥脯氨
蛋白質凝膠染色法實驗（二）
關鍵步驟通常如下所述。(1) 固定凝膠，以固定蛋白質條帶，并移除凝膠中的干擾物質, 如 S D S 、緩沖液和鹽，這些物質會結合銀并造成背景染色。(2) 用能夠結合蛋白質并提高銀結合能力的物質, 或是能夠干擾剩余未結合的銀造成的背景染色的物質來孵育凝膠。總之，這些各種各樣的方法都和敏化作用有關。(3
蛋白質凝膠染色法實驗（三）
尼羅紅蛋白質凝膠染色劑尼羅紅 (Nile red) 是一種吩囉嗪酮類染料, 當其從水轉入到疏水環境，如 S D S 微粒或蛋白質-S D S 復合物中時，便顯示出強烈的熒光增強作用。尼 羅 紅 不 會 與 S D S 單體發生顯著作用》利用這一特點開發出了一種適合 S D S 凝膠的迅速
蛋白質凝膠染色法實驗3
糖蛋白的檢測1. 通用糖蛋白檢測糖 基 化 是 真 核 細 胞 中 最 常 見 的 蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 。寡 糖 通 常 連 接 于 天 冬 酰 胺 側 鏈(iV-連 接 糖 基 化 ) 或 絲 氨 酸 和 蘇 氨 酸 羥 基 側 鏈 (〇 連 接 糖 基 化）。凝 膠 中 蛋 白 質
蛋白質凝膠染色法實驗（四）
(3) 用 10% 〇 //V ) 甲醇、7 % ( V /V ) 乙酸進行簡單的凝膠脫色。利用基于微波爐的方案可以加快染色過程的進行。 SYPRO R uby 蛋白質凝膠染料具有相對較高的消光系數和量子產率，因此它十分亮眼, 化學穩定性和光穩定性都很高。光譜的激發可借助紫外線或是藍光光源;
蛋白質凝膠染色法實驗（五）
磷 蛋 白 的 檢 測作為基本的細胞信號機制, 指定氨基酸殘基的可逆磷酸化作用的重要性已無需爭辯。當前磷蛋白染料具有受ZL保護的構型，即磷酸基結合部分共價連接于熒光團。檢測的方式是選擇性結合磷酸化的氨基酸，但是沒有熒光增強作用。從某種程度上講, 許多可溶的熒光復合物都可作為總蛋白質染色劑
蛋白質凝膠染色法實驗（一）
總蛋白質的檢測1. 總蛋白質色度法染色簡便的目視檢測、相對簡單的使用及廣大熟悉方法的用戶基礎群，使得考馬斯亮藍(C B B )—直是最普遍使用的總蛋白質凝膠染色劑。如需要比考馬斯亮藍染色更高的檢測敏感度，那么銀染法是可選擇的色度方法。如果需要對切下的蛋白質進行質譜分析，則首選不會引入共價蛋白
蛋白質凝膠染色法實驗2
2. 總蛋白質熒光法染色熒光染色法結合了檢測靈敏度 (可與銀染法媲美) 與染色流程簡便性 (與考馬斯亮藍染 色 或 Z n?2+?反染法相同），且其線性定量范圍較比色法大 10?100 倍 。檢測依賴于儀器,需要一個單色激發光源、能將波長較長的發射光從波長較短 (也更亮）的激發光中分離出來的選擇性光
為什么蛋白質保守絲氨酸位點是其磷酸化位點
磷酸化位點一般有絲氨酸，蘇氨酸，酪氨酸。其中，絲氨酸和蘇氨酸是最常見的磷酸化位點，因為其結構末端含有羥基，羥基很活潑，可以與磷酸基團結合。磷酸化的過程就是傳遞磷酸基團。所以說，蛋白質中如果某個絲氨酸很保守的話，很大程度上就是磷酸化位點。
為什么蛋白質保守絲氨酸位點是其磷酸化位點
磷酸化位點一般有絲氨酸，蘇氨酸，酪氨酸。其中，絲氨酸和蘇氨酸是最常見的磷酸化位點，因為其結構末端含有羥基，羥基很活潑，可以與磷酸基團結合。磷酸化的過程就是傳遞磷酸基團。所以說，蛋白質中如果某個絲氨酸很保守的話，很大程度上就是磷酸化位點。