樣品的預處理方法決定于樣品本身的性質,牛乳預處理非常簡單,而植物和動物組織的處理方法較為復雜。
1、 粉碎:
粉碎的方法很多,不論是切碎、碾磨、絞碎或者采用均質等處理方法,應當使樣品中脂類物理、化學以及酶的降解都要減小到最小程度。
2、 加海砂
有的樣品易結塊,用乙醚提取較困難,為了使樣品保持散粒狀可以加一些海砂,一般加樣品的4-6倍量(目的使樣品疏松,這樣擴大了與有機溶劑的接觸面積,有利于萃取)。
3、 加入無水硫酸鈉
因為乙醚可被2%水飽和,使乙醚不能滲入到組織內部抽提脂肪的能力降低,所以有些樣品含水量高時可加入無水硫酸鈉,用量以樣品呈散粒狀為止。
4、 干燥:
干燥的目的:提高脂肪的提取效率。
干燥時要注意溫度:溫度過高(1)脂肪氧化(2)脂肪與糖、蛋白質結合變成復合脂;溫度過低:脂肪易降解
5、 酸處理:
溫度過高時脂與糖、蛋白質等接觸,變成復合脂,產生復合脂后,不能用外極性溶劑直接抽提,所以要用酸處理,主要是把結合脂肪水解出去,下面有個實驗大家看一下:
面包:采用直接萃取 1.20% 脂肪,酸處理后萃取 1.73%脂肪
干全蛋:采用直接萃取 36.74% 脂肪,酸處理后萃取 42.39%脂肪
從這個實驗可以看出,變成復合脂類,利用直接萃取得到的結果偏低,經過酸水解將使蛋白質,碳水化合物與脂肪分開,這樣是脂肪游離出來后,再提取得到的數據準確。
6、 對有些樣品還有大量的碳水化合物,測定脂肪時應先用水洗掉水溶性碳水化合物再進行干燥、提取。
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