高通量篩選有哪些種類？

該技術使用較低劑量，在短時間內完成對大量化合物的生物活性篩選，由于具有微量化，快速，高效等特點，被國內外多數醫藥研究機構廣泛采用。國外許多大型農藥公司亦將這種技術用于新農藥的篩選。高通量篩選和組合化學（combinatorialchemistry）、自動化操作系統等技術的有機結合，可以縮短新農藥創制的研發周期，降低研發成本，提高開發的成功率。基本篩選法的種類如下：

（1）活體篩選。只對個體較小、對藥劑敏感而且容易培養和操作的供試昆蟲，如鱗翅目低齡幼蟲、孑孓、水蚤較為適用。一般步驟是將一定量的待測藥液和昆蟲人工飼料或營養液分別加入微量滴定板的孔中，混勻。然后將單頭供試昆蟲或者卵置于每一孔內，用透明蓋封好，放置在溫度、濕度、光照等適宜的控制條件下培養一定時間，后檢查結果，觀察記錄供試昆蟲的生命指標。如生存或死亡、生長取食情況等，推測判斷供試藥劑的生物活性。

（2）離體篩選：

①受體結合試驗：該法適用篩選對供試昆蟲神經受體有抑制活性的化合物。一般步驟是首先通過一定方法分離提取一定量的昆蟲神經受體（如乙酰膽堿受體），然后將放射性標記的相對應的神經毒素，如[3H]環蛇毒素（一種煙酸乙酰膽堿受體抑制劑）和[3H]奎寧環基乙二酮（蕈毒堿乙酰膽堿受體抑制劑）等，和神經受體及待測的化合物分別加入微量滴定板孔中，混合均勻，于控制條件下培養一定時間后，將板上混合物轉移到玻璃—纖維素膜上，并用細胞收集器洗滌，通過放射性同位素檢測儀記數纖維素膜上的放射性，如果放射性減少或消失，說明化合物與這些神經受體抑制劑有較強的競爭作用，判斷出有活性。

②靶標酶活性測定：用于篩選對昆蟲靶標酶有活性的化合物首先分離提取昆蟲體內的重要靶標酶（如乙酰膽堿酯酶，Na＋－K＋－ATP酶等）在微量滴定板上分別加入一定量酶液、待測化合物與酶反應的底物及其他所需成分，混合均勻，在適宜條件下反應一定時間，通過分光光度計測定吸光度值，求出酶活性大小，在化合物作用下，如果酶活性降低，說明供試化合物與酶發生結合，有一定的活性。