摘 要:目的確定高速逆流色譜法分離純化延胡索乙素和原阿片堿的條件。方法采用TBE300A 型高速逆流色譜儀,以分配系數和分相時間為依據設計一組溶劑體系,初步確定適宜的溶劑體系;根據高速逆流色譜出峰數目及分離度確定較佳的溶劑體系和工作條件,并測定所收集峰的各組分的純度。結果石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(22∶25∶23∶17) 為溶劑體系,流速為2. 0 mL/ min ,儀器轉速800 r/ min ,溫度25 ℃,從延胡索總堿中可一步純化得到原阿片堿和延胡索乙素,得率分別為16. 9 %和14. 7 % ,純度分別為99. 3 %和98. 8 %。結論該溶劑體系分離結果可靠,可作為延胡索乙素、原阿片堿化學對照品的制備分離方法。
中藥延胡索又稱元胡、玄胡、玄胡索,其基原為罌粟科植物延胡索( Corydalis yanhusuo W. T. Wang)的干燥塊莖。延胡索性溫,味苦辛,歸于心、肝、脾經,具有活血、利氣、止痛等功效,臨床主要用于治療各種跌打傷痛、癰疽腫痛、痛經及心血管疾病[1-2 ] 。目前,元胡的研究主要集中在化學成分、藥理作用、人工栽培、制劑開發等方面,已確定了近20 種生物堿,其中延胡索乙素和原阿片堿為其主要活性成分,其鎮痛解痙、活血利氣以及對心血管系統的藥理作用正在得到闡明[325 ] ;最近有人從延胡索中提取純化了延胡索纖溶酶[6 ] 。延胡索生物堿的分離純化仍采用大孔樹脂分離,樹脂吸附現象嚴重、耗時較長,難以工業化批量生產,而有關采用新技術分離純化制備延胡索生物堿的報道較少。
高速逆流色譜(HSCCC) 是近年來發展起來的一種液-液分配色譜新技術,其特點是被分離物質在兩相液體中進行分配,不需要任何固相載體,克服了固相載體對樣品吸附、損失、污染、峰形拖尾等缺點,具有混合物分離回收率高、快速、預處理簡單、分離純化與制備同步完成的特點,因而越來越多地應用于天然產物的分離。我國是最早開展HSCCC 技術研究和應用的國家之一,該技術已在厚樸、大黃、丹參等中藥有效成分的分離純化中得到應用[7-9 ] 。本文采用HSCCC 技術分離純化、制備延胡索中原阿片堿和延胡索乙素,目的是為制備高純度原阿片堿和延胡索乙素對照品探索一種簡捷實用的新途徑。