AFDIL：DNA測序技術鑒定

　　1972年，美國空軍中尉Michael Joseph Blassie在越南戰爭中犧牲。因無法確認身份，Blassie的遺體被埋葬在無名烈士墓中，供人們瞻仰。直至1998年，經過線粒體DNA檢測， Blassie中尉的遺體才得以確認，并運回家鄉。從此，DNA測序開始在鑒定美國士兵殘骸中發揮作用。

　　如今，美國武裝部隊DNA鑒定實驗室(AFDIL)仍在從事這一方面的工作。每年，實驗室對大約1200個骨骼樣本的mtDNA進行測序，這些樣本被認為是在戰爭中死亡的士兵殘骸。

　　AFDIL的mtDNA部門的助理負責人Suni Edson表示：“我們有一人在阿富汗失蹤，有1200人在越南失蹤，8200人在韓國失蹤，還有78,000人在二戰中失蹤。這么多人仍下落不明。”

　　為此，美軍戰俘與戰爭失蹤人員聯合調查司令部(Joint POW/MIA Accounting Command)一直在努力尋找因戰爭而長眠異國他鄉的士兵遺體。

　　據AFDIL法醫服務部門的副主任Timothy McMahon介紹，原先的FBI線粒體實驗室每年只能處理100份標本。“我們幾乎是美國乃至全世界唯一能達到每年處理1200份標本的實驗室。”

　　為了實現這一點，AFDIL的研究人員優化了提取操作。研究小組修改了提取緩沖液，從2007年開始采用所謂的去礦化緩沖液(demineralization buffer)來改善提取效率。據Edson介紹，在那之前，成功率大約為88%，而如今，成功率達到96%。

　　去礦化緩沖液分解羥基磷灰石，將骨鈣拉出，并開放骨細胞。最終，骨基質被完全溶解，讓DNA提取成為可能。這樣，修改后的方法將所需的骨骼樣本量減少了10倍，從2 g減少到0.2 g。

　　“盡管采用以往的提取方法，我們能達到88%的成功率，但往往是較長的骨骼。如今，什么樣的骨骼都行，”McMahon談道。“在越南，大部分失蹤士兵都經過墜機，高度片段化。采用這種方法，我們能檢測越來越多的樣本。”

　　但如今，最大的挑戰之一是PCR抑制劑。有時，研究小組發現樣本暴露在PCR抑制劑中，如土壤中的腐殖酸。有時，他們又會面臨抑制PCR的脂溶性藥物，如四環素，這種抗生素在朝鮮戰爭中很常見。現在，實驗室又在開發一種提取方法，能去除這些抑制劑以及樣本中的其他污染。

　　此外，實驗室也在積極采用新一代測序技術來解決高度降解的棘手個案。他們在尋找讓測序自動化的方法。據 McMahon介紹，僅去年一年，該部門就開展了110,000個測序反應，還是手動的。“很多人在做這個。如果我們能將他們解放出來，開展數據分析，那么我們能夠更快地將結果反饋給JPAC。”