DNA打印機升級迭代PCR檢測相關標準再更新

PCR檢測——ISO標準發布

近日，由上海海關主導制定的2項ISO標準正式獲得國際標準化組織(ISO)通過并發布。這兩項ISO標準是：《ISO/TS20224-10：2024分子生物標記分析——食品和飼料中動物源性成分實時熒光PCR檢測——第10部分鴨DNA檢測方法》和《ISO/TS20224-11：2024分子生物標記分析——食品和飼料中動物源性成分實時熒光PCR檢測——第11部分鴿DNA檢測方法》。

　　動物源性成分精準鑒別是檢測食品和飼料中肉類摻假、監控畜禽肉制品真實性的關鍵手段。2014年起，上海海關動植物與食品檢驗檢疫技術中心著手制定肉類真實性鑒別的ISO標準。2020年以來，該中心首席專家潘良文研究員帶領團隊主導完成了食品和飼料中牛、綿羊、山羊、豬、雞、馬、驢、火雞和鵝等9個動物源性成分實時熒光PCR檢測方法，由ISO組織正式對外發布，并在世界各國得到廣泛應用，為保障國際貿易的正常秩序發揮了重要作用。

　　此次新獲通過發布的兩項ISO國際標準，推動動物源性成分檢測標準再次擴容，將對鑒別鴨肉和鴿肉真實性及打擊肉類摻假發揮重要作用。該系列國際標準中建立的食品和飼料中動物源性成分實時熒光PCR檢測方法，具有特異性強、靈敏度高等特點，結果不易受到食品加工方式的影響，還可以檢測經過熱處理的肉制品，檢測穩定性、準確度更高。截至目前，上海海關主持制訂修訂的ISO國際標準總數達到14項。

實時熒光PCR檢測方法

實時熒光PCR（Quantitative Real-time PCR）是一種先進的分子生物學技術，其簡寫形式可以是qRT-PCR或RT-qPCR。該技術結合了傳統的聚合酶鏈反應（PCR）和熒光標記檢測方法，使得在擴增過程中能夠實時、定量地監測目標DNA或RNA序列的數量。實時熒光PCR因其高靈敏度、高精確度和廣泛適用性，在病毒病原體檢測、基因表達差異分析、遺傳病診斷、腫瘤標志物檢測、食品安全檢測等領域具有廣泛應用價值。

PCR發展史

1971年Khorana等最早提出PCR理論，1976年極端嗜熱菌中一種聚合酶的分離奠定了PCR技術的發展，1988年Saiki等從一種水生嗜熱桿菌中提取到一種耐熱DNA聚合酶，并簡化了操作程序，最終實現了DNA擴增的目的，迅速推動了PCR的應用和普及。

我國PCR產業發展

1994-1998年：PCR產業起步，手工操作，無規范導致假陽性多。1998年被暫停臨床應用，復星實業（復星醫藥）上市主營PCR產品。

2002-2010年：衛生部醫政司發布〔2002〕10號《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》，PCR技術開始解禁，實驗室規范化，此時PCR檢測技術也由最開始的酚氯提取+電泳檢測，逐漸轉變為煮沸裂解+ 熒光探針技術，熒光探針或染料的使用，將PCR檢測方式進行了根本性的革命，達安基因、匹基生物開始崛起。

2010-2020年：PCR企業快速發展，熒光PCR廣泛應用。同時，國外優秀的分子診斷企業也陸續進入中國，競爭加劇，熱裂解法因新冠疫情下操作局限性被自動化磁珠提取取代，但仍存污染風險。同時，達安、之江、明德、碩世、圣湘、伯杰等一批優秀的企業脫穎而出，數字PCR技術開始興起。

如今，隨著核酸檢測需求的提升，產業技術不斷進步， 多重PCR檢測發展，熒光PCR技術通過增加熒光通道（從雙通道發展至6通道及以上）及引入新技術如HRM，提高了檢測效率和通量，減少了與雜交法的差距；以優思達等企業為代表的分子POCT產品因操作簡便、應用場景廣泛而備受關注，在新冠疫情期間得到廣泛應用；高通量全自動系統更新升級，面對大規模樣本處理需求，國內外涌現了眾多高通量分子診斷流水線，如羅氏、BD、Cepheid、豪洛捷以及國內的安圖生物、仁度等公司的產品，顯著提升了大批量樣本檢測能力，在當前階段國產設備有望崛起，PCR技術成為產業發展的一大亮點。

PCR技術相關標準即將實施

去年12月1日，我國正式實施了國家標準GB/T 42753-2023《實時熒光定量PCR儀性能評價通則》。這一新標準由國家市場監督管理總局和國家標準化管理委員會發布，并于2023年5月23日先行公布，標志著我國在實時熒光定量PCR技術領域的規范化、標準化進程邁出了重要一步。

該標準詳細規定了實時熒光定量PCR儀在設計、生產和使用過程中的各項性能要求，確保了儀器的準確度、精密度、穩定性以及重復性等關鍵指標滿足高質量檢測需求。具體包括術語和定義、技術參數要求、功能要求、性能評價方法、評價報告格式、應用領域覆蓋等內容。

今年，我國在PCR相關領域發布了多項新的標準，這些標準旨在進一步規范PCR技術在不同應用場景中的操作流程、儀器性能評價及檢測方法，確保PCR技術在醫學診斷、食品安全等領域的準確性和可靠性。

以上一系列新標準的發布與實施，我國PCR技術應用領域實現了更科學嚴謹的規范化管理，對于提升國內核酸檢測的整體水平、保障公共衛生安全和促進科研進步具有重要意義。