DNA片段探針的應用實驗

DNA

雜交液 洗膜液

注射器 超聲儀 水浴鍋

1.  用5~20 ml 雜交液Ⅰ依次浸泡10~20張硝酸纖維素濾膜。濾膜裝入雜交袋中，加入足夠的雜交液，密封后42℃預雜交1 h。

2.  往帶螺蓋的試管中，加入放射性探針和2 mg 超聲波處理的鯡魚精DNA，煮沸10 min。

3.  探針混合液移至冰浴，加入2 ml 雜交液Ⅰ 。

4.  用帶18-G針頭的注射器將探針混合液加入到雜交袋中濾膜上，重新密封后于42℃溫育過夜。

5.  用約500 ml 低嚴緊性洗膜液Ⅰ于室溫洗滌濾膜3次，每次10~15 min。

6.  再用約500 ml 高嚴緊性雜交液Ⅰ（預熱到洗滌溫度）洗滌濾膜2次，每次15~20 min。

7.  用塑料保鮮膜將濕潤的濾膜包裹好，或讓它貼在一塑料板上干燥后進行放射自顯影。