DNA聚合酶的特性、用途和缺點

特性

良好的熱穩定性;

70℃ 2h，殘留90%活性;

93℃ 2h，殘留60%活性;

94℃ 2h，殘留40%活性。

5'→3'聚合酶活性，對dATP有優先聚合活性;

5'→3'外切酶活性;

無3'→5'外切酶活性。

用途

聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。

Taq酶擴增的PCR產物，3'末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基，而這個堿基幾乎總是A，因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性，故可用T載體克隆。

缺點

無3'→5'閱讀校正功能，在PCR擴增過程可引起錯配，30次循環錯配率約0.25%。

措施:選擇高保真Taq酶，如Pfu。

原因:Pfu具有3'→5'外切酶活性。

注意:Pfu擴增產物為平末端。