DNA聚合酶的特性、用途和缺點

DNA聚合酶的特性、用途和缺點

特性良好的熱穩定性;70℃ 2h，殘留90%活性;93℃ 2h，殘留60%活性;94℃ 2h，殘留40%活性。5'→3'聚合酶活性，對dATP有優先聚合活性;5'→3'外切酶活性;無3'→5'外切酶活性。用途聚合酶鏈反應(polymerase chai

DNA聚合酶的用途和缺陷

用途聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶擴增的PCR產物，3’末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基，而這個堿基幾乎總是A，因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性，故可用T載體克隆。缺點無3’→5’閱讀校正功能，在PCR擴增過程可引起錯配，30次循環

DNA聚合酶的缺點

缺點無3'→5'閱讀校正功能，在PCR擴增過程可引起錯配，30次循環錯配率約0.25%。措施:選擇高保真Taq酶，如Pfu。原因:Pfu具有3'→5'外切酶活性。注意:Pfu擴增產物為平末端。

聚合酶鏈反應的用途和特性

PCR反應擴增出了高的拷貝數，下一步檢測就成了關鍵。熒光素（溴化乙錠，EB）染色凝膠電泳是最常用的檢測手段。電泳法檢測特異性是不太高的，因此引物兩聚體等非特異性的雜交體很容易引起誤判。但因為其簡捷易行，成為了主流檢測方法。近年來以熒光探針為代表的檢測方法，有逐漸取代電泳法的趨勢。

DNA聚合酶的特性

良好的熱穩定性;70℃ 2h，殘留90%活性;93℃ 2h，殘留60%活性;94℃ 2h，殘留40%活性。5'→3'聚合酶活性，對dATP有優先聚合活性;5'→3'外切酶活性;無3'→5'外切酶活性。

DNA聚合酶的特性

DNA聚合酶有多種，E.coli就有三種。通常DNA聚合酶具有以下共同特點：?①需要DNA模板，因此這類酶又稱為依賴DNA的DNA聚合酶；②需要RNA或DNA作為引物(primer)，即DNA聚合酶不能從頭催化；?③催化dNTP加到引物的3'-OH末端，其速率為1000nt/min，因而DN

DNA聚合酶的特性

原核生物大腸桿菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中發現，到目前為止已確定有5種類型，分別為DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V，都與DNA鏈的延長有關。?其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比較明確。DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe

DNA聚合酶的用途

聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶擴增的PCR產物，3'末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基，而這個堿基幾乎總是A，因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性，故可用T載體克隆。

DNA聚合酶的基本信息和特性

也稱耐高溫DNA聚合酶。1988年，Saiki從嗜熱水生真菌Thermus aquatics YT-1株中分離得到，該菌株于1969年從美國黃石國家森林公園火山溫泉中分離出。特性良好的熱穩定性；70℃ 2h，殘留90%活性；93℃ 2h，殘留60%活性；94℃ 2h，殘留40%活性。5’→3’聚合酶

DNA聚合酶的基本特性

DNA聚合酶，又稱DNA依賴的DNA聚合酶（DNA—dependent DNA polymerase，DNA pol），它是以親代DNA為模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶最早是美國科學家Arthur Komberg于1957年在大腸桿菌中發現的，被稱為DNA聚合酶Ⅰ（DNA

T4DNA聚合酶的用途

(1)利用取代合成反應制備探針(2)標記具有平末端的或具有3’－隱蔽末端的DNA片段利用較強的3 ′→ 5 ′外切酶活性和 5′→3′聚合活性(3)用于DNA序列分析

治療酶的特性和用途

酶是由活細胞釋放的生化分子，它們充當生物催化劑，并且在其作用方式上具有極高的選擇性。?治療酶具有廣泛的特定用途，例如溶瘤藥、抗凝藥、溶栓劑、用于代謝缺陷的替代品、消化助劑、代謝性貯積障礙等，是一種多功能酶。

大腸桿菌DNA聚合酶I－的三種用途

1.利用缺口轉移法制備高比活度的DNA探針利用其5′--3′的外切酶活性及其聚合酶活性。2.用于DNA連接前的大缺口填充利用5′--3′的聚合酶活性。3.用于DNA的序列分析利用5′--3′的聚合酶活性。

DNA聚合酶及DNA連接酶的功能和區別

DNA聚合酶，以已有的核酸序列作為模板，將4種脫氧核苷酸（A、T、G、C）按照模板的堿基排列順序，以“堿基互補原則”依次連接，聚合成為一條新的DNA鏈。 DNA連接酶，是將DNA片段上的缺刻連接起來的酶。? ? 一、DNA聚合酶? ? （一）DNA聚合酶I?? ? DNA聚合酶I（DNA pol

DNA聚合酶的基本信息和共性

DNA聚合酶，又稱DNA依賴的DNA聚合酶（DNA—dependent DNA polymerase，DNA pol），它是以親代DNA為模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶最早是美國科學家Arthur Komberg于1957年在大腸桿菌中發現的，被稱為DNA聚合酶Ⅰ（DNA

聚合酶的功能特性

聚合作用在引物RNA'-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有催化作用。dNTP進入結合位點后，可能使酶的構象發生變化，促進3'-OH與5

聚合酶的基本特性

聚合作用在引物RNA'-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有催化作用。dNTP進入結合位點后，可能使酶的構象發生變化，促進3'-OH與5

釩酸釔的特性和用途

PCR儀的技術特性和用途

PCR儀技術特性：　　1、加熱模式：立體膜加熱技術　　2、制冷技術：新一代“peltier”效應“半導體熱泵制冷”　　3、控溫及管理：16位微機智能式　　4、DTC型PCR儀主要由外殼、變溫反應腔、散熱系統、加熱系統、制冷系統、電子控制系統、供電系統、人機界面等各部分組成。　　5、單機操作，也可與電

聚合物的特性和用途

高分子化合物的分子比低分子有機化合物的分子大得多。一般有機化合物的相對分子質量不超過1000，而高分子化合物的相對分子質量可高達104～106。由于高分子化合物的相對分子質量很大，所以在物理、化學和力學性能上與低分子化合物有很大差異。高分子化合物的相對分子質量雖然很大，但組成并不復雜，它們的分子往往

PCR儀的技術特性和用途

??　　PCR儀技術特性：　　1、加熱模式：立體膜加熱技術　　2、制冷技術：新一代“peltier”效應“半導體熱泵制冷”　　3、控溫及管理：16位微機智能式　　4、DTC型PCR儀主要由外殼、變溫反應腔、散熱系統、加熱系統、制冷系統、電子控制系統、供電系統、人機界面等各部分組成。　　5、單機操作，

鋁試劑的化學特性和用途

概述玫紅三羧酸銨又稱鋁試劑，主要用于有機分析領域。理化性質鋁試劑又稱玫紅三羧酸三銨、3-[雙(3-羧基-4-羥基苯基)亞甲基]-6-氧-1，4-環己二烯-1-羧酸三銨鹽、Lysofon、C.I.43810(玫紅三羧酸)。橙色至棕色玻璃狀粉末。相對分子質量473.43。熔點223～225℃(分解)Ch

氮化鈦的理化特性和用途

理化性質晶體結構：立方體分子式:TiNCasNo:25583-20-4分子量:61.874密度：5.22g/cm3熔點：2930℃（5310°F;3200K）氣味：無臭溶解性：微溶于熱的王水,濃硫酸和氟化氫，不溶于水維氏硬度：2400彈性模量：251GPa熱導率：19.2W/(m·°C)熱膨脹系數：

碳酸乙烯酯的特性和用途

碳酸乙烯酯（EC）是一種性能優良的有機溶劑，可溶解多種聚合物；另可作為有機中間體，可替代環氧乙烷用于二氧基化反應，并是酯交換法生產碳酸二甲酯的主要原料；還可用作合成呋喃唑酮的原料、水玻璃系漿料、纖維整理劑等；此外，還應用于鋰電池電解液中。碳酸乙烯酯還可用作生產潤滑油和潤滑脂的活性中間體。

DNA聚合酶的功能

　　1）通過核苷酸聚合反應，使DNA鏈沿5’→3’方向延長（DNA聚合酶活性）[1]　　2）催化由3’端水解DNA鏈（3’→ 5’核酸外切酶活性，用于切除錯配的堿基）[1]　　3）催化由5’端水解DNA鏈（5’→ 3’核酸外切酶活性，用于切除引物）[1]　　4）催化由3’端使DNA鏈發生焦磷酸解　　

DNA聚合酶的應用

E.coli的DNA pol Ⅰ涉及DNA損傷修復，在半保留復制中起輔助的作用。DNA polⅡ在修復損傷中也具有重要的作用。DNA polⅢ是一種多亞基的蛋白質，在DNA新鏈的從頭合成中起復制酶的作用。復制的忠實性問題會影響到翻譯的精確性，這種忠實性主要依賴于堿基的特異性配對。據估計每個堿基對將有

DNA聚合酶的概述

　　DNA聚合酶（DNA polymerase）是 細胞復制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA為復制模板，從將DNA由5'端點開始復制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具備模板、 引物、dNTP 等的情況下）及其相輔的活性。　　真核細胞有5種DNA

DNA聚合酶的功能

　　[1] 聚合作用：在引物RNA'-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸　　加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。 酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有 催化作用。dNTP進入結合位點后，可能使酶的 構象發生變化，促進3&

DNA聚合酶的定義

　　真核細胞有5種DNA聚合酶，分別為DNA聚合酶α（定位于胞核，參與復制引發，不具有5'－3'外切酶活性及3'－5'外切酶活性，有5'－3'聚合酶活性），β（定位于核內，參與高保真度復制，不具有5'－3'外切酶活性，其中疑似存在5&#

DNA聚合酶的發現

　　在50年代的中期，A. Kornberg和他的同事們就想到DNA的復制必然是一種酶的催化作用，于是決心分離出這種酶并研究其結構和作用機制。為了達到這個目的，他們分離的蛋白，然后加到體外合成系統中即 同位素標記的dNTP、Mg2+及模板DNA，經過大量的工作，于1956年終于發現了DNA聚合酶Ⅰ（