ELISA法是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上,因而,具有特異性。
由于測定中需要酶標記抗原或抗體,酶分子與抗原或抗體分子的結合物可以催化底物分子發生反應,產生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。
常用的ELISA分析
1) 測定抗原 A 將抗體吸附于固相表面,這個過程叫包被。 B 加抗原,形成抗原-抗體復合物。 C 加酶標抗體。 D 加酶反應的底物。反應終止時,反應液的顏色深淺與抗原的含量成正比。 主要步驟: 1.包被抗體的酶標板(一抗)。 2.加待測抗原。抗原抗體反應,洗滌。 3.加酶標抗體(二抗)。反應,洗滌。 4.加顯色底物(三抗),反應,洗滌。 5.加終止液。 6.酶標儀上讀取吸光度值。 7.根據標準曲線對待測抗原進行定量。 (2) 測定抗體 A 抗原包被在酶標板。 B 加抗體,形成抗原抗體復合物。 C 加酶標抗體(一抗) D 加酶底物(二抗),顯色,比色。