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  • 發布時間:2019-10-31 17:24 原文鏈接: ELISA法

    ELISA法是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上,因而,具有特異性。


    由于測定中需要酶標記抗原或抗體,酶分子與抗原或抗體分子的結合物可以催化底物分子發生反應,產生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。

    常用的ELISA分析


    1)   測定抗原

    A  將抗體吸附于固相表面,這個過程叫包被。

    B 加抗原,形成抗原-抗體復合物。

    C  加酶標抗體。

    D  加酶反應的底物。反應終止時,反應液的顏色深淺與抗原的含量成正比。

     

    主要步驟:

     

    1.包被抗體的酶標板(一抗)。

    2.加待測抗原。抗原抗體反應,洗滌。

    3.加酶標抗體(二抗)。反應,洗滌。

    4.加顯色底物(三抗),反應,洗滌。

    5.加終止液。

    6.酶標儀上讀取吸光度值。

    7.根據標準曲線對待測抗原進行定量。

    (2)   測定抗體

    A  抗原包被在酶標板。

    B  加抗體,形成抗原抗體復合物。

    C  加酶標抗體(一抗)

    D  加酶底物(二抗),顯色,比色。


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