GPC有效凈化毒豇豆樣品基質

近期，海南“毒豇豆”事件再一次引起了人們對食品安全的高度關注。此次事件，問題在于豇豆中殘留的高毒農藥水胺硫磷。本文使用凝膠凈化(GPC)方法進行樣品處理，除去大部分的干擾物質，無需再通過SPE小柱凈化即可滿足后續分析檢測的要求。

本文由萊伯泰科有限公司提供。

圖1.  水胺硫磷標樣HPLC色譜圖

水胺硫磷(isocarbophos)為一種速效廣譜殺蟲殺螨劑，又稱作羧胺磷，在農業害蟲防治方面擔當著重要的角色。但各種資料中均明文規定不可以用于蔬菜。春節前，武漢查出3596.9公斤海南豇豆含禁用農藥水胺硫磷，隨即全部銷毀。為防有毒豇豆再次流入， 5月6日前，海南豇豆將不能出現在武漢市場。而繼武漢之后，合肥、杭州、廣州均發現了問題豇豆。農業部已下發緊急通知，要求加強農產品生產環節的監管。

針對此次事件，萊伯泰科有限公司科研中心對高毒農藥殘留分析提出了解決方案。實驗前處理主要參照NY/T761-2004 (蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留檢測方法)及GB/T 5009.218-2008(水果和蔬菜中多種農藥殘留量的測定)方法，使用凝膠凈化(GPC)方法除去大部分的干擾物質，將處理好的樣品用HPLC進行檢測。經過GPC凈化后無需再通過SPE小柱凈化即可滿足后續分析檢測要求。通過高中低三個濃度加標回收率實驗測定，結果表明完全滿足樣品前處理實驗要求。

圖2.  豇豆樣品（加標）HPLC色譜圖

實驗儀器

LabTech GPC Cleanup 800

LabTech HPLC 600

LabTech 旋轉蒸發儀 EV311

實驗條件

GPC凈化條件

LabTech 高效不銹鋼凈化柱，20×300mm;填料，Bio-Beads S-X3 200-400目;流動相，乙酸乙酯∶環己烷=1∶1;流速：5.0 ml/min;檢測波長：225nm;進樣量：2 ml。

HPLC檢測條件

流動相，ψ(CH3OH∶H2O)=60∶40;流速：1.0 ml/ min;檢測波長：225 nm;進樣體積：5μl。

結果與討論

參照NY/T761-2004方法做樣品前處理，譜圖如圖1、圖2所示。

由上圖可以看出，由于豇豆樣品基體較復雜，采用NY/T761-2004做樣品前處理，無法較好地去除基體干擾，目標物與其干擾物質無法完全分開。

參照GB/T 5009.218-2008方法，提取后添加凝膠凈化步驟。將提取后的樣品使用LabTech GPC Cleanup進行凈化。

圖3.  GPC凈化色譜圖

由圖3可以看出，豇豆樣品萃取后的樣品溶液有較大量的大分子成分，其含量遠遠高于水胺硫磷的含量，這也是采用NY/T761-2004標準進行樣品前處理后，色譜圖非常復雜的原因;由圖4可以看出，經過GPC凈化后的樣品，其干擾物質已經基本去除，殘留少量雜質不對檢測產生干擾。故對于豇豆樣品，經過GPC凈化后無需再通過SPE小柱凈化即可滿足后續分析檢測要求。通過高中低三個濃度加標回收率實驗測定，結果如表1所示，滿足樣品前處理實驗要求。

圖4.  GPC凈化后HPLC色譜圖