GPC法高效凈化有機氯農殘

有機氯農藥是防治病蟲害的高效光譜殺菌劑，曾被廣泛用于農業生產中。有機氯物質具有強烈的親脂性，容易通過食物鏈的富集，給食品安全、環境衛生和人體健康等方面帶來較大危害。目前許多國家已限令禁止使用有機氯農藥，但由于數十年的使用歷史，且其化學性質穩定、難以降解，使用量仍很大，因此全球范圍內的有機氯農殘問題亟待解決。

圖1. 全自動凝膠凈化系統（流動相：100%DCM ；柱子：快速高效柱，凈化之前使用）。

牛肉是居于世界消費量前列的肉類，也是我國主要的肉類消費品之一。近年來，研究人員不僅在牛肉樣品中發現了有機氯的殘留，還發現了如六溴聯苯等含氯阻燃劑的殘留。目前關于阻燃劑對人體的危害性的了解較少，但已有研究表明其與癌癥、內分泌失調等疾病有一定的關聯。分析檢測有機氯農藥的方法很多，可根據樣品基質加以選擇。

凝膠滲透色譜是基于體積排阻原理的凈化色譜，使用BioBeads S-X3 填料，將有體積差異的分子分離。GPC 樣品凈化方法是美國環保局、食品藥物管理局、國際分析化學家協會共同推薦的方法，在FDA 2905A 方法和EPA 3640方法中都使用其分離大分子雜質與目標物。GPC 方法以其操作簡單、自動化程度高及高回收率等優勢日益得到眾多實驗室的認可，也被越來越多的行業標準所采納。

GPC 凈化實驗

本實驗采用了GPC 凈化肉類樣品的有機氯，應用GC/ECD 分析檢測。使用全自動凝膠滲透色譜進行樣品的前處理，替代了手工或者半自動的操作模式，使樣品凈化完全，分析結果更加可靠。

圖2. GPC 快速高效柱校正譜圖。

儀器與試劑

儀器 ：PrepLinc ■ GPC(J2 Scientific)、5890 GC(Agilent) ;

■ 試劑 ：二氯甲烷、正己烷。

加標回收實驗

將30 ul 濃度為10 ug/ml 的艾氏劑加入10 ml 容量瓶中，添加5 ml 二氯甲烷溶解，再加入1 g 玉米油充分溶解后，用二氯甲烷定容至10 ml。

圖3. GPC 洗脫曲線。

樣品凈化

將提取出來的5 ml 二氯甲烷樣品溶液放入全自動凝膠凈化系統的進樣架中，設置好參數條件進行GPC 凈化，將收集液濃縮至干并使用5 ml 正己烷定容(定容過程需用正己烷浸泡5 min 以確保所有目標物質完全溶解)，再移至氣相色譜進行分析。

圖4. 回收率曲線圖。

GC 參數

色譜柱：Restek CLPesticides 30 m,0.32 ID, 0.5 um，分流/ 不分流進樣口，進樣體積2 ul，運行時間20 min。

結果與討論

GPC 洗脫曲線

由洗脫曲線(見圖3)可以清楚觀測到分析物的流出情況。

回收率

回收率如圖4 所示，21 種有機氯農藥回收率均可達到86% 以上;添加的內標物質(艾氏劑)的回收率高達99%。

小結

采用傳統的手工方法凈化樣品，各步驟均有不可避免且難以預計的損失，其繁瑣的前處理還需花費大量的人力和時間。應用凝膠凈化色譜進行全自動的GPC 凈化，可將含有大量油脂的肉類樣品凈化完全，既保證了實驗結果的可靠性，又極大地節省了人力和時間。同時，GPC 的條件優化非常簡單、方便，使用紫外檢測器可更容易分辨出目標物的洗脫時間。