近日,來自美國的科學家在國際期刊Nature發表了他們的最新研究成果,他們利用結構導向的方法改造了CRISPR-CAS9復合物來系統性研究基因功能,并通過構建sgRNA文庫大規模篩選抵抗BRAF抑制劑的激活基因。該文章利用CRISPR-CAS9技術研究基因功能,對后基因組時代的基因功能研究具有推動作用。
在已完成人類基因組測序的后基因組時代,人們需要能夠穩定并能廣泛干擾基因表達的方法來進行基因功能探究,過去的研究中,關于系統性研究基因功能的方法主要集中在基因失活方面,比如干擾RNA,RNA導向的CRISPR-CAS9等方法,但針對利用基因功能激活進行系統性基因功能研究的方法研究較少。
Silvana Konermann等人應用結構導向的方法對CRISPR-CAS9復合物進行工程改造,改造后的cas9復合物能夠在基因位點上有效調控基因的轉錄激活。研究人員應用這種工程改造的CRISPR-CAS9復合物探究sgRNA對基因的激活作用,發現應用這種復合物能夠同時激活十個基因,并能夠上調lincRNA的轉錄。為了進一步驗證這種方法的適用性,研究人員針對人類基因組參考序列構建了sgRNA文庫,進行抵抗BRAF抑制劑的激活基因的篩選,根據篩選結果,發現了一些之前已經證明對BRAF抑制劑具有抵抗作用的基因以及新的候選基因。
綜上所述,該文章利用工程改造的CRISPR-CAS9復合物進行激活基因的功能研究,并通過構建sgRNA文庫大規模篩選了抵抗BRAF抑制劑的激活基因。這一研究成果對后基因組時代大規模研究激活基因的功能具有重要意義。
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10月16日,記者從中信湘雅生殖與遺傳專科醫院獲悉,該院研究員林戈、副研究員鄭偉團隊,聯合山東大學、上海交通大學醫學院等單位的科研團隊開展合作攻關,系統揭示了卵子與早期胚胎質量問題導致女性反復“試管”......