PCR技術的基本原理 類似于DNA的 天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物.
PCR是一種體外DNA 擴增技術,是在模板DNA、引物和4種脫氧核苷酸存在的條件下,依賴于DNA聚合酶的酶促合反應,將待擴增的DNA片段與其兩側互補的寡核苷酸鏈引物經“高溫變性——低溫退火——引物
PCR擴增儀
延伸”三步反應的多次循環,使DNA片段在數量上呈指數增加,從而在短時間內獲得我們所需的大量的特定基因片段.
在環境檢測中,靶核酸序列往往存在于—個復雜的混合物如細胞提取液中,且含量很低,對于探測這種復雜群體中的特異微生物或某個基因,雜交就顯得不敏感.使用PCR技術可將靶序列放大幾個數量級,再用探針雜交探測對被擴增序列作定性或定量研究分析微生物群體結構.PCR技術常與其他技術結合起來使用,如RT-PCR、競爭PCR、槽式PCR、RAPf)、ARDRA等.
PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析，電泳后一般有以下幾種條帶：1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有，一般不呈現為細帶，為發散狀；如果目的擴增產物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當降低......
在基因組測序中，PCR擴增似乎是繞不過去的一步。然而，PCR也帶來一些問題，包括不均勻擴增，導致某些序列的比例過高。對目前的新一代測序（NGS）平臺而言，測序某些堿基組成上存在嚴重偏向的基因組區域仍是......
近幾年，隨著全球微生物耐藥及病原體突變問題凸顯，傳染性疾病體外診斷已成為各大醫藥科技公司的學術攻關熱點之一。每當出現一種新型傳染性疾病或者一種新型篩查手段時，疾病檢測診斷市場總會再度滿血復活，開啟全新......