PCR的反應條件與很多參數有關系。如模板濃度，引物長度及GC含量，引物濃度，dNTPs濃度，選用的taq enzyme,緩沖液的離子含量，產物大小，變性時間，退火溫度及時間，延長的時間。
物理原因：變性對PCR擴增來說相當重要，如變性溫度低，變性時間短，極有可能出現假陰性;退火溫度過低，可致非特異性擴增而降低特異性擴增效率退火溫度過高影響引物與模板的結合而降低PCR擴增效率。
有時還有必要用標準的溫度計，檢測一下擴增儀或水溶鍋內的變性、退火和延伸溫度，這也是PCR失敗的原因之一。
靶序列變異：如靶序列發生突變或缺失，影響引物與模板特異性結合，或因靶序列某 段缺失使引物與模板失去互補序列，其PCR擴增是不會成功的。
PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析，電泳后一般有以下幾種條帶：1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有，一般不呈現為細帶，為發散狀；如果目的擴增產物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當降低......
在基因組測序中，PCR擴增似乎是繞不過去的一步。然而，PCR也帶來一些問題，包括不均勻擴增，導致某些序列的比例過高。對目前的新一代測序（NGS）平臺而言，測序某些堿基組成上存在嚴重偏向的基因組區域仍是......
近幾年，隨著全球微生物耐藥及病原體突變問題凸顯，傳染性疾病體外診斷已成為各大醫藥科技公司的學術攻關熱點之一。每當出現一種新型傳染性疾病或者一種新型篩查手段時，疾病檢測診斷市場總會再度滿血復活，開啟全新......