丙烯酰胺 29g
甲叉雙丙烯酰胺 1g
加去離子水,定容至 100ml 調整溶液 pH 值不超過 7.0,置棕色瓶中貯存于室溫或4℃。
SDS 10g
蒸餾水至 100ml
50℃ 水浴下溶解,室溫保存。如在長期保存中出現沉淀,水浴溶化后,仍可使用。
Tris (MW121.14) 45.43g
超純水 200ml
溶解后,用濃鹽酸調pH至8.8,最后用超純水定容至250ml,室溫下保存。
Tris (MW121.14) 15.14g
超純水 200ml
溶解后,用濃鹽酸調pH至6.8,最后用超純水定容至250ml,室溫下保存。
10% 過硫酸胺(AP)
過硫酸胺 0.1g
超純水 1.0ml
溶解后,4℃避光保存,保存時間為1周。(可先將過硫酸胺干粉稱好分量后放在EP管中,一次性多裝幾管,使用時加入超純水即可)
20%Tween20
Tween20 20ml
蒸餾水至 100ml
混勻后4℃保存。
1.74mg/ml (10mmol/L)PMSF
PMSF 0.174g
異丙醇 100ml
溶解后,分裝于1.5ml離心管中,-20℃保存。
單去污劑裂解液(PMSF)
1mol/L Tris·HCl (pH8.0) 2.5ml
NaCl 0.438g
TritonX-100 0.5ml
蒸餾水至 50ml
混勻后4℃保存。使用時,加入PMSF至終濃度為100μg/ml(0.87ml裂解液加入1.74mg/ml PMSF50μl)。
RIPA裂解配方
50 mM Tris-HCl pH 7.4
150 mM NaCl
1 mM PMSF (用前加)
1 mM EDTA
1% Triton x-100
1% 脫氧膽酸鈉
0.1% SDS
G250 考馬斯亮藍溶液 (蛋白定量專用)
考馬斯亮藍G250 100mg
95%乙醇 50ml
磷酸 100ml
蒸餾水至 1000ml
配制時,先用乙醇溶解考馬斯亮藍染料,再加入磷酸和水,混勻后,用濾紙過濾,4℃保存。
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