人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水PBS儀器、耗材超凈臺解剖剪過濾網離心管記數板培養瓶實驗步驟一、實驗材料準備 1. 滑膜組織:將外科手術切下的組織在手術臺上請護士將標本放入低溫生理鹽水中,在手術完成時將標本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中帶回實驗室。 2. 試劑:4 mg/mlⅠ型膠原酶(α-MEM配制),培養液(含10%胎牛血清的α-MEM)。 3. 器械:手術器械。 二、方法 1. 將切下的組織在手術臺上請護士將標本放入低溫生理鹽水中(靜止),在手術完成......閱讀全文
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人滑膜細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
人滑膜細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
腫瘤細胞原代培養實驗——酶消化法
實驗方法原理本法是利用成纖維細胞對膠原酶較為敏感的特點,通過消化進行選擇。可用0.5mg/ml的膠原酶消化處理,邊消化邊在倒置顯微鏡下窺視,當發現成纖維細胞被除掉后,即終止消化;用Hanks洗滌處理一次后,更換新培養液,繼續培養,可獲純凈腫瘤細胞。如成纖維細胞未被除凈,可再次重復。實驗材料組織試劑、
細胞原代培養實驗——胰酶消化法
細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、
人滑膜細胞培養實驗
實驗方法原理滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型細胞的功能是合成輸出蛋白且與透明質酸酶的形成密切相關,同時與
人滑膜細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型
人滑膜細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型
正常滑膜細胞原代培養
正常滑膜細胞原代培養實驗材料:1.?實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2.?清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.?培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:1.?將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2.
正常滑膜細胞原代培養
實驗材料:實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2. 用手術剪剖開其四肢皮膚與肌肉
小鼠肝細胞原代培養實驗——胰酶消化法
小鼠肝細胞原代培養可用于:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS
大鼠肝星狀細胞原代培養實驗_胰酶消化法
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液
大鼠肺成纖維細胞原代培養實驗——胰酶消化法
大鼠肺成纖維細胞培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將大鼠的肺成纖維細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料Wistar乳鼠試劑、試劑盒PBS牛血
人類滑膜原代細胞培養步驟和體會
1、將切下的組織在手術臺上請護士將標本放入低溫生理鹽水中(可不要動它),在手術完成時將標本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中帶回實驗室;2、在超凈臺中將標本放入培養皿中,加入α-MEM洗滌;3、獲得組織切開,仔細辨認于關節反折處及增生的白色光滑的滑膜組織,附于關節軟骨面的增生的血管翳也為滑膜組織(
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗——酶消化法
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養可用于:(1)血腦屏障的研究;(2)腦血管疾病的病理生理及分子生物學研究;(3)新藥篩選;(4)腦微血管內皮細胞生理生化及藥理學研究。實驗方法原理以大腦皮質為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養,成功地摸索出大鼠腦微血管內皮細胞分離和原代培養的方法,并獲得純
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗_胰酶消化法1
實驗方法原理將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料孕鼠試劑、試劑盒PBSEDTA胰酶MEF生長培養基FBS高糖DMEM儀器、耗材眼科直剪眼科直鑷眼科彎鑷玻璃平皿3尼龍濾網離心管手術
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗_胰酶消化法2
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)分子生物學研究;(3)基因治療相關研究。實驗方法原理將小鼠的成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料小鼠試劑、試劑盒PB
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神
血管內皮細胞原代培養(人臍帶靜脈灌流消化法)
內皮細胞易于從大血管分離培養成單層細胞,對于研究內皮細胞再生、腫瘤促血管生長因子(tumor angiogenesis factor,TAF)等有很大價值。研究人內皮細胞培養以人臍帶靜脈灌流消化法最為簡便,其法如下:1、產后新鮮臍帶,無菌剪取10—15厘米長一段,如不能立即培養,可于12小時內保存于
人原代類風濕關節炎滑膜成纖維細胞
細胞詳述:滑膜是關節囊的內層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤,由疏松結締組織組成。關節腔內的所有結構,除關節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。滑膜分泌滑液,在關節活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層,即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層),是血管豐富的關節囊內膜,
大鼠星型膠質細胞培養實驗——酶消化法
大鼠星型膠質細胞培養可以:(1)用于神經系統發育、分化及再生等基礎研究;(2)腦缺血預處理上調神經保護蛋白的機制研究;(3)腦損傷和腦疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。實驗方法原理大鼠星形膠質細胞原代培養后,作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定,應用缺氧D-Hanks'液及缺
原代培養的細胞每次用胰酶消化去除雜細胞
可能是消化時間過長引起的。每種細胞消化時間都不一樣,得自己摸索條件。加入胰酶后,注意觀察細胞,在細胞開始收縮的適當時間里就得及時終止,否則對細胞損傷很大。
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——消化法
人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原
腫瘤細胞原代培養實驗——脫落細胞法
實驗方法原理脫落細胞法是指采集人體各部位,特別是管腔器官表面的脫落細胞進行培養。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒完全培養基洗滌液儀器、耗材刀片培養箱培養皿實驗步驟一、將新鮮的腫瘤組織去除脂肪和結締組織。二、洗液洗2次后,用刀片將腫瘤組織切成細薄片。三、在切割的同時有許多上皮細胞脫落下來,脫落細胞經洗滌后
初代細胞培養實驗——消化培養法
初代培養或原代培養,可以用于:(1)從供體獲取組織后的首次培養;(2)組織和細胞剛剛離體,生物性狀尚未發生很大的變化,具有二倍體遺傳性狀,在供體來源充分、生物條件穩定的情況下(年齡、性別),在一定程度上能反映體內狀態。實驗方法原理合成培養基胰蛋白酶消化培養法,能把組織塊分散成細胞團或單個細胞,便于細
大鼠星型膠質細胞培養實驗——胰酶消化法
實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培養液儀器、耗材離心管培養箱手術器材實驗步驟一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手術臺上,酒精棉球消毒皮膚,開腹取出子宮(約12-14個),放入解剖液中,剖開子宮,取出胚胎,放入解剖液中,
神經膠質細胞培養實驗_胰蛋白酶消化法
實驗材料大鼠試劑、試劑盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12儀器、耗材水浴鍋培養箱實驗步驟一、原代培養1. ?選用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,斷頭取其大腦皮層組織。?2. ?解剖顯微鏡下,剝離腦膜,切除大腦髓質部分。?3. ?將大腦皮質在無Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗_酶消化法
大鼠乳鼠成骨細胞培養培養用于:(1)獲得大鼠乳鼠成骨細胞;(2)骨修復的細胞學機制研究。實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快速的細胞原代分離培養