如何選擇合適的MBP標簽抗體?
大腸桿菌麥芽糖結合蛋白( Maltose Binding Protein,MBP)來源于大腸桿菌malE基因編碼的蛋白,是細菌麥芽糖轉運系統的成員之一,主要負責麥芽糖的攝取及分解代謝。malE基因產物能與多種蛋白融合,是進行表達研究的有效媒介,由于MBP融合蛋白原核表達載體具有表達效率高,易于純化等優點。在現代分子克隆中MBP常作為融合蛋白被廣泛應用。如何選擇合適的MBP標簽抗體?我們在選擇MBP抗體時,主要根據自己的需要,特別是實驗應用上的需要。另外,一個抗體檢測后的應用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大;而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl MBP抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,最終使用液相當于500ml),要比效價低的1ml的MBP抗體(假如WB檢測的稀釋比率......閱讀全文
如何選擇合適的MBP標簽抗體?
大腸桿菌麥芽糖結合蛋白( Maltose Binding Protein,MBP)來源于大腸桿菌malE基因編碼的蛋白,是細菌麥芽糖轉運系統的成員之一,主要負責麥芽糖的攝取及分解代謝。malE基因產物能與多種蛋白融合,是進行表達研究的有效媒介,由于MBP融合蛋白原核表達載體具有表達效率高,易于純
常用內參抗體和標簽抗體
Anti-β-Tubulin,Anti-β-Actin,Anti-GAPDH,Anti-GFP Tag,Anti-RFP Tag 等Epitope Biotech Inc. 公司定制生產高品質的對特定表位有特異性的小鼠單克隆抗體,與其他公司生產的同類產品相比,具有最高的靈敏度和最高的特異性,并且性價
His抗體推薦—Abbkine全系列His標簽抗體
His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標
GST標簽抗體GST標簽與IFIP等多種應用
近年來在原核表達體系中,谷胱甘肽S轉移酶GST表達純化系統的應用更為普遍,它的來源是日本血吸蟲的25kDa大小的GST蛋白。GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便,以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過親和層析得到。G
HA抗體推薦—選擇合適HA標簽抗體的因素
HA標簽系統利用一個HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛應用于多種細胞類型,相應的HA標簽抗體也被廣泛應用。HA 標簽抗體能特異識別C末端或N末端帶有HA標簽
如何選擇合適的Myc標簽抗體?
隨著蛋白質組學的迅猛發展,重組蛋白質的使用在近年來大大增加。重組雜合體含有一個親和標簽如GST、Myc、His等,可用于輔助目標蛋白的純化,這已經被廣泛使用。利用融合蛋白有助于重組蛋白純化和檢測的這個有點被廣泛認可。Myc標簽相當于人的c-Myc 410-419位肽段(序列為:EQKLISEED
如何選擇合適的His標簽抗體?
His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標
如何選擇合適的CBP標簽抗體?
CBP標記的蛋白在低濃度鈣緩沖液中能夠異性的被鈣調蛋白樹脂捕捉吸附,并且在中性環境中能夠被2 mM EGTA洗脫,這與6組氨酸親合標簽純化體系相比反應條件要溫和許多。僅有4-kDa 大小的CBP tag 與26-kDa GST 標簽相比對蛋白分子的影響非常小。在所表達的蛋白分子上包含一個凝血
如何選擇合適的HA標簽抗體?
HA標簽系統利用一個HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛應用于多種細胞類型,相應的HA標簽抗體也被廣泛應用。HA 標簽抗體能特異識別C末端或N末端帶有
蛋白上的標簽是否會影響抗體制備?
通常重組蛋白上的GST(谷胱甘肽S-轉移酶)或MBP(麥芽糖結合蛋白)標簽分子量較大,含有許多抗原位點,在免疫時會成為抗原從而影響特異性抗體的制備。所以作為抗原的重組蛋白最好不帶有GST或MBP標簽。一些小分子量的標簽,如His、Myc、Flag基本不會影響特異性抗體的制備。NovoPro用于制備抗
Flag標簽蛋白檢測抗體實驗應用說明
Flag標簽蛋白檢測抗體Abbkine提供可用于WB,IF,IP應用的Flag抗體,特異性檢測Flag標簽融合蛋白,Flag標簽抗體可識別在細胞內表達的Flag標記重組蛋白,包括Flag位于氨基末端、中段以及羧基末端的重組蛋白。Flag標簽系統利用一個短的親水性八氨基酸肽( DYKDDDDK)融
Myc抗體推薦—高品質Myc標簽單克隆抗體
隨著蛋白質組學的迅猛發展,重組蛋白質的使用在近年來大大增加。重組雜合體含有一個親和標簽如GST、Myc、His等,可用于輔助目標蛋白的純化,這已經被廣泛使用。利用融合蛋白有助于重組蛋白純化和檢測的這個有點被廣泛認可。Myc標簽相當于人的c-Myc 410-419位肽段(序列為:EQKLISEED
Factor-Xa-Cleavage-of-MBPFusion-protein
INTRODUCTIONIn many cases the cleavage can be performed using the free intact fusion, or in same cases with the fusion protein bound to a matrix.?The
如何選擇合適的KT3標簽抗體?
標簽抗體的效價如何考察?KT3表位標簽經常被重組到目標蛋白的的N末端或C末端,以實用免疫組織化學或熒光化學技術來實現可視化觀察和定位。KT3標簽的氨基酸序列為KPPTPPPEPET。Abbkine特異性的KT3單克隆抗體能識別來源于來自猿猴病毒40大T抗原( SV40)序列的KT3融合蛋白。如何
如何選擇合適的VSVG標簽抗體?
水泡性口炎病毒( VSV)屬于有包膜RNA病毒,以出芽的方式從宿主細胞的質膜上釋放出來。來源于水泡性口炎病毒的融合性外殼G糖蛋白( VSV-G)已被用于逆轉錄病毒和慢病毒載體中作為基因轉移的重要手段。VSV-G標簽(序列:YTDIEMNRLGK)來源于VSV-G蛋白的一部分,經常被用于融合在目的
GFP抗體—綠色熒光蛋白的單克隆和多克隆標簽抗體
GFP(Green Fluorescent Protein,綠色螢光蛋白)是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質,在藍色波長范圍的光線激發下,會發出綠色螢光。GFP標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛 應用于各種細胞
重組蛋白表達的幾種常用標簽介紹
?重組蛋白表達技術現已經廣泛應用于生物學各個具體領域。特別是體內功能研究和蛋白質的大規模生產都需要應用重組蛋白表達載體。本文將簡要介紹幾個常用載體標簽及其功能和優點。一. GST標簽GST(谷胱甘肽巰基轉移酶) 標簽蛋白本身是一個在解毒過程中起到重要作用的轉移酶,它的天然大小為26KD。將它應用在原
大鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA檢測法
大鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?MBP?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?MBP與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠MBP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Strept
Purification-of-MBP-(maLTosebinding-proteins)-Fused-Proteins
Express fusion proteins as per the?GST-fused protocol?up to Step 7 (Day 3). All steps in protein purification should be done at 4° C unless otherwise
【分享】幾種常用的蛋白標簽的功能和優點
重組蛋白表達技術現已經廣泛應用于生物學各個具體領域。特別是體內功能研究和蛋白質的大規模生產都需要應用重組蛋白表達載體。本文將簡要介紹幾個常用的蛋白標簽及其功能和優點。 一. GST標簽 GST(谷胱甘肽巰基轉移酶) 標簽蛋白本身是一個在解毒過程中起到重要作用的轉移酶,它的天然大小為26KD。
豬髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
豬髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗豬?MBP?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?MBP與單抗結合,加入生物素化的抗豬MBP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavi
兔髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
兔髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和唾液、尿液、生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗兔?MBP?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?MBP與單抗結合,加入生物素化的抗兔MBP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Str
人髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
人髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?MBP?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?MBP與單抗結合,加入生物素化的抗人MBP,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavi
用于蛋白質表達的標簽實驗
實驗步驟一、設計具有標簽的蛋白質時需要考慮的因素親和力和可溶性的選擇在大腸埃布氏菌中生產外源蛋白時面臨兩個挑戰: 一? 是所用蛋白質表達系統的表達水平很低; 二是所表達的蛋白質被錯誤折疊進不溶性的聚集體—包涵體中。弱啟動子、低轉錄起始或稀有密碼子的存在引起的表達問題都可以通過在裝配過表達質粒時將矯正
如何選擇合適的高靈敏度RFP(DsRed)標簽抗體?
紅色熒光蛋白(RFP)是從太平洋與海葵相關的 (Discosomasp)中分離出來的一種能在紫外線的照射下可發射紅色熒光的蛋白。在細胞中熒光轉換效率高.是目前發現的具有最長激發波長與發射波長的自然發光熒光蛋白,RFP基因編碼的蛋白質由225個氨基酸組成,相對分子質量(Mr)為25.9ku.RFP
Abbkine新上市標簽內參直標抗體染料細節及優勢
標簽抗體和內參抗體在生命科學研究中被廣泛使用,是WB, IF, IHC等實驗必不可少的關鍵試劑,但盡管如此,研究者們還是需要為他們的實驗配上一個合適二抗(HRP或者熒光基團),這不僅增加了實驗試劑的采購成本,而且增加了額外的操作步驟和時間消耗,更增加了非特異性信號的潛在可能性。Abbkine憑借
蛋白質分析,純化,如何做?
對于分析蛋白質個體和蛋白質復合物,鑒定蛋白質與蛋白質、核酸之間的相互作用,蛋白質的純化是這些研究的基石。由于純化天然蛋白是一件ji具挑戰性的工作,科學家開發出來利用標簽融合蛋白來捕獲純化和檢測目的蛋白的實驗體系。純化蛋白最有效的就是親和層析,它是通過目的蛋白與相匹配的固定化配體的進行特異性結合,實現
標簽酶消化釋放標簽實驗
試劑、試劑盒溶液與緩沖液LoTE儀器、耗材Eppendorf 試管實驗步驟實驗方案 A1.向含有 Dynabeads 的每個試管中加入下列物質:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.時收集上清液(含有釋放的 cDNA 標簽)4.用 LoTE 擴容到 200mL。5.等體積的
標簽酶消化釋放標簽實驗
試劑、試劑盒 溶液與緩沖液LoTE儀器、耗材 Eppendorf 試管實驗步驟 實驗方案 A1.向含有 Dynabeads 的每個試管中加入下列物質:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.時收集上清液(含有釋放的 cDNA 標簽)4.用 LoTE 擴容到 200mL。5.等體
標簽酶消化釋放標簽實驗
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