實驗技術：組織切片的制備
【目的】組織標本必須首先被制成組織切片，再經過染色處理，然后才能在顯微鏡下進行臨床診斷和科學研究。【原理】蘇木素染色結合伊紅染色是常規組織學染色技術，也稱為H & E染色。蘇木素是堿性染色，細胞核被染成深紫或蘭色，常用作核染色；伊紅是酸性染色，細胞漿染呈紅色，常用作胞漿染色。【材料】1.試劑和溶液（1）2-甲基丁醇(異戊醇)（2）干冰（3）O.C.T.(Tissue-Tek, SAKURA)（4）冰凍或石蠟組織塊（5）酸性Harris 蘇木素染料（6）1％酸性酒精70％酒精 99 ml濃鹽酸 1 ml（7）醇溶性伊紅染料（8）酒精（9）二甲苯（10）樹脂封片液2.設備（1）......閱讀全文
冰凍切片前的組織怎樣保存
冰凍切片組織可先固定后凍存，也可直接凍存，直接凍存一般采取液氮中速凍，然后轉入-20度保存，凍存組織應避免反復凍融，且盡快進行切片或用OCT包埋(包埋后可放置較長時間)。未包埋的組織在-20度長期保存的組織會逐漸脫水(比如肌肉)，影響形態學觀察。
硬組織切片機使用范圍
1.可以進行軟硬組織聯合切片。 2.可以進行鮮活組織分切、取材。 3.能夠制作大骨組織切片。 4、不脫鈣骨組織切片 5、可選配激光線定位指引切割 6、可配套E400CS硬組織磨片機、E520光固化包埋機、E401/402平行載片粘合壓片裝置,共同組成硬組織切磨系統
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟，并浸入組織內部，把軟組織變為適當硬度的蠟塊，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟，并浸入組織內部，把軟組織變為適當硬度的蠟塊，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟，并浸入組織內部，把軟組織變為適當硬度的蠟塊，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
LSCM組織切片的細胞核標記
組織切片的細胞核標記目前仍然采用?DAPI(4，6-聯脒-2-苯基吲哚，ex 359 nm / em 461 nm)，其特點是專一性強、靈敏度高、穩定性好、毒性小，且可被405nm激光器有效地激發，獲取明亮的核標記熒光圖像。PI(碘化丙啶?ex 536nm / em 617nm)也可以用于核標記，因
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟，并浸入組織內部，把軟組織變為適當硬度的蠟塊，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
TUNEL分析實驗——組織切片的－TUNEL－染色
實驗材料組織試劑、試劑盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液儀器、耗材Parafilm 膜實驗步驟1. 取下組織，立即用新制備的 4% 甲醛固定，室溫過夜。用多聚甲醛制備 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通風櫥中加熱至 50~60℃，加幾滴 1
組織切片機常見問題分析
分析一下免疫組化實驗中一些常見的問題和解決措施： 常見問題一：所有切片呈陰性 原因分析：a.緩沖液內含疊氮化鈉，抑制酶的活性； b.染色未完全按照操作步驟進行； c.漏加一種抗體或抗體失活； d.復染或脫水劑使用不當； e.底物中加入的過氧化氫少或失活。
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟，并浸入組織內部，把軟組織變為適當硬度的蠟塊，以便切成薄片。1、概念包埋：指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
組織固定、包埋及切片實操指南
如何做出一張合格的組織切片？ 一般要先取材→固定→透明→包埋→切片，最后進行染色組化等操作。本文著重敘述取材以后如何進行包埋和切片。 包埋可分為OCT包埋（冰凍切片）與石蠟包埋。 冰凍切片對于組織的抗原性保留比較好，但是形態保留比較差，一般用來做原位雜交ISH，免疫熒光IF。冰凍切片較厚一
撫生試劑免疫組織化學組織細胞的組織切片
一、載玻片的處理??? 免疫組化染色時間長，特別是雙PAP、免疫金銀染色等方法，所需時間更長，并要反復洗滌，切片在試劑中長時間浸泡，經多次洗滌，極易造成脫片而影響實驗的結果。需采用以下方法處理：載玻片先置于洗潔液(或洗衣粉溶液)中煮沸30min，清水洗干凈后放人清潔液中浸泡12—24h，漂洗，用蒸餾
硬組織切片機的技術指標
1.切割帶速度：10-560m/min；2.最大橫切面：100×80mm；3.切片厚度：100μm；4.切削力：0.5-1.0N；5.工作臺高度：800mm；6.切割方式：點接觸帶式切割；7.操作尺寸:800×700×850mm；8.切割刀具：金剛石帶鋸。
組織切片標本制作的基本原理
最為廣泛應用的方法:石蠟切片 不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構，也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法，而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中。教學中，光鏡下觀察切片標本多數是石蠟切片法制備的。活的細胞或組織多為無色透明，各種組織間和細胞內各種結構之間均缺
普通組織石蠟包埋切片的注意事項
1、固定劑應有足夠的量，一般為組織塊體積的10∽15倍。 2、根據組織的不同和實驗目的的不同，選取不同的固定劑。 3、固定時間依材料大小、固定劑種類而異，可從1小時到幾時小時，有時中間需要更新固定劑。某些固定劑對組織的硬化作用較強，作用時間應嚴加控制，不能過長。 4、取材切面要平整，厚度不
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
組織學切片機分類及應用
切片機種類很多，包括藥材類切片機，器材類切片機，食品類切片機，組織切片類切片機等。組織切片機主要是對人體組織及動植物組織作病理切片分析的設備。組織切片機一般主要分為：輪轉式切片機和冷凍切片機。輪轉式切片機：是借轉動手搖輪進行切片動作。蠟塊臺鑲裝于可在溝槽內上下運動的金屬夾座中，借微動螺旋向前推進切斷
石蠟切片免疫組織化學染色
主要試劑染色缸；染色架；保濕盒；晾片盤；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘；2.?????脫蠟和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
組織學切片機分類及應用
切片機分為很多種類，包括藥材類切片機，器材類切片機，食品類切片機，組織切片類切片機等。按其結構又可分為搖動式切片機、輪轉式切片機、滑動式切片機、推動式（雪橇式）切片機等。組織切片機是一種對人體組織及動植物組織作病理切片分析的設備。組織切片機一般分為：輪轉式切片機和冷凍切片機。輪轉式切片機：是借轉動手
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修復工作液（pH8.0，稀釋50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀釋10倍使用） DAB顯色液（臨用前配制：試劑盒A、B、C各50ul，于1ml水中混勻）。方法1.? 石蠟切片置60℃烘箱中烘烤過夜 2.?
顯微冷凍切片機的使用和大（小）鼠腦組織切片操作實驗
實驗材料 大小鼠大腦試劑、試劑盒 手術器械 顯微冷凍切片機 包埋劑儀器、耗材 大小鼠立體圖譜實驗步驟 1. ?安裝刀具，移上安全桿。調整切片機溫度到-20 ℃(（右手邊up 和down 二個按鈕調節, up調高溫度, down,降低溫度）。 2. ?從-80 ℃冰箱取出腦組織在切片機或-20 ℃冰箱
顯微冷凍切片機的使用和大（小）鼠腦組織切片操作實驗
冷凍切片機可以用于：（2）切制薄而均勻的組織片；（2）組織用堅硬的石蠟或其他物質支持，每切一次借切片厚度器自動向前（向刀的方向）推進所需距離，厚度器的梯度通常為1微米。實驗方法原理切制石蠟包埋的組織時，由于與前一張切片的蠟邊粘著，而制成多張切片的切片條。實驗材料大小鼠大腦試劑、試劑盒手術器械 顯微冷
LSCM冷凍組織切片的免疫熒光標記
冷凍組織切片的免疫熒光標記?將冷凍組織切片從?-80℃?冰箱中取出，室溫放置?10 min，待切片回溫并干燥，浸于?PBS?中?10 min洗去OCT，可以無需?Triton?處理，即可進行免疫熒光抗體標記，操作步驟與培養細胞反應方法相同。反應在避光濕盒中進行，反應結束時用無熒光封固劑封片，4℃保存
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 PBS抗體儀器、耗材 玻片加濕盒實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。?3. ?稀釋的第
石蠟切片組織有橫向裂紋是怎么回事
組織的形態不是很清晰，可能沒有固定好。 建議： 1、取材要快，離體5分鐘內修整好組織塊，放入固定液，越快越好，減少組織自溶； 2、組織固定時體積要小，不大于5mm； 3、固定液充分，固定液與組織的體積比10-20：1。 石蠟切片（paraffin section）組織學常規制片技術中最
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
間接免疫熒光顯微鏡檢術可使兩種或更多種抗原可以在同一切片，同一時間內被顯示出來，可用于（1）細胞標記；（2）免疫熒光篩選干細胞。實驗方法原理通過使用激發波長及發射波長均不相間的熒光染料而進行的。通常限用兩種熒光染料，最常見的是羅丹明（綠光激發，發射紅光）和熒光素（藍光激發、發綠光）聯合使用。實驗材料
組織切片的免疫熒光雙標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 第一抗體IgG實驗步驟 1. ?當進行雙標記實驗時，最重要的準則是：第一抗體應為不同類型，從而使第二抗體能分別識別之。第一抗體最好是來源于不同免疫動物。但如使用單克隆抗體，這一要求就有可能達不到，當使用單抗時，不同型的抗體如IgG和IgM，可被第二抗體確切區分
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PB
冰凍切片實驗技巧（四）：脂肪組織的處理
脂肪組織無疑是冰凍切片者的絆腳石，道理很簡單脂肪不會結冰，把溫度降低讓脂肪變硬可以切出較薄的片子，但是這個溫度對同一組織中的其他成分來說顯得太低而不合適切片，當脂肪破碎影響切片時這個問題就變得明顯，下面是一些我的經驗總結。1.盡可能的削掉不需要的脂肪組織當我準備切淋巴結時，我會先檢查一遍，小心翼翼地