微生物的染色技術及顯微鏡觀察(二)
二、革蘭氏染色法 1 目的 1.1 了解革蘭氏染色法的原理及其在細菌分類鑒定中的重要性。 1.2 學習掌握革蘭氏染色技術,鞏固學習光學顯微鏡油鏡的使用方法。2 原理 革蘭氏染色法是1884年由丹麥病理學家Christain Gram氏創立的,革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-)兩大類。革蘭氏染色法是細菌學中最重要的鑒別染色法。 革蘭氏染色法的基本步驟是:先用初染劑結晶紫進行初染,再用碘液媒染,然后用乙醇(或丙酮)脫色,最后用復染劑(如番紅)復染。經此方法染色后,細胞保留初染劑藍紫色的細菌為革蘭氏陽性菌;如果細胞中初染劑被脫色劑洗脫而使細菌染上復染劑的顏色(紅色),該菌屬于革蘭氏陰性菌。 革蘭氏染色法所以能將細菌分為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性,是由這兩類細菌細胞壁的結構和......閱讀全文
微生物學檢驗染色標本檢查
細菌標本經染色后,由于細菌與周圍環境間在顏色上形成鮮明對比,故在普通光學顯微鏡下可清楚地觀察到細菌的形態特征(如細菌的大小、形狀、排列等)和某些特殊結構(如莢膜、鞭毛、芽孢等),并可根據染色反應性對細菌加以分類鑒定。? ? (一)細菌染色的一般程序 細菌染色的一般程序是:涂片(干燥)—固定—染色(
微生物的染色與形態結構觀察實驗——細菌的單染色法
實驗方法原理在中性、堿性或弱酸性溶液中,細菌細胞通常帶負電荷,所以常用堿性染料進行染色。堿性染料并不是堿,和其他染料一樣是一種鹽,電離時染料離子帶正電,易與帶負電荷的細菌結合而使細菌著色。實驗材料金黃色葡萄球菌試劑、試劑盒生理鹽水呂氏堿性美藍染色液石炭酸復紅染色液儀器、耗材顯微鏡載玻片接種環雙層瓶擦
微生物擬核體內體外染色觀察實驗
實驗方法原理 富爾根氏(Feulgen)染色法是根據席夫氏(Schiff)試劑進行的反應而建立的微生物擬核染色法。席夫氏試劑含有堿性復紅和亞硫酸,堿性復紅與亞硫酸結合后,失去醌式結構而變為無色。當 DNA 經酸作用而生成的醛化合物與席夫氏試劑結合后,使醌式結構恢復,合成一種帶紫紅色的堿性復紅衍生
微生物的染色技術及顯微鏡觀察
一、細菌 ?的簡單染色法?1 目的 1.1 學習微生物涂片、染色的基本技術。 1.2 掌握細菌的簡單染色法。 1.3 初步認識細菌的形態特征,鞏固學習油鏡的使用方法和無菌操作技術。 2 原理 細菌的涂片和染色是微生物學實驗中的一項基本技術。細菌的細胞小而透明,在普通的光學顯微鏡下不易識別,必須對它們
關于微生物染色的基本原理介紹
微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。酸性物質對于堿性染料較易吸附,且吸附作用穩固;同樣,堿性物質對酸性染料較易于吸附。如酸性物質細胞核對于堿性染料就
微生物擬核體內體外染色觀察實驗_富爾根氏染色法
實驗方法原理富爾根氏(Feulgen)染色法是根據席夫氏(Schiff)試劑進行的反應而建立的微生物擬核染色法。席夫氏試劑含有堿性復紅和亞硫酸,堿性復紅與亞硫酸結合后,失去醌式結構而變為無色。當 DNA 經酸作用而生成的醛化合物與席夫氏試劑結合后,使醌式結構恢復,合成一種帶紫紅色的堿性復紅衍生物。此
微生物學技術:細菌抗酸染色法
1、原理與應用結核分枝桿菌對苯胺染料一般不易著色,若加溫或延長染色時間使其著色后,再用3%鹽酸酒精處理也不易脫色,經此染色后,結核分枝桿菌及其他分枝桿菌呈紅色,而非抗酸菌和細胞雜質等呈藍色。2、材料(1)結核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夾、濾紙片、竹簽、空平皿、污物盆。3、方法(1)取潔凈的
微生物檢測中革蘭氏染色相關知識點
革蘭氏染色的原理細菌細胞通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而
微生物的染色技術及顯微鏡觀察(二)
二、革蘭氏染色法 ? 1? 目的 ? 1.1 了解革蘭氏染色法的原理及其在細菌分類鑒定中的重要性。? 1.2 學習掌握革蘭氏染色技術,鞏固學習光學顯微鏡油鏡的使用方法。2? 原理 ? 革蘭氏染色法是1884年由丹麥病理學家Christain ? Gram氏創立的,革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭
微生物的染色技術及顯微鏡觀察(一)
一、細菌的簡單染色法 ? 1 目的 ? 1.1 學習微生物涂片、染色的基本技術。 ? 1.2 掌握細菌的簡單染色法。 ? 1.3 初步認識細菌的形態特征,鞏固學習油鏡的使用方法和無菌操作技術。 ? 2 原理 ? 細菌的涂片和染色是微生物學實驗中的一項基本技術。細菌的細胞小而透明,在普通的光學
病原微生物染色實驗——乙型肝炎表面抗原
實驗方法原理乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是由多肽組成的脂蛋白,由于抗原內含有豐富的二硫鍵成分,經過氧化劑而轉變為磺酸,然后再與染色液產生較強的親和力進行著色。通過地衣紅(Orcein)染色法,能夠較好地顯示乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水
微生物檢驗培養基、試劑、染色液和血清的質量控制
一、配制時的質量控制(1)容器:配制和分裝培養基的燒瓶、平皿或試管等器材應為中性,無酸、堿抑制物殘留,平皿底部要平,以免瓊脂厚薄不一,影響藥敏試驗結果。(2)成分來源:各種成分來源可靠,不含對目的菌生長有抑制的物質。特殊要求的培養基,如葡萄糖氧化發酵試驗(O/F 試驗),除加入葡萄糖外,不能含有其他
微生物檢驗培養基、試劑、染色液和血清的質量控制
培養基質量控制??一、配制時的質量控制(1)容器:配制和分裝培養基的燒瓶、平皿或試管等器材應為中性,無酸、堿抑制物殘留,平皿底部要平,以免瓊脂厚薄不一,影響藥敏試驗結果。(2)成分來源:各種成分來源可靠,不含對目的菌生長有抑制的物質。特殊要求的培養基,如葡萄糖氧化發酵試驗(O/F 試驗),除加入葡萄
糖類染色實驗——糖原染色
實驗方法原理糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙重蒸餾水
人類染色體姊妹染色單體差別染色
?????姊妹染色單體區分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期發展起來的染色體處理技術。Latt(1973)在培養的細胞中加入5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU),當用Hoechst33258 熒光染料染色時,發現了姊妹染色單體的色差反映和它們
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗方法原理 細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體
革蘭氏染色液染色法
??1.葡萄球菌和大腸桿菌混合菌液。????2.結晶紫染色液。????3.革蘭氏碘液。????4.95%酒精。????5.番紅染液。????6.載玻片。方???法?????一、涂片標本的制備(見實驗一)????二、革蘭氏染色法?????1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加結晶紫染液,染色1分鐘,水洗
姐妹染色單體分化染色方法
姐妹染色單體差別染色可使中期染色體顯示深淺不同的兩條單體,能借以觀察姐妹染色單體互換(SCE)現象。SCE是兩條染色單體在DNA合成中核苷酸序列發生互換而表現出來一種現象。即是細胞分裂是DNA同源重組的結果。SCE既是一種無害的變化(有生理波動),也可受射線、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗方法原理細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體D
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗概要本文介紹了姐妹染色單體分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理姐妹染色單體分化染色法(Sister ?chromatid ?differentiation,SCD)是20世紀70年代中期發展起來的染色體處
間接染色步驟(細胞表面染色)
實驗概要間接標記需要兩個孵育步驟,先與一抗再與合適的第二抗體孵育,二抗(不是一抗)結合了熒光染料(FITC、PE、Cy5 等)。請注意這是一個普遍的程序,您可以根據自己的使用情況進行調整。實驗步驟1.?收集并洗滌細胞,然后確定細胞總數。細胞通常在聚苯乙烯的圓底 12 x 75 mm2 Falcon
糖類染色實驗——黏液物質染色
實驗方法原理在人體和動物體中能夠分泌黏液物質,依其物質中含有的酸基不同,所以分為中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被稱為中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿爾辛藍高碘酸 Shiff 反應(ABPAS)染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒阿爾辛藍 8 GS冰醋酸蒸餾水麝香
染色質染色體和染色單體的區別
(1)、染色質和染色體的主要成分都是DNA和蛋白質,它們之間的不同,不過是同一物質在細胞分裂間期和分裂期的不同形態表現而已。 染色質出現于間期,呈絲狀。它們在核內的螺旋程度不一,螺旋緊密的部分,染色較深,有的螺旋松疏染色較淺,染色質在光鏡下呈現顆粒狀,不均勻地分布于細胞核中。細胞分裂時染色質細
血細胞化學染色的染色法—鐵染色的介紹
(1)血細胞化學染色的染色法—鐵染色的原理:人體內有一定量的以鐵蛋白和含鐵血黃素形式貯存的鐵元素,這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應,生成藍色的亞鐵氰化鐵沉淀(普魯士藍),定位于含鐵的部位。 (2)血細胞化學染色的染色法—鐵染色的操作方法:將染色液滴加在骨髓小粒豐富的骨髓涂片上,室溫20~30
血細胞化學染色的染色方法—-糖原染色(PAS)的介紹
(1)血細胞化學染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。 (2)血細胞化學染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液
革蘭氏染色配制及染色方法實驗
實驗方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于標本涂片或菌落涂片。染色結果將細菌分為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性兩類。實驗步驟一、實驗試劑:1. 結晶紫溶液:A液:結晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸銨:0.8g,蒸餾水:80ml。需在用前24小時將A液. B液混合,過濾后裝入試劑瓶內備用。2.
瑞氏染色法:染色原理
既有物理的吸附作用,又有化學的親和作用。各種細胞成分化學性質不同,對各種染料的親和力也不一樣。如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質;細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞胞質為酸性,與堿性染料美藍或天青結合,染紫藍色或藍色,稱為嗜堿性物質;中性顆粒呈等電狀態
鞭毛染色配制及染色方法實驗
實驗步驟改良Ryui法一、實驗試劑:A液:5%石炭酸:???? 10ml鞣酸:??????????? 2g飽和硫酸鋁鉀液:10mlB液:結晶紫酒精飽和液應用液:A液10份,B液1份,混合,室溫存放。二、染色方法:1. 玻片的處理:要求用新的載玻片,用前須在95%酒精中浸泡24小時以上,用時從酒精中取
電子染色的染色特點介紹
電子染色(electron stain)是利用某些重金屬鹽(鈾、鉛等)能與細胞的某些結構和成分結合,以提高電子密度來增強結構的反差。
抗酸染色配置以及染色方法實驗
實驗方法原理抗酸染色直接用于痰標本時,可以適當曾加標本涂片的厚度,以提高檢出率。染厚涂片時,須掌握復染色時間,如果背景過深,影響鏡檢。實驗步驟堿性復紅染色法:(萋納Ziehl-Neelsen法)一、實驗試劑:1. 萋納石炭酸復紅溶液:堿性復紅乙醇飽和溶液:10ml5%石炭酸溶液:?????? 90m