膜鉗片實驗
實驗材料 細胞組織試劑、試劑盒 硅酮樹脂電極液儀器、耗材 膜片微電極濾膜 防震工作臺屏蔽罩儀器設備架單色光系統膜片鉗放大器刺激器數據采集的設備微操縱器實驗步驟 第一步是分兩次拉制，第一次拉長7～10mm，直徑小于200μm，在此基礎上進行第二次拉制，最終使尖端的直徑為1～2μm，兩步拉制的目的主要是使電極前端的錐度變大，狹窄部長度縮短，因此可降低電極的串聯電阻，也可減少全細胞記錄時的電極液透析時間。由于膜片微電極最忌沾染灰塵和臟物，更忌觸碰尖端附近部位，所以一般要求在使用前制作。 第二步是在電極前端涂以硅酮樹脂（sylgard），其目的是為了降低電極與灌流液之間的電容，并形成一個親水界面。經此處理后，上述電容可由6～8pF減少到1pF以下。硅酮樹脂對形成Giga?鄄seals無影響，但可減少本底噪音，對單通道記錄很重要。在進行全細胞記錄時，不用硅酮樹脂也可以得到滿意的效果，通常微電極在涂抹硅酮樹脂后再進行拋光，但最好是......閱讀全文
膜鉗片實驗
實驗材料 細胞組織試劑、試劑盒 硅酮樹脂電極液儀器、耗材 膜片微電極濾膜 防震工作臺屏蔽罩儀器設備架單色光系統膜片鉗放大器刺激器數據采集的設備微操縱器實驗步驟 第一步是分兩次拉制，第一次拉長7～10mm，直徑小于200μm，在此基礎上進行第二次拉制，最終使尖端的直徑為1～2μm，兩步拉制的目的主要是
膜鉗片
運用膜片鉗 進行膜離子通道特性的研究，是一項艱辛、細致、繁雜的工作，要求較高的技術水平和實驗條件作保證，現在大致介紹一下膜片鉗 實驗的過程。實驗材料細胞組織試劑、試劑盒硅酮樹脂電極液儀器、耗材膜片微電極濾膜 防震工作臺屏蔽罩儀器設備架單色光系統膜片鉗放大器刺激器數據采集的設備微操縱器實驗步驟第一步是
膜鉗片
膜鉗片 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞組織 試劑、試劑盒
瘧原蟲薄血膜推片實驗
實驗步驟將一小滴外周血（采自耳垂或指尖）滴于一載玻片一側，另取一載玻片為推片，使其一端接觸血滴，使血滴向兩側分散，二玻片間保持30°～ 45°角度，將推片緊靠載玻片沿其表面迅速向前推動，形成分布均勻的血膜，自然干燥后用甲醇1～2滴固定。以稀釋的姬氏染液染色30分鐘晾干、鏡檢。或以 瑞氏染液染色3～5
瘧原蟲厚血膜推片實驗
實驗步驟取外周血一大滴，滴于薄血片的右端1/3處，以推片一角，將血滴自內向外作螺形攤開，形成直徑1 cm大小的厚薄均勻的厚血膜。自然晾干后，用蒸餾水1滴加于血膜上，待血膜成灰白色時，將水傾去，再用甲醇固定。以稀釋的姬氏染液染色30分鐘晾干、鏡檢。或以瑞氏染液染色3～5分鐘晾干、鏡檢。
瘧原蟲薄血膜推片實驗
將一小滴外周血（采自耳垂或指尖）滴于一載玻片一側，另取一載玻片為推片，使其一端接觸血滴，使血滴向兩側分散，二玻片間保持30°～ 45°角度，將推片緊靠載玻片沿其表面迅速向前推動，形成分布均勻的血膜，自然干燥后用甲醇1～2滴固定。以稀釋的姬氏染液染色30分鐘晾干、鏡檢。或以 瑞氏染液染色3
瘧原蟲厚血膜推片實驗
取外周血一大滴，滴于薄血片的右端1/3處，以推片一角，將血滴自內向外作螺形攤開，形成直徑1 cm大小的厚薄均勻的厚血膜。自然晾干后，用蒸餾水1滴加于血膜上，待血膜成灰白色時，將水傾去，再用甲醇固定。以稀釋的姬氏染液染色30分鐘晾干、鏡檢。或以瑞氏染液染色3～5分鐘晾干、鏡檢。
膜片鉗實驗操作
運用膜片鉗進行膜離子通道特性的研究，是一項艱辛、細致、繁雜的工作，要求較高的技術水平和實驗條件作保證，現在大致介紹一下膜片鉗實驗的過程，粗略地包括以下幾個方面。1. 標本制備 根據研究目的的不同，可采用不同的細胞組織，如心肌細胞、平滑肌細胞、腫瘤細胞等，現在幾乎可對各種細胞進行膜片鉗的研究。對所
膜片鉗操作實驗
膜片鉗技術可應用于：（1）膜離子通道特性的研究；（2）藥物篩選。實驗方法原理膜片鉗技術是用微玻管電極（膜片電極或膜片吸管）接觸細胞膜，以千兆歐姆以上的阻抗使之封接，使與電極尖開口處相接的細胞膜的小區域（膜片）與其周圍在電學上分隔，在此基礎上固定點位，對此膜片上的離子通道的離子電流（pA級）進行監測記
膜片鉗實驗操作
運用膜片鉗進行膜離子通道特性的研究，是一項艱辛、細致、繁雜的工作，要求較高的技術水平和實驗條件作保證，現在大致介紹一下膜片鉗實驗的過程，粗略地包括以下幾個方面。 1. 標本制備 根據研究目的的不同，可采用不同的細胞組織，如心肌細胞、平滑肌細胞、腫瘤細胞等，現在幾乎可對各種細胞進行膜片鉗的研究。對所
膜片鉗操作實驗
運用膜片鉗進行膜離子通道特性的研究，是一項艱辛、細致、繁雜的工作，要求較高的技術水平和實驗條件作保證，現在大致介紹一下膜片鉗實驗的過程，粗略地包括以下幾個方面。?1. 標本制備 根據研究目的的不同，可采用不同的細胞組織，如心肌細胞、平滑肌細胞、腫瘤細胞等，現在幾乎可對各種細胞進行膜片鉗的研究
膜片鉗與植物膜生物學研究
何龍飛1 、2 沈振國1 劉友良1 王愛勤2 (1 南京農業大學農學系,南京210095 2 廣西大學農學院,南寧530004 ) 膜片鉗技術(patch2clamp technique ,PC) 是原西德馬普所Erwin Neher 和Bert Sakmann 于1976 年發明的
腦片膜片鉗實驗方法（五）
(2) 自發性突觸反應的分析 ?突觸反應的檢測 ? 目前有三種方法判斷自發性突觸反應(Hwang，1999)。第一、峰值超過即定閾值，該方法受基線波動的影響較大，這可以通過基線加以彌補；第二、峰值相對于基線的變化量超過閾值，它受高頻噪聲的干擾較大，而且，很難設定一個合適的閾值，為克服這些不足，可以
腦片膜片鉗實驗方法（二）
二、海馬腦片的膜片鉗記錄1、將刺激電極放置在含突觸前纖維腦片區域附近在突觸傳遞的研究中，應該同時記錄突觸前和突觸后神經元的電信號，雖然，并不是所有突觸前神經元胞體的動作電位均可傳導至突觸 (Vincent, 1996)。由于在突觸前和突觸后兩個神經元上同時做膜片鉗記錄較困難，因此，需要用其它的方
腦片膜片鉗實驗方法（四）
5、突觸反應的記錄現在許多實驗室都開始應用膜片鉗技術記錄培養神經元間、組織片中和異體移植組織中的突觸傳遞。與尖電極記錄相比，它具有明顯的優勢。如，記錄的成功率較高，較高的信噪比，能較準確地鉗制胞電位等。膜片鉗甚至可以應用于在位突觸活動的記錄(Covey, 1996)。記錄自發突觸后反應 ? 自發的
膜片鉗實驗系統配置
一個電生理配置有4個主要的需求：環境需求：保持標本的健康的手段。光學需求：顯現標本以供觀察的手段。機械結構需求：穩定定位微電極的手段。電子學需求：放大和測量信號的手段。我們將配置分成兩種類型的“典型”配置：胞外記錄和單通道膜片鉗記錄。胞外記錄的配置該配置主要用于記錄腦片的場電位。一般目標是將一個相對
腦片膜片鉗實驗方法（一）
1966年，Yamamoto和McIlwain首次在腦片上記錄了電生理活動(1966a, b)，證實了腦組織在體外也能存活，并保持很好的活性狀態。此后，該方法在生理學研究中的應用越來越廣泛，并為中樞神經系統生理和藥理學領域突飛猛進的發展奠定了基礎。1989年，Blanton將腦片電生理記錄與細胞
腦片膜片鉗實驗方法（三）
4、突觸反應的判斷及其波幅穩定性的評價突觸信號的判斷 ? 突觸信號樣的假象波有三個來源。第一、鄰近纖維的活動使靜止細胞產生電壓波動；第二、如果恒流刺激強度過大，電流就可被注入突觸后神經元，使其產生失活時間類似EPSP或EPSC的信號，其信號幅度隨刺激強度的變化而變化；第三、直接刺激突觸后神經元誘導
培養細胞膜片鉗記錄實驗
實驗方法原理 培養細胞膜片鉗記錄是在無菌條件下將組織塊經過機械分離和消化酶的處理后分離成單個細胞并在孵箱中培養數天后進行常規膜片鉗記錄的一種方法。細胞原代培養過程與急性分離細胞的過程基本一致，但前者需在無菌條件下進行實驗材料 細胞試劑、試劑盒 細胞培養液一般用F-12medium細胞分離過程用液一般
組織薄片膜片鉗全細胞記錄實驗
實驗方法原理通過全細胞膜片鉗技術來檢測組織薄片（脊髓片或腦片）上神經元的突觸后電位、突觸后電流及該突觸后電位或電流的可塑性改變等現象。組織薄片膜片鉗技術與分散細胞膜片鉗技術相比，具有的優點是組織薄片中的細胞更接近在體的原始環境，很好地保持了神經元之間的突觸聯系。實驗材料神經細胞試劑、試劑盒孵育細胞外
培養細胞膜片鉗記錄實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養細胞膜片鉗記錄是在無菌條件下將組織塊經過機械分離和消化酶的處理后分離成單個細胞并在孵箱中培養數天后進行常規膜片鉗記錄的一種方法。細
實驗室檢驗檢測工具坩堝鉗
坩堝鉗(crucible tongs),一種常見的化學儀器。通常用來夾取坩堝。一般由不銹鋼,或不可燃、難氧化的硬質材料制成。夾持坩堝加熱或從熱源(煤氣燈、電爐、馬福爐、酒精燈)中取、放坩堝。夾持固體物質加熱或燃燒。1.必須使用干凈的坩堝鉗。2.用坩堝鉗夾取灼熱的坩堝時,必須將鉗尖先預熱,以免坩堝因局
培養細胞膜片鉗記錄實驗
實驗方法原理培養細胞膜片鉗記錄是在無菌條件下將組織塊經過機械分離和消化酶的處理后分離成單個細胞并在孵箱中培養數天后進行常規膜片鉗記錄的一種方法。細胞原代培養過程與急性分離細胞的過程基本一致，但前者需在無菌條件下進行實驗材料細胞試劑、試劑盒細胞培養液一般用F-12medium細胞分離過程用液一般用Pu
組織薄片膜片鉗全細胞記錄實驗
實驗方法原理 通過全細胞膜片鉗技術來檢測組織薄片（脊髓片或腦片）上神經元的突觸后電位、突觸后電流及該突觸后電位或電流的可塑性改變等現象。組織薄片膜片鉗技術與分散細胞膜片鉗技術相比，具有的優點是組織薄片中的細胞更接近在體的原始環境，很好地保持了神經元之間的突觸聯系。實驗材料 神經細胞試劑、試劑盒 孵育
組織薄片膜片鉗全細胞記錄實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過全細胞膜片鉗技術來檢測組織薄片（脊髓片或腦片）上神經元的突觸后電位、突觸后電流及該突觸后電位或電流的可塑性改變等現象。組織薄片膜片
鉗形接地雙鉗特性與參數
鉗形接地雙鉗特性與參數 鉗形接地電阻測試儀雙鉗特性 1.雙鉗法/地樁法雙重測量方式： 適合任意接地場所，多點或單點接地，都可正常測試。 2.抗干擾能力強： 自產生高頻電流，從而過濾市電中50HZ、100HZ等諧波干擾電流，即使在500KV變電站環境下，也能測量。
膜片鉗的多種記錄形式：細胞貼附模式、膜內面向外模...
膜片鉗的多種記錄形式：細胞貼附模式、膜內面向外模式、膜外面向外模式和穿孔膜片模式 在膜片鉗技術的發展過程中，主要形成了四種記錄模式，即細胞貼附模式（cell-attached mode或on-cell mode）、膜內面向外模式（inside-out mode）、膜外面向外模式（outsid
什么是全細胞膜片鉗實驗
膜片鉗技術被稱為研究離子通道的“金標準”。是研究離子通道的最重要的技術。目前膜片鉗技術已從常規膜片鉗技術（Conventional patch clamp technique）發展到全自動膜片鉗技術（Automated patch clamp technique）。 傳統膜片鉗技術每次只能記錄
膜片鉗實驗系統震動消除和噪聲消除
震動的消除方法通過仔細的設計，是可以避免震動的危害，例如在半夜的地下室，各種白天的震動都消失了。但預防震動比僅僅靠小心更重要。需要一個用來補償微操縱器的復雜的空氣隔離實驗臺和一個穩定良好設計的微操縱器。微操縱器必須是堅固而緊湊的。因此其移動部分(包括從微操縱器Holder、電極尖端、到chamber
神經組織塊膜片鉗全細胞記錄實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過全細胞膜片技術來檢測神經元興奮性及其放電活動，是電生理實驗的基本方法。神經組織塊膜片鉗技術相對于培養細胞膜片鉗技術而言，細胞更接近