活體成像在過量表達SoCYP85A1基因的應用

黑脛病是煙草生產中危害最大的病害之一。

近期，來自青島農業大學的研究人員從菠菜中克隆了一個新的細胞色素抗性基因SoCYP85A1。該基因在煙草中的過表達顯著增強了煙草對黑脛病的抗性，但不同轉基因株系的抗性水平不同。

在轉基因植株中檢測到油菜素甾酮castasterone (CS) 的大量積累。而且，SoCYP85A1對轉基因株系的抗氧化酶活性也有促進作用。此外，CS含量的變化導致植物內源激素穩態受到干擾。

研究結果表明，SoCYP85A1可以在轉錄水平通過調節防御酶的活性以及與植物內源激素的相互作用，參與煙草對黑脛病菌的防御反應。因此，SoCYP85A1可以作為提高煙草和其他經濟作物對黑脛病抗性的潛在候選基因。

文章以題為: Overexpression of SoCYP85A1 Increase the Accumulation of Castasterone and Confers Enhanced Black Shank Tolerance in Tobacco Through Modulation of the Antioxidant Enzymes' Activites 于3月22日發表在frontiers in Plant Science上。

其中，SoCYP85A1被插入到pB7WG2D,1-GFP作為創建過表達的矢量，T4代轉基因煙草通過PCR和Vilber公司的Newton 7.0 植物活體成像進行了雙重驗證。

FIGURE 1 | Molecular identification of transgenic tobacco lines. (A) PCR analysis of genomic DNA with specific primers for the ORF of SoCYP85A1. (B) GFP analysis of transgenic lines. (C) RT-PCR analysis of WT and different transgenic lines. M, Molecular marker; WT, Wild type; P, Plasmid; 1–8: transgenic lines.

Newton 7.0植物活體成像，除可用于轉基因檢測外，還可以用于微生物侵染，基因表達調控，植物抗逆性研究，突變體篩選，植物發育等相關研究。

主要特點：

1、-90℃深度制冷CCD相機，搭載f0.70超級鏡頭，針對Luc報告基因，具有極高的檢測靈敏度；

2、GFP專用的激發光源和濾光片，有效地避免了葉綠素自發熒光的干擾；

3、雙載物臺設計，可Z軸升降，便于調整視野大小

4、盆栽專用載物臺，可放置不同大小的樣品盆，且可進行多角度旋轉，避免了葉片之間的遮擋，獲得更加理想的結果

5、可直接拍攝彩色圖片，獲得綠色植物原圖，方便進行信號和明場圖像的對比