穩定細胞株構建
穩轉細胞系（穩定表達細胞株）指在細胞中持續穩定表達特定基因或干擾特定基因表達。穩轉細胞株的目的基因質粒DNA整合到細胞染色體上，使細胞長期穩定表達該基因。穩轉細胞株包括多克隆穩轉細胞株和單克隆穩轉細胞株。慢病毒感染目的細胞后，通過抗性基因篩選得到的細胞株是多個細胞克隆的組合。單克隆細胞株是從多克隆細胞中經細胞克隆挑選得到的，由一個細胞擴增得到的細胞株。單克隆細胞株性狀統一，傳代過程中細胞的基因表達保持穩定。 用轉染質粒或病毒侵染的方法將構建好的含靶基因的載體導入細胞，根據不同的基因載體中所含的抗性標志選用相應的藥物進行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎上，得到單細胞長出的陽性單克隆，繼而得到穩定轉染細胞株。常用的真核表達載體的抗性標志物有嘌呤霉素（puromycin）、潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin）。 &......閱讀全文
什么是原代細胞、細胞株、細胞系？
原代細胞(primary cell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞，稱為原代細胞。一般認為，培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代，進
設計“殺手細胞”消滅癌細胞
最近，康奈爾大學的生物醫學工程師，開發出一種專門的白細胞——被稱為“超級自然殺傷細胞”，能夠在淋巴結中找到癌細胞，并只有一個目的：摧毀它們。這一突破可停止癌癥轉移的發生，相關研究結果發表在本月的《Biomaterials》。本文資深作者、生物醫學工程教授Michael R. King說：“我們希
CHL細胞，正常倉鼠肺細胞
污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。2.如果細胞發生微生物污染時，應如何處理？直接滅菌后丟棄之。3.購買之細胞冷凍管經解凍后
關于干細胞的細胞簡介
干細胞（stem cell，SC）的“干”，譯自英文“stem”，意為“莖干”、“干”和“起源”。干細胞群的功能即為控制和維持細胞的再生。一般來說，在干細胞和其終末分化的子代細胞之間存在著被稱為“定向祖細胞”的中間祖細胞群，它們具有有限的擴增能力和限制性分化潛能。這些細胞群的功能是增加干細胞每次
裸細胞的細胞功能簡介
NK細胞能通過ADCC效應定向殺傷與IgG抗體結合的靶細胞，在機體的抗病毒感染和抗腫瘤免疫方面起著較重要的作用。在病毒感染的早期就能殺傷被病毒感染的靶細胞，在抗原特異性Tc細胞尚未形成前就能清除病毒。已發現T細胞和B細胞正常而NK細胞缺陷的個體，對病毒感染特別敏感，易患威脅生命的病毒感染。已知體
細胞診斷、腫瘤細胞分類要訣
細胞診斷要訣 鏡下觀察要周到，每個視野不漏掉； 看完背景看細胞，低倍高倍仔細瞧； 先看形態和大小，核漿比例有多少； 核的結構最重要，核質又多又粗糙； 核膜核仁均異常，病理分裂偶見到； 單個細胞不能斷，足量細胞方有效； 只有成堆無分散，重復檢查再報告。
按細胞比重分離B細胞
按細胞比重分離B細胞1．將2～3ml含3×107純化的B細胞（B細胞>90％）的細胞懸液加到3ml Percoll溶液（比重1.074）上，水平離心1000×g 20分鐘。2．吸去無細胞上清液，交界面的低密度B細胞和大部分Percoll溶液。由于此時細胞沉淀非常松散，需留下約0.2ml Percol
細胞活性檢測Orangu?細胞計數
Orangu?計數法Orangu? solution（Cell Guidance，貨號：OR01-500）是一種無細胞毒性、高靈敏度、比色法，用于測定細胞增殖和細胞毒性的細胞活性試劑。利用WST-8（細胞代謝的一種水溶性的四唑鹽）在細胞內線粒體脫氫酶作為電子介質的情況下，它被還原為橙色的甲瓚染料，且
自然殺傷細胞的細胞來源
NK細胞確切的來源還不十分清楚，一般認為直接從骨髓中衍生，其發育成熟依賴于骨髓的微環境。小鼠和人的體外實驗表明，胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中，占PBMC5～10%，淋巴結和骨髓中也有NK
《細胞》：細胞壞死能夠被控制
美國科學家近日研究發現，破壞一種蠕蟲的SRP-6蛋白能加速其細胞的壞死過程。這一發現有助于科學家更好地理解壞死（necrosis）——細胞死亡的方式之一，并找到對抗相關疾病的方法。相關論文發表在9月21日的《細胞》上。?細胞死亡的方式有多種，細胞凋亡（apoptosis）和壞死是比較典型的兩種。細胞
細胞因子活化免疫細胞
細胞因子腫瘤治療中的另一種方法是通過體外與免疫細胞共育，以使這些細胞活化，然后再回輸入患者體內，進行過繼免疫細胞療法。在這方面研究得最多的是淋巴細胞激活的殺傷細胞（lymphokine activated killercell，LAK）和腫瘤浸潤淋巴細胞（tumor infiltrating l
免疫細胞的免疫細胞種類
T淋巴細胞即胸腺依賴淋巴細胞（thymus dependent lymphocyte）。亦可簡稱T細胞。來源于骨髓的多能干細胞（胚胎期則來源于卵黃囊和肝）。目前認為，在人體胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干細胞或前T細胞遷移到胸腺內，在胸腺激素的誘導下分化成熟，成為具有免疫活性的T細胞。成熟的T細
自然殺傷細胞的細胞表型
人NK細胞mIg-，部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈 (P75,CD122），CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1（見表7-10）。一種穩定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子，1
細胞診斷、腫瘤細胞分類要訣
細胞診斷要訣鏡下觀察要周到，每個視野不漏掉；看完背景看細胞，低倍高倍仔細瞧；先看形態和大小，核漿比例有多少；核的結構最重要，核質又多又粗糙；核膜核仁均異常，病理分裂偶見到；單個細胞不能斷，足量細胞方有效；只有成堆無分散，重復檢查再報告。
細胞因子活化免疫細胞
細胞因子腫瘤治療中的另一種方法是通過體外與免疫細胞共育，以使這些細胞活化，然后再回輸入患者體內，進行過繼免疫細胞療法。在這方面研究得最多的是淋巴細胞激活的殺傷細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞。LAK是從腫瘤患者外周血中分離的單個核細胞，在體與IL-2共育，使之活化并增殖后，回輸入病人體內，可抑制腫瘤生長。
細胞技術專題：細胞傳代實驗
根據細胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代
細胞化學詞匯細胞癌基因
中文名稱：細胞癌基因存在位置：正常的細胞基因組激活前作用：促進正常細胞生長增殖分化和發育激活后作用：使細胞發生惡性轉化定義：存在于正常的細胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進正常細胞生長、增殖、分化和發育等生理功能。細胞癌基因：存在于正常的細胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進正常細
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡，乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此，有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
免疫細胞—肥大細胞
堿性細胞在結締組織和粘膜上皮內時，稱肥大細胞，其結構和功能與嗜堿性細胞相似。 肥大細胞mast cell是和血液的嗜堿粒細胞同樣，具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這種顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質，可在組織內引起速發型過敏反應（炎癥）。由于在
自然殺傷細胞的細胞來源
NK細胞確切的來源還不十分清楚，一般認為直接從骨髓中衍生，其發育成熟依賴于骨髓的微環境。小鼠和人的體外實驗表明，胸腺細胞在體外IL-2等細胞因子存在條件下培養也可誘導出NK細胞。小鼠脾臟在體內IL-3誘導下可促進NK細胞的分化。NK細胞主要分布于外周血中，占PBMC5～10%，淋巴結和骨髓中也有
單細胞研究指南：細胞分離
多細胞生物的每個細胞都攜帶著相同的遺傳學信息。不過，近年來蓬勃發展的單細胞研究告訴我們，每一個細胞都是獨一無二的。不同類型的細胞激活特定組合的機制，即使是同類型細胞，基因表達也會出現差異。 那么，細胞之間的哪些差異有生物學意義，哪些差異來自于技術偏好呢？要獲得可靠的結果又需要研究多少細胞呢？這
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡，乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此，有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
巨噬細胞和粒細胞區別
中性粒細胞和巨噬細胞之間的主要區別在于中性粒細胞不是抗原呈遞細胞，而巨噬細胞是抗原呈遞細胞。?中性粒細胞和巨噬細胞是屬于先天免疫系統的白細胞，它們是抵抗病原體的主要初始防御者。 這些專門的細胞可以在稱為“diapedesis（滲出）”的過程中通過血管的小孔擠壓，終使它們能夠輕松到達感染區域。 通常，
巨噬細胞和單核白細胞
·?????????Lymphocyte Transformation?(Donis-Keller lab)Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from antico
白細胞是免疫細胞嗎？
所有的白細胞均參與免疫應答，它們包括：T細胞、B細胞、自然殺傷細胞、單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、粒細胞、肥大細胞，以及它們的前體細胞（例如胸腺細胞）、祖細胞、干細胞等，是免疫系統的功能單元。根據功能，免疫細胞可分為非特異性免疫細胞、特異性免疫細胞和抗原呈遞細胞。非特異性免疫細胞包括巨噬細胞、中性
懸浮細胞如何去除死細胞
將培養瓶豎立放一段時間（50min左右），然后用吸管輕輕吸取上面1ml的細胞懸液，移入另一個新的已加培基的培養瓶中。或者ficoll分離，就像分離PBMC一樣，先把細胞混勻，然后小心緩慢地把細胞加入到ficol中，1000g離心20分鐘，收集位于ficoll和培養基之間的透明層，即為你的活細胞，這是
組織細胞包括什么細胞？
構成機體的細胞均可以稱之為組織細胞。如表皮細胞、肝臟細胞。朗格漢斯細胞組織細胞增生癥（LCH）是原因未明的單克隆CD1a組織細胞增生性疾病。臨床特點是：發熱，皮疹，齒齦腫脹，咳嗽，喘憋，肝脾淋巴結腫大，或伴有貧血，有的病變侵犯到中樞神經系統，胃腸道系統引起各種癥狀。
細胞計數實驗——細胞計數實驗
實驗方法原理平板菌落計數法是將待測樣品經適當稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個細胞，取一定量的稀釋樣液接種到平板上，經過培養，由每個單細胞牛長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞。統計菌落數，根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數。但是，由于待測樣品往往不易
關于宿主細胞的細胞介紹
受體細胞也叫宿主細胞。受體細胞有原核受體細胞(最主要是大腸桿菌)、真核受體細胞(最主要是酵母菌)、動物細胞和昆蟲細胞(其實也是真核受體細胞)。原核受體細胞中,最常用的宿主細胞是大腸桿菌。
細胞成團和細胞出芽實驗
近幾年來，3D（three?dimensional）細胞培養系統開始成為生物學研究新的研究方法。使用3D系統培養系統能更好的模擬生物體內的真實生理環境，而2D（傳統的貼壁培養）細胞培養系統不能有效的模擬細胞在生物體內的生理環境。3D細胞技術有很多種方法，使用多細胞形成的細胞團是其中主要的研究應用之一