免疫印跡的基本原理
將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然后取固定化基質膜與凝膠相貼。在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下, 使凝膠中的單一抗原組份轉移到印跡紙上, 并且固相化。最后應用免疫覆蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等, 對抗原固定化基質膜進行檢測和分析。......閱讀全文
免疫印跡的基本原理
將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然后取固定化基質膜與凝膠相貼。在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下, 使凝膠中的單一抗原組份轉移到印跡紙上, 并且固相化。最后應用免疫覆蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等, 對抗原固定化基質膜進行檢測和分析。
免疫印跡的基本原理
將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然后取固定化基質膜與凝膠相貼。在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下, 使凝膠中的單一抗原組份轉移到印跡紙上, 并且固相化。最后應用免疫覆蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等, 對抗原固定化基質膜進行檢測和分析。
免疫印跡法的基本原理
與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學
免疫印跡的基本原理和步驟
基本原理 將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然后取固定化基質膜與凝膠相貼。在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下, 使凝膠中的單一抗原組份轉移到印跡紙上, 并且固相化。最后應用免疫覆蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等, 對抗原固定化基質膜進行檢測和分析。 基本步驟
免疫印跡法的基本原理介紹
與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生
免疫印跡的基本原理、實驗步驟及FAQ
01基本原理免疫印跡(Western Blot) 采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。SDS-PAGE 可對蛋白質樣品進行分離,轉移到固相載體——例如硝酸纖維素薄膜(NC)上。固相載體可以吸附蛋白質,并保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。
Southern印跡法的基本原理
Southernblot的基本原理是:硝酸纖維膜或尼龍濾膜對單鏈DNA的吸附能力很強,當電泳后凝膠經過DNA變性處理,覆以上述濾膜,再于其上方壓上多層干燥的吸水紙,借助它對深鹽溶液的上吸作用,凝膠上的單鏈DNA將轉移到濾膜上。轉移是原位的,即DNA片段的位置保持不變。轉移結束后,經過80℃烘烤的
DNA印跡法的基本原理
這種方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA轉移的方式和復印的過程一樣,比較準確地保持了特異DNA順序在電泳圖譜中的位置,也可將變性的凝膠負壓干燥后與特定的DNA探針進行原位雜交。它把電泳分離和雜交結合起來,不但能檢測出特異的DNA序列片段,而且能進行定位和測定分子量。即先以
免疫印跡的優點
免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優點:1、 濕的固定化基質膜柔韌, 易于操作;2 、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔;3、 免疫印跡分析只需少量試劑;4、 孵育、洗滌的時間明顯減短;5、可同時制作多個拷貝, 用于多種分析和鑒定;6、結果以圖譜形
免疫印跡優點
免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優點: 1、 濕的固定化基質膜柔韌, 易于操作; 2 、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔; 3、 免疫印跡分析只需少量試劑; 4、 孵育、洗滌的時間明顯減短; 5、可同時制作多個拷貝, 用于多種分析
Western免疫印跡
?Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理????與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝
Western-免疫印跡
實驗概要Western免疫印跡(Western ? Blotting)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。與Southern或Northern雜交方法類似,但Western ? Blot采用的是聚丙烯
免疫印跡法
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
免疫印跡定義
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏
印跡法的基本原理及應用
印跡法(blotting)即轉移電泳,是20世紀70年代發展起來的一種新方法。Southern于1975年建立了檢測特異DNA片段的DNA-RNA雜交法,稱作Southern印跡法。1977年Alwine等把此方法應用到RNA的研究方面,稱作Nouthern印跡法。1979年Towbin等則把該方法
免疫印跡與免疫檢測
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 轉移緩沖液儀器、耗材 搖床海綿纖維素膜尼龍膜電轉儀實驗步驟 1. ?制備抗原樣品,并用小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠分離蛋白,在一個或多個泳道中分離預染色或生物素酰化的蛋白質分子量標準。2. ?電泳完成后,拆卸凝膠夾層,去除積層膠。以適量的轉移緩沖液室溫平衡凝膠30 m
免疫印跡(Wb)的原理
(1)是一種蛋白質測定的技術,集合凝膠電泳的高分辨率,固定免疫測定的敏感及特異性和不需要對靶蛋白進行放射性核素標記,在固相膜上保持的時間很長等優點。(2)可以在樣本中檢測到微量到微量的抗原,以及在多克隆抗體中檢測到單克隆抗體,還可以對已經轉移到固相膜上面的蛋白質進行連續的分析。
Western免疫印跡的原理
與Southern或Northern雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物
免疫印跡法的階段
免疫印跡法分三個階段進行.第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶陰電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳動速度就越快.此階段分離效果肉眼不可見(只有在染色后才顯出電泳區帶).第二階段為電轉移:將在凝膠中已經分離的條帶轉移至硝酸纖維素
免疫印跡的基本步驟
免疫印跡法( 以抗原分析為例)基本上可分為抗原分離、抗原印跡和抗原檢定三個步驟。在每一步中因采用的具體實驗方法不同, 可構成多種免疫印跡分析系統。
免疫印跡的基本步驟
免疫印跡法( 以抗原分析為例)基本上可分為抗原分離、抗原印跡和抗原檢定三個步驟。在每一步中因采用的具體實驗方法不同, 可構成多種免疫印跡分析系統。
免疫印跡法過程
免疫印跡法 是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 1、SDS-PAGE試劑:見電泳實驗。2、勻漿緩沖液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巰基乙醇 0
什么是免疫印跡?
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏
印跡法(blotting)基本原理和應用
印跡法(blotting)即轉移電泳,是20世紀70年代發展起來的一種新方法。Southern于1975年建立了檢測特異DNA片段的DNA- RNA雜交法,稱作Southern印跡法。1977年Alwine等把此方法應用到RNA的研究方面,稱作Nouthern印跡法。1979年Towbin等則把
免疫酶染色試驗_免疫印跡法
免疫印跡法 (以檢測流行性出血熱病毒結構蛋白和 NP 核蛋白為例說明)實驗方法原理免疫印跡法 是將電泳與免疫酶染色結合起來的一種方法。它先經電泳 (SDS--PAGE)將病毒結構蛋白進行分離,通過轉印將被分離的各區帶原位轉移到硝酸纖維素膜 (nitrocellulose membrane, NC 膜
免疫印跡的技術優勢
免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優點:1、 濕的固定化基質膜柔韌, 易于操作;2 、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔;3、 免疫印跡分析只需少量試劑;4、 孵育、洗滌的時間明顯減短;5、可同時制作多個拷貝, 用于多種分析和鑒定;6、結果以圖譜形
反向免疫印跡的方法介紹
中文名稱反向免疫印跡英文名稱reverse immunoblotting定 義一種用于分析抗體反應克隆性質的技術。即用等電聚焦法分離待測樣品中各組分,再以電泳法轉印至硝酸纖維素薄膜或其他材料上,加入同位素標記的抗原共溫育,反應后用酶標記抗體與之結合,從而判定與之起反應的克隆性質和數量。應用學科免疫
免疫印跡法的檢測原理
免疫印跡法是在蛋白質電泳分離和抗原抗體檢測的基礎上發展起來的一項檢測蛋白質的技術,它將SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨力與抗原抗體反應的高特異性相結合。第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶負電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳
免疫印跡法和免疫捕獲法的區別
免疫印跡實驗和酶聯免疫的區別如下:免疫印記一般是要把檢測的樣品轉到膜上,再用抗體檢測酶聯免疫一般是把抗體固定在支持物上,再與要檢測的樣品反應,目標物就會與抗體結合而留在支持物上。WB所檢測的一般是抗原,而Elisa抗原抗體都可以檢測。WB只能用抗體去檢測你的蛋白樣品。ELISA可以固定抗原也可以固定