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  • 成骨細胞的體外培養

    成骨細胞的來源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外組織。及人的胚胎顱骨或新生動物的顱骨為成骨細胞的常用來源。Robey(1985)采用膠原酶處理松質骨骨塊以除去結締組織和骨髓造血組織,再將處理過的骨塊進行培養來獲得更純凈的成骨細胞。將人胚胎顱骨中所獲得的成纖維樣細胞通過加入β-甘油磷酸鈉誘導分化后培養3周,可見細胞基質鈣化,表明所得細胞為具有很強分化能力的成骨細胞。將以乙二胺四乙酸和膠原酶消化胎兒顱骨獲得的細胞進行體外培養,發現其在人工材料上能持續增殖20倍以上,且具有高ALP活性。取人松質骨建立成骨細胞體外培養模型并得到了大量純化的成骨細胞。選用成年雌性大鼠松質骨在較短時間內得到較多數量的成骨細胞。骨膜中的細胞早已被證實在適當的條件下可形成骨和軟骨。Vacanti等(1993)從新生小牛肩胛骨骨膜中分離出成骨細胞并種植到多孔聚羥乙酸支架上,7~10d后成骨細胞發生增殖。 用膠原酶短時預消化法從取自新西蘭兔脛骨上端內側面骨膜上短時間......閱讀全文

    成骨細胞的體外培養

      成骨細胞的來源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外組織。及人的胚胎顱骨或新生動物的顱骨為成骨細胞的常用來源。Robey(1985)采用膠原酶處理松質骨骨塊以除去結締組織和骨髓造血組織,再將處理過的骨塊進行培養來獲得更純凈的成骨細胞。將人胚胎顱骨中所獲得的成纖維樣細胞通過加入β-甘油磷酸鈉誘導分化后培養3周

    成骨細胞原代培養

    實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養液培養。試劑、試劑盒 Hams F12 培養液用于細胞傳代

    成骨細胞原代培養實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養

    成骨細胞原代培養實驗

    實驗方法原理采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時,將松質骨切成 2~5 mm 大小,用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶,用 F12 培養液培養。?實驗材料骨標本試劑、試劑盒Hams F12 培養液

    成骨細胞原代培養實驗

    成骨細胞原代培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用植塊培養方法時,用少量培養液孵育,使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時

    體外培養的概念

    中文名稱體外培養英文名稱in vitro culture定  義將活體結構成分(如活體組織、活體細胞、活體器官等)甚至活的個體從體內或其寄生體內取出,置于類似于體內生存環境的體外環境中生長和發育的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)

    細胞培養體外培養的概念

      體外培養(in vitro culture),就是將活體結構成分或活的個體從體內或其寄生體內取出,放在類似于體內生存環境的體外環境中,讓其生長和發育的方法。  ●組織培養:是指從生物體內取出活的組織(多指組織塊)在體外進行培養的方法。  ●細胞培養:是指將活細胞(尤其是分散的細胞)在體外進行培養

    正常骨內成骨細胞原代培養

    實驗材料:1. 骨組織來源:新生或胚胎大鼠、兔、人類胚胎或手術切除之骨組織;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅡ型膠原酶溶液;4. 培養液:RPMI 1640培養基,配制培養液

    大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗

    酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠

    大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗

    酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠

    大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗

    大鼠乳鼠成骨細胞培養培養可以:(1)獲得大鼠乳鼠成骨細胞;(2)用于骨修復的細胞學機制研究。實驗方法酶消化法實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快

    體外培養細胞的分類

    .貼附型這類腫瘤細胞在培養時,能貼附在支持物表面生長。大多數培養細胞呈貼附型生長;只賴于貼附才能生長的細胞稱貼附型細胞或錨著依存型細胞。關于細胞的貼附過程和機制將另加敘述。當單細胞貼附在支持物上后,易失去它們在體內時原有的特征,細胞分化現象常變得不顯著。在形態上常表現單一化的現象,并常反映其胚層起源

    體外培養細胞的形態特征

    體外培養細胞根據它們在培養器皿是否能貼附于支持物上生長特征,可分為貼附型生長和懸浮型生長兩大類。貼附型細胞在培養時能貼附在支技物表面生長。如羊水細胞為貼附型細胞,常表現為成纖維型細胞和上皮細胞生長。懸浮型細胞在培養中懸浮生長。1、成纖維型細胞在培養中的細胞凡形態與成纖維細胞類似時,皆可稱之為成纖維細

    正常人骨膜內成骨細胞原代培養

    正常人骨膜內成骨細胞原代培養實驗材料:1.?骨組織來源:手術切除之骨組織;2.?清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.?消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型膠原酶溶液;4.?培養液:RPMI?1640培養基,配制培

    正常人骨膜內成骨細胞原代培養

    實驗材料:骨組織來源:手術切除之骨組織;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅠ型膠原酶溶液;4. 培養液:RPMI 1640培養基,配制培養液時加入15%的小牛血清,并用

    MSCs分化為礦化的成骨細胞(細胞培養1)

    MSCs分化為礦化的成骨細胞 試劑和材料:完全培養基(CCM):α-MEM:α-低限量基礎培養基,含谷氨酰胺,無核苷酸或脫氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經F雜交瘤純化,非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。過濾除菌。儲存于4℃,不超過2周;2.DM

    細胞體外培養的污染原因

    1、外源性污染外源性污染中應注意實驗室內空氣保持潔凈,定期清掃、紫外消毒,操作者嚴格按照無菌操作進行。由于離體細胞對各種毒物都很敏感,所以細胞培養所用器材的清洗、消毒處理非常關鍵。培養所用的物品器具要徹底清洗消毒,超凈臺的物品擺放要井然有序,避免反復燒烤已經高溫滅菌的物品以及避免因細胞株種類過多而引

    簡述體外培養細胞的形態特征

    體外培養細胞根據它們在培養器皿是否能貼附于支持物上生長特征,可分為貼附型生長和懸浮型生長兩大類。貼附型細胞在培養時能貼附在支技物表面生長。如羊水細胞為貼附型細胞,常表現為成纖維型細胞和上皮細胞生長。懸浮型細胞在培養中懸浮生長。1、成纖維型細胞在培養中的細胞凡形態與成纖維細胞類似時,皆可稱之為成纖維細

    大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗_酶消化法

    大鼠乳鼠成骨細胞培養培養用于:(1)獲得大鼠乳鼠成骨細胞;(2)骨修復的細胞學機制研究。實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快速的細胞原代分離培養

    體外培養的原代細胞是如何進行培養的

    體外培養的原代細胞是如何進行培養的,如果我們在進行體外培養,則就是一個原代細胞劃細胞植株要要體外進行一個持續性的培養,則就是必須進行傳代。這樣方便于獲得穩定的細胞植株或是大量的同種細胞,同時還可以維持細胞的種類的一個延續,傳代培養的累計次數則就是細胞的代數。同時對于不同的動物與人的正常細胞在體外培養

    成骨細胞的特征

    骨表面被一由成骨前體細胞形成的包膜所覆蓋,表現為骨外膜、骨內膜和哈佛管內膜。這些細胞可分化為成骨細胞合成骨基質,除合成骨基質外,還有一種引起骨質礦化和調節細胞外液和骨液(bone fluid)間電解質流動的作用。一個成骨細胞在3~4d內可分泌其三倍體積的基質,然后自身埋于其中,即變為骨細胞。成骨細胞

    體外培養細胞包括了什么

    在這里對于體外培養細胞所有情況則包括了初代培養與各種細胞系的培養,則就是說當體外培養細胞生長達到一定的密度后,則都是需要進行傳代處理的。而在這里我們所說的傳代的頻率與培養液體的性能性質,以及接種的細胞數量與增殖速度是相關的。這就是說接種的細胞數量越大則細胞基數就越大,而在相同的增殖速度下細胞數量增加

    體外培養貼壁細胞特點

    貼附并伸展,是多數體外培養細胞的基本生長特點。細胞貼壁的過程使形態發生很大變化,細胞形態改變是細胞內骨架(真核細胞中的蛋白纖維網架體系,由微管、微絲及中間纖維組成的體系)本身和細胞外基質共同作用的結果。培養細胞在未貼附于底物之前一般均似球體樣,當與底物貼附后,細胞將逐漸伸展而形成一定的形態,呈成纖維

    原代細胞體外培養現狀

      原代細胞自然生長有兩種方式,錨定依賴或非錨定依賴,這主要取決于它們在體內的組織來源:外周血(非錨定依賴)或固體組織器官(錨定依賴)。原代細胞一旦分離后,24-48h內需要進行貼壁或起始,開始培養。  廣義地說,所有的哺乳動物細胞,無論其類型或來源,都需要在與人類生理條件(即37°C,5%CO2)

    兔成骨細胞與骨髓基質干細胞混合培養的實驗研究

    對骨髓基質干細胞進行改造,使其在保持快速生長的同時向成骨細胞方向分化是目前國內外研究的熱點。實驗發現,成熟的成骨細胞可以通過細胞間的直接接觸作用促進骨髓基質干細胞增殖[ 1 ] ,此外成骨細胞可產生多種生長因子促進其骨髓基質干細胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基質干細胞通過誘導向成骨細胞分化后,

    體外培養細胞培養基的基本要求

    體外培養的細胞直接生活在培養基中,因此培養基應能滿足細胞對營養成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。 一、營養成分 維持細胞生長的營養條件一般包括以下幾個方面: 1.氨基酸:是細胞合成蛋白質的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組

    體內組織細胞的體外培養1

    體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:一、上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別

    體內組織細胞的體外培養2

    培養方法如下:1、從手術室無菌取腦髓灰質或白質后,仔細剝除腦膜、血管和纖維成分,置Hanks液中漂洗一、二次。2、置于30―50倍體積的Hanks液中,此時腦組織比較柔軟,反復吹打即制成細胞懸液。3、把懸液注入離心管室溫中直立5-10分鐘后,細胞或細胞團快自然下沉,脂肪等雜物易漂浮,可吸除上層、反復

    細胞體外培養的三大污染

    細胞培養技術是離體方法中主要的一種,是從動物體內取出細胞,模擬體內的生理環境,在無菌、適溫、豐富的營養條件下,使離體細胞生存、生長并維持結構和功能的一門技術。細胞實驗是科學探究的基礎,細胞實驗服務可以提供包括細胞侵襲檢測、細胞劃痕檢測以及細胞增殖實驗等的研究。細胞體外培養實驗對于科學研究至關重要,然

    NK細胞體外培養方法之純因子培養

    關于NK細胞培養,也許您還在疑惑為什么細胞培養到后期生長緩慢?為什么細胞擴增狀態不理想?培養過程中補液標準判斷的依據是什么?為了解決實驗中遇到的種種問題,減少摸索的苦惱,我們特地為大家精心準備了NK試劑盒教學視頻以及實驗操作要點等,有了這篇干貨,相信大家就能輕松搞定實驗中的疑難雜癥。視頻已備好,快識

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