消減雜交的概念和意義
消減雜交(subtractive hybridization,扣除雜交) 是指利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。是差別雜交的改進,用過量的參照細胞的mRNA 或CDNA 與目的細胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 雜交,形成的RNA CDNA 雜交體是兩種細胞共有的,將其扣除。剩下的CDNA 或mRNA 可以標記成消減探針,并從CDNA文庫中篩選目的克隆,可構建消減文庫(subtractive libiary)。......閱讀全文
消減雜交的概念和意義
消減雜交(subtractive hybridization,扣除雜交) 是指利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。是差別雜交的改進,用過量的參照細胞的mRNA 或CDNA 與目的細胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 雜交,形成的R
抑制消減雜交的概念和意義
抑制消減雜交(suppression subtractive hybridization,SSH) 是建立在抑制PCR 與消運用雜交二級動力學原理,減雜交技術相結合的基礎上的更簡單快速的分離差異基因的方法。即豐度高的單鏈DNA 在退火時產生同源雜交的速度快于豐度低的單鏈DNA,使原來在豐度上有差別的
核酸雜交的概念和意義
核酸雜交(Hybridization): 互補的核苷酸序列(DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA等)通過Watson-Crick堿基配對形成非共價鍵,從而形成穩定的同源或異源雙鏈分子的過程,稱為核酸分子雜交技術,又稱核酸雜交。
消減雜交的方法和應用介紹
中文名稱消減雜交英文名稱subtracting hybridization定 義利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。一般是將一種細胞的互補DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)與第二種細胞cDNA或mRNA相互雜交,其不被雜交
消減雜交實驗
試劑、試劑盒 稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 雜交緩沖儲存液:4mol/L NaC
消減雜交實驗
試劑、試劑盒稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸儀器、耗材熱循環儀實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 雜交緩沖儲存液:4mol/L NaCl,2
消減雜交實驗
消減雜交實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 稀釋緩沖液 雜交緩沖儲存液 基三乙基溴化銨 礦
消減雜交的定義
利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。一般是將一種細胞的互補DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)與第二種細胞cDNA或mRNA相互雜交,其不被雜交的部分就代表了兩種細胞基因表達的差異,可用于差異表達基因的克隆。差示篩選、消減探針
阻抑消減雜交的方法和應用介紹
中文名稱阻抑消減雜交英文名稱suppressive subtraction hybridization;SSH定 義將阻抑性聚合酶鏈反應與消減雜交相結合的實驗方法,能有效地擴增低豐度的差異基因表達序列。一般是將目標互補DNA(cDNA)5′端分別加上兩種人工接頭,用過量的驅動DNA進行兩次雜交,得
核酸雜交的概念和發生條件
具有互補序列的不同來源的單鏈核酸分子,按堿基配對原則結合在一起稱為核酸雜交(hybridization)。雜交可發生在DNA-DNA、RNA-RNA和DNA-RNA之間。雜交是分子生物學研究中常用的技術之一,利用它可以分析基因組織的結構,定位和基因表達等,常用的雜交方法有Southern印跡法,No
SSH抑制性消減雜交文庫構建方法介紹
SSH是一項可以快速獲取兩個不同生物材料中差異表達基因的分子生物學技術,是快速篩選差異表達基因的有效方法,也是尋找新基因的重要手段。該技術尤其適合以genome尚不完全清晰的物種或者以特殊材料為研究對象的科研工作者。是基因芯片技術的有效補充。基本流程:通過差減文庫構建,文庫驗證和篩選(逆向斑點雜交)
簡化抑制消減雜交(SSH)法尋找差異表達基因
? 無論是從一個胚胎細胞分化為不同的組織器官,或者是從正常的組織突變為腫瘤組織,都可能涉及在同一基因組背景下不同基因的差異性表達。尋找差異表達的基因就有可能揭示細胞分化的機制或者腫瘤的成因,因而也就成為一項熱門的技術。??? 尋找差異表達的基因有不少方法,抑制消減雜交(SSH)是比較有效的一種方法。
血型的概念和意義
血型(blood groups;blood types)是以血液抗原形式表現出來的一種遺傳性狀。狹義地講,血型專指紅細胞抗原在個體間的差異;但現已知道除紅細胞外,在白細胞、血小板乃至某些血漿蛋白,個體之間也存在著抗原差異。?因此,廣義的血型應包括血液各成分的抗原在個體間出現的差異。通常人們對血型的了
消減探針的原理和應用
中文名稱消減探針英文名稱subtracted probe定 義經過消減雜交所構建的互補DNA探針。即將一種細胞或組織的全部信使核糖核酸(mRNA)逆轉錄合成單鏈cDNA,再與第二種細胞(不同類型或不同狀態下的細胞)過量的mRNA或cDNA雜交,留下第一種細胞cDNA未被雜交的部分,制備成標記探針,
雜交探針的概念
雜交探針是一小段單鏈DNA片段(十幾到幾百個堿基),用于檢測與其互補的核酸序列。
分子雜交的概念和基本原理
一、分子雜交的概念:?分子雜交(molecular hybridization)指具有一定同源序列的兩條核酸單鏈(DNA或RNA),在一定條件下按堿基互補配對原則經過退火處理,形成異質雙鏈的過程。? 利用這一原理,就可以使用已知序列的單鏈核酸片段作為探針,去查找各種不同來源的基因組DNA分子中的同源
?-熒光原位雜交的原理和意義
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
原位雜交的技術原理和意義
原位雜交:在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應用帶有標記的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質)DNA或RNA
免疫接種的概念和意義
免疫接種(immunization)是用人工方法將免疫原或免疫效應物質輸入到機體內,使機體通過人工自動免疫或人工被動免疫的方法獲得防治某種傳染病的能力。用于免疫接種的免疫原(即特異性抗原)、免疫效應物質(即特異性抗體)等皆屬生物制品。
免疫接種的概念和意義
免疫接種(immunization)是用人工方法將免疫原或免疫效應物質輸入到機體內,使機體通過人工自動免疫或人工被動免疫的方法獲得防治某種傳染病的能力。用于免疫接種的免疫原(即特異性抗原)、免疫效應物質(即特異性抗體)等皆屬生物制品。
再結晶的概念和意義
再結晶,是指固態金屬與合金內沒有相變的結晶過程,也就是使加工硬化的金屬與合金不經過相變進行軟化的過程。金屬或者合金由于冷加工變形,使晶格發生歪扭,晶粒破碎,產生較大內應力,產生較大加工硬化。將其加熱到適當的溫度并保溫,金屬與合金內部將進行重新形核和晶核長大,獲得沒有內應力和加工硬化的組織。
氮平衡的概念和意義
氮平衡(nitrogen balance)是指氮的攝入量與排出量之間的平衡狀態。它是反映機體攝入氮和排出氮之間的關系。氮平衡包括零氮平衡、正氮平衡和負氮平衡三種情況。根據蛋白質元素組成中氮含量比較恒定(約16%),且食物和排泄物中含氮物質大部分來源于蛋白質,通過測定測定攝人食物的含氮量(攝入氮)和尿
滲透作用的概念和意義
滲透作用(Osmosis)指兩種不同濃度的溶液隔以半透膜(允許溶劑分子通過,不允許溶質分子通過的膜),水分子或其它溶劑分子從低濃度的溶液通過半透膜進入高濃度溶液中的現象。或水分子從水勢高的一方通過半透膜向水勢低的一方移動的現象。
細胞分化的概念和意義
細胞分化(英語:cellular differentiation),是發育生物學的研究課題之一,指的是在多細胞生物中,一個干細胞在分裂的時候,其子細胞的基因表達受到調控,例如DNA甲基化,變成不同細胞類型的過程。類如全能(totipotent)的受精卵在分裂到一定程度時,其子細胞就會開始向特定的方向
基因測序的概念和意義
基因測序是一種新型基因檢測技術,能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列,預測罹患多種疾病的可能性,個體的行為特征及行為合理。基因測序技術能鎖定個人病變基因,提前預防和治療。基因測序相關產品和技術已由實驗室研究演變到臨床使用,可以說基因測序技術是下一個改變世界的技術。
孔隙度的概念和意義
孔隙度是指巖樣中所有孔隙空間體積之和與該巖樣體積的比值,稱為該巖石的總孔隙度,以百分數表示。儲集層的總孔隙度越大,說明巖石中孔隙空間越大。從實用出發,只有那些互相連通的孔隙才有實際意義,因為它們不僅能儲存油氣,而且可以允許油氣在其中滲濾。因此在生產實踐中,提出看了有效孔隙度的概念。有效孔隙度是指那些
雜交嚴格性的概念
中文名稱雜交嚴格性英文名稱hybridization stringency定 義核酸分子雜交條件設置的高低。其設置主要看雜交鏈的長度和同源性。同源程度越高,雜交條件就可越嚴格。雜交嚴格性的控制主要參數是雜交液的溫度、鹽濃度、變性劑和pH等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級
核酸分子雜交的概念
核酸分子雜交(簡稱雜交,hybridization)是核酸研究中一項最基本的實驗技術。互補的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對形成穩定的雜合雙鏈DNA或RNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。
DNA雜交的意義
分類學上不同物種的DNA分子之間可以進行分子雜交,但是,遠緣物種的DNA分子之間進行雜交分子的可能性遠比近緣物種的要小得多。例如,細菌與真核細胞DNA分子之間形成雜交分子的可能性很小;不同細菌的 DNA分子之間雜交時,能形成某些互補片段;人的DNA分子與小鼠的 DNA分子之間雜交時,只有少量的人
DNA雜交的意義
分類學上不同物種的DNA分子之間可以進行分子雜交,但是,遠緣物種的DNA分子之間進行雜交分子的可能性遠比近緣物種的要小得多。例如,細菌與真核細胞DNA分子之間形成雜交分子的可能性很小;不同細菌的 DNA分子之間雜交時,能形成某些互補片段;人的DNA分子與小鼠的 DNA分子之間雜交時,只有少量的人DN