DNA聚合酶及其應用
（一）大腸桿菌DNA聚合酶I是Kornberg A. 1956年首先從大腸桿菌E。Coli 細胞中分離出來的。它是一種多功能性的酶，包括 3種不同的酶活力：5′→ 3′聚合酶活性（模板， 帶3′－OH游離基團的引物、4dNTPs、 Mg2+ ）。雙鏈特異性的5'→3'核酸外切酶活性。3'→5'核酸外切酶活性。從游離的雙鏈或單鏈DNA的3′端降解。不過對于雙鏈的降解可被5′-3′的多聚活性所抑制。主要是校正作用。大腸桿菌DNA聚合酶I 的三種用途1.利用缺口轉移法制備高比活度的DNA探針利用其5′--3′的外切酶活性及其聚合酶活性。2.用于DNA連接前的大缺口填充利用5′--3′的聚合酶活性。3.用于DNA的序列分析利用5′--3′的聚合酶活性。（二）Klenow片段酶Klenow片段是大腸桿菌聚合酶 I 全酶經枯草桿菌蛋白酶處理后產生的大片段酶分子，分子量為76KD 。酶催活性：⑴5’ →3’ 的......閱讀全文
人端粒酶(TE)酶聯免疫說明
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：???????????????????????????????????????????????????????? ?96T1 IU/L -40 IU/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中端粒酶(TE)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中
乳酸脫氫酶及其同工酶簡介
乳酸脫氫酶（LD）分子量為135～140KD，由兩種亞單位組成：H（表示heart）和M（表示muscle）。它們按不同的形式排列組合形成含4個亞基的5種同工酶，即：LD1（H4）、LD2（H3M1）、LD3（H2M2）、LD4（HM3）、LD5（M4）。 LD催化丙酮酸與乳酸之間還原與氧化反
免疫酶技術中常用的酶底物系統
各種免疫酶技術,最終都是以某種顯色反應而揭示待測物質來進行定性和定量分析。不同酶要選擇相應的底物,見下表。免疫酶技術中常用的酶-底物系統酶底物顯色反應測定波長/nm辣根過氧化物酶二氨基聯苯胺深褐色沉淀5-氨基水楊酸棕色449鄰苯二胺橘紅色492/460鄰聯甲苯胺藍色4254-硝基酚磷酸黃色400堿性
木瓜蛋白酶的酶活測定
一、基本原理 木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（底物）水解而釋出N-苯甲酰-L-精氨酸，其釋出量可用氫氧化鈉液滴定，以此確定酶活力。 酶活單位 在25℃下，每分鐘內能催化分解1umol底物的酶量，稱為1單位。 二、試液制備 1、底物溶液：準確稱取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽
精氨酸酶的酶活性單位定義
酶活性單位定義：在pH值9.5，37℃、1min內轉換1.0μmol?L-精氨酸成為L-鳥氨酸和尿素的酶量為一個活力單位。在有尿素循環(urea cycle)的人和哺乳動物體內才存在精氨酸酶，它的作用是體內尿素從精氨酸上水解下來，并生成L-鳥氨酸，這反應通常發生在肝臟細胞的胞液中。
腺苷三磷酸酶（ATP酶）的簡介
ATP是三磷酸腺苷的英文縮寫符號，它是各種活細胞內普遍存在的一種高能磷酸化合物。高能磷酸化合物是指水解時釋放的能量在20.92kJ/mol(千焦每摩爾)以上的磷酸化合物，ATP水解時釋放的能量高達30.54kJ/mol。ATP的分子式可以簡寫成A-P～P～P。簡式中的A代表腺苷，P代表磷酸基團，
有關固定化酶技術酶的定向介紹
1、共價固定法 選擇性地利用酶分子表面遠離活性位點的特定稀有基團(如巰基) 進行反應，使該基團與載體上另一基團共價交聯來固定酶蛋白，使其活性中心朝向溶液方向，以達到控制其空間取向的目的。 2、氨基酸置換法 利用基因定點突變技術在蛋白質分子表面合適位置置換一個氨基酸分子，通過該氨基酸殘基特殊
淀粉酶同工酶檢測的意義
同工酶的測定有助于疾病的鑒別診斷。P－同工酶升高或降低時，說明可能有胰腺疾患；S－同工酶的變化可能是源于唾液腺或其他組織。當血清淀粉酶活性升高而又診斷不清時，應進一步測定同工酶以助鑒別診斷。瓊脂糖和醋纖膜電泳法是比較常用的測定同工酶方法。
蛋白酶的按酶的來源分類
按酶的來源可以分為動物蛋白酶、植物蛋白酶、微生物蛋白酶。
木瓜蛋白酶的酶活測定
基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯（底物）水解而釋出N-苯甲酰-L-精氨酸，其釋出量可用氫氧化鈉液滴定，以此確定酶活力。酶活單位在25℃下，每分鐘內能催化分解1umol底物的酶量，稱為1單位。試液制備1、底物溶液：準確稱取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽1.42g，加10mmol/LE
植物蛋白酶關于酶的定義
酶（enzyme）催化特定化學反應的蛋白質、RNA或其復合體。是生物催化劑，能通過降低反應的活化能加快反應速度，但不改變反應的平衡點。絕大多數酶的化學本質是蛋白質。具有催化效率高、專一性強、作用條件溫和等特點。酶參與人體所有的生命活動：比如思考，運動，睡眠，呼吸，憤怒，喜悅或者分泌荷爾蒙等都是以
有關固定化酶技術酶的定向介紹
1、共價固定法 選擇性地利用酶分子表面遠離活性位點的特定稀有基團(如巰基) 進行反應，使該基團與載體上另一基團共價交聯來固定酶蛋白，使其活性中心朝向溶液方向，以達到控制其空間取向的目的。 2、氨基酸置換法 利用基因定點突變技術在蛋白質分子表面合適位置置換一個氨基酸分子，通過該氨基酸殘基特殊
生物酶學基礎糖化酶簡介
概述：糖化酶是由曲霉優良菌種（Aspergilusniger）經深層發酵 提煉而成。糖化酶，又稱葡萄糖淀粉酶[Glucoamylase,(EC.3.2.1.3.)]它能把淀粉從非還原性未端水介a-1.4葡萄糖苷鍵產生葡 萄糖，也能緩慢水解a-1.6葡萄糖苷鍵，轉化為葡萄糖。本產品廣泛用于生產白酒、黃
關于工具酶的連接酶的介紹
它是一種封閉DNA鏈上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA鏈的5'-PO4與另一DNA鏈的3'-OH生成磷酸二酯鍵。但這兩條鏈必須是與同一條互補鏈配對結合的(T4DNA連接酶除外)，而且必須是兩條緊鄰DNA鏈才能被DNA連接酶催化成磷酸二酯鍵。 連接酶有T4噬菌體
可以DNA結合的酶DNA連接酶
DNA連接酶：是能夠使用來自ATP或NAD的化學能將先前切割或斷裂的DNA鏈聚集在一起的酶。連接酶在DNA滯后鏈復制中特別重要，因為它們將岡崎碎片組合成DNA鏈。連接酶在DNA修復和基因重組中也發揮重要作用。
什么是酶？酶的作用是什么？
酶(enzyme)是由活細胞產生的、對其底物具有高度特異性和高度催化效能的蛋白質或RNA。酶是一類極為重要的生物催化劑(biocatalyst)。由于酶的作用,生物體內的化學反應在極為溫和的條件下也能高效和特異地進行。?酶的催化作用有賴于酶分子的一級結構及空間結構的完整。若酶分子變性或亞基解聚均可導
亞硝酸還原酶的酶活性測定
NiRs是胞內酶，其氧化還原反應過程中需要供體電子，且大多需要在厭氧條件下進行。因此體外檢測亞硝酸還原酶時需要在密閉無氧且有電子供體的情況下才能進行檢測。電子供體有甲基紫精、連二亞硫酸鈉和硫代硫酸鈉等 。
生物酶學基礎同工酶簡介
概述 同工酶 （isozyme，isoenzyme）廣義是指生物體內催化相同反應而分子結構不同的酶。按照國際生化聯合會（IUB）所屬生化命名委員會（CBN）的建議，則只把其中因編碼基因不同而產生的多種分子結構的酶稱為同工酶。最典型的同工酶是乳酸脫氫酶（LDH）同工酶，用電泳方法將LDH同工酶分離，
豬胰蛋白酶酶活力的測定
實驗原理胰蛋白酶是以無活性的酶原形式存在于動物胰臟中，在Ca2+的存在下，被腸激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，從肽鏈N端賴氨酸和異亮氨酸殘基之間的肽鍵斷開，失去一段六肽，分子構象發生一定改變后轉變為有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量約為24000，其等電點約為pH8.9，胰蛋白酶的分子量與其酶原接
大鼠5α還原酶Ⅱ酶聯免疫分析
大鼠5α-還原酶Ⅱ酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿，細胞上清及相關液體樣本中5α-還原酶Ⅱ的含量。實驗原理：???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠5α-還原酶Ⅱ水平。用純化的大鼠5α-還原酶Ⅱ抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單
糖化酶和淀粉酶的區別
糖化酶糖化酶又稱葡萄糖淀粉酶,糖化酶是一種習慣上的名稱,學名為α-1,4-葡萄糖水解酶(α-1,4-Glucan glucohydrolace)。本品應用于酒精、淀粉糖、味精、抗菌素、檸檬酸、啤酒等工業以及白酒、黃酒。曲酒等其它釀造工業，本品質量穩定，使用方便，利于連續糖化，提高產品質量，降低成本。
中性植酸酶的酶學性質研究
植酸酶是催化植酸及其鹽類水解成肌醇和磷酸的一類酶的總稱[1]。添加植酸酶能夠顯著提高植物性飼料中磷的利用率，減少飼料中無機磷的添加量以及動物糞便中無機磷的排出，降低植酸磷的抗營養作用，促進動物生長發育，減輕環境的磷污染，提高畜牧生產和生態效益[2]。隨著飼料工業的發展,植酸酶作為一種新型的飼料添加劑
β葡萄糖苷酶的酶學性質
不同來源的β-葡萄糖苷酶在氨基酸序列、分子量、比活力、等電點、最適反應pH值、pH值穩定性范圍、最適反應溫度和熱穩定性范圍上均有很大差別（見表1）。1 β-葡萄糖苷酶的分子量大小β-葡萄糖苷酶由于其來源不同，它們的相對分子量也可能不同，而且它們的結構和組成也有很大差異。β-葡萄糖苷酶的相對分子量范圍
能量運輸的關鍵ATP酶與GTP酶
ATP與ATP酶：ATP酶，又稱為三磷酸腺苷酶，是一類能將三磷酸腺苷（ATP）催化水解為二磷酸腺苷（ADP）和磷酸根離子的酶，這是一個釋放能量的反應。在大多數情況下，能量可以通過傳遞而被用于驅動另一個需要能量的化學反應。這一過程被所有已知的生命形式廣泛利用。部分ATP酶是內在膜蛋白（Integral
生物酶學基礎蛋白酶簡介
水解蛋白質肽鍵的一類酶的總稱。按其水解多肽的方式，可以將其分為內肽酶和外肽酶兩類。內肽酶將蛋白質分子內部切斷，形成分子量較小的月示和胨。外肽酶從蛋白質分子的游離氨基或羧基的末端逐個將肽鍵水解，而游離出氨基酸，前者為氨基肽酶后者為羧基肽酶。按其活性中心和最適pH值，又可將蛋白酶分為絲氨酸蛋白酶、巰基蛋
異相酶免疫試驗和均相酶免疫試驗
Ag為待測抗原，AgAb-E為結合標記物，Ab-E為游離標記物。若抗原-抗體反應影響標記物中酶的活性,如酶活性消失，即結合標記物(AgAb-E)無酶活性，游離標記物(Ab-E)有酶活性； (1) 檢測時不需分離結合標記物(AgAb-E)和游離標記物(Ab-E),檢測體系中標記物酶活性(Ab-E
β葡萄糖苷酶的酶學性質
不同來源的β-葡萄糖苷酶在氨基酸序列、分子量、比活力、等電點、最適反應pH值、pH值穩定性范圍、最適反應溫度和熱穩定性范圍上均有很大差別（見表1）。3.1 β-葡萄糖苷酶的分子量大小β-葡萄糖苷酶由于其來源不同，它們的相對分子量也可能不同，而且它們的結構和組成也有很大差異。β-葡萄糖苷酶的相對分子量
什么是工具酶呢？工具酶都有哪些？
作為試劑用于測定化合物濃度或酶活力的酶稱為工具酶。對于底物或產物不能直接測定或難于準確測定的酶促反應，采用酶耦聯法測定。1.NAD（P）十或NAD（P）H偶聯的脫氫酶及其指示反應。2.偶聯H2O2的工具酶及其指示反應有些酶作用于底物時，可使其氧化產生H2O2，在POD的作用下使色素原氧化顯色進行測定
DNA聚合酶外切酶活性─校對作用
外切酶活性──校對作用：這種酶活性的主要功能是從3'→5'方向識別和切除不配對的DNA 生長鏈末端的核苷酸。當反應體系中沒有反應底物dNTP時，由于沒有 聚合作用而出現暫時的游離現象，從而被3'→5'外切酶活性所降解。如果提高反應體系的溫度可以促進這種作用，這表明
酶標抗體和酶抗酶復合物的應用于細胞ELISA
應用酶標抗體進行免疫測定的方法較多，非均相酶免疫測定是目前應用最廣泛的一類酶免疫檢測技術，其中以酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbent aay，ELISA）最常用，它可用于測定抗體，也可測定可溶性抗原及細胞抗原。而酶-抗酶復合物多用于免疫組織化學。以下