iPSC來源的CARNK療法獲批臨床應對CART復發和成本挑戰

　　近期，致力于開發細胞免疫療法的Fate Therapeutics宣布美國FDA已經批準了其在研療法FT596的研究性新藥(IND)申請。FT596源自克隆主誘導多能干細胞(ipsC)系，是該公司首個現成的CAR-NK)細胞免疫療法，靶向多種腫瘤相關抗原。

　　Fate公司計劃啟動FT596單藥及聯合CD20單抗治療B細胞淋巴瘤和慢性淋巴細胞白血病的臨床研究。

　　“FT596是一種突破性的候選產品，具有替代當前患者特異性和同種異體CD19 CAR-T細胞免疫療法的潛力，這種免疫療法只識別一種抗原，未能解決由于抗原逃逸而導致復發的重大風險，”Fate Therapeutics總裁兼首席執行官Scott Wolchko說。“FT596的強大臨床開發策略旨在針對多種腫瘤相關抗原，用于治療B細胞淋巴瘤和白血病。我們相信，與單抗原靶向CD19 CAR-T細胞相比，候選產品的工程功能及其在多個治療周期中的成本效益，將為患者提供更深入、更持久的反應。”

　　FT596是該公司專有的iPSC產品平臺上的第三個現成的、ipsC衍生的NK細胞候選產品，在不到一年的時間里被FDA批準進行臨床研究。該公司正在對FT516和FT500進行首次人體臨床試驗：FT516是一種工程化表達hnCD16的現成NK細胞療法，用于治療急性髓系白血病和B細胞淋巴瘤；FT500是一種現成的NK細胞療法，用于治療晚期實體瘤。

　　有望解決復發和成本難題

　　雖然CD19 CAR-T細胞療法已在部分B細胞惡性腫瘤中顯示出深刻的臨床反應，但這其中并非所有患者對治療有反應，即使是那些最初有反應的患者，反應的持久性仍然是一個關鍵挑戰。腫瘤細胞表面靶抗原CD19的下調已被臨床證實是重要的耐藥機制之一。

　　FT596是一種含有三種活性抗腫瘤成分的細胞療法，其獨特的設計旨在克服CD19抗原逃逸：

　　針對NK細胞生物學優化的專有CD19 CAR，包含NKG2D跨膜結構域、2B4共刺激結構域和CD3-zeta信號傳導結構域；

　　除了靶向CD19的ZLCAR外，FT596還表達了一種新的不可切割CD16(hnCD16)Fc受體，該受體經過修飾以增強抗體依賴性細胞毒性(ADCC)，使CD19和其他抗原(如CD20)能夠同時靶向；

　　FT596還表達白細胞介素-15受體融合蛋白(IL-15RF)，這是一種有效的細胞因子復合物，可以促進NK細胞和CD8 T細胞的存活、增殖和反式活化，而不需要系統細胞因子的支持。

　　總之，FT596的這些特點是旨在最大限度地發揮治療的效力和最小化毒性。

　　在FT596的臨床前研究中，公司已經證明CAR和hnCD16靶向模式的同時激活與IL-15RF信號傳導相結合，可以產生協同的抗腫瘤活性。與單獨的受體激活相比，在淋巴瘤癌細胞中同時激活受體時觀察到增加的脫粒和細胞因子釋放，表明雙抗原結合可以引起更深和更持久的反應。另外，在由CD19+和CD19-腫瘤細胞組成的混合細胞組合物細胞毒性測定中，FT596與利妥昔單抗(CD20單抗)組合有效地消除了腫瘤細胞的異質群體，這是在單抗原靶向CD19 CAR-T細胞中未達到的結果。

　　另一方面，FT596源自克隆主誘導多能干細胞(iPSC)系。目前，Fate公司的ipsC產品平臺已經得到了100多項已發布ZL和100多項待批ZL申請的IP組合的支持，用于大規模生產通用NK細胞和T細胞產品。

　　去年6月，在權威期刊Cell Stem Cell上發表的一項新研究中，加利福尼亞大學圣地亞哥醫學院(UCSD)和明尼蘇達大學的研究人員報告說：在小鼠卵巢癌模型中，ipsC來源的CAR-NK細胞表現出與CAR-T細胞相似的活性，但毒性較低。該研究主要領導者為Dan Kaufman博士，相關ZL已提交，其與Fate Therapeutics的科學家合作，以推進該技術的臨床轉化。

　　CAR-NK

　　CAR-NK細胞能顯著提高NK細胞療效特異性，其原理是通過在NK細胞表面嵌合腫瘤特異性抗原受體，進而使NK細胞靶向識別并摧毀腫瘤細胞。有研究顯示CAR-NK展示出較ADCC更強的細胞毒作用。在CAR的應用中，NK細胞較T細胞之優勢：

　　許多臨床研究證實，異體NK細胞不會引起移植物抗宿主反應(GVHD)；

　　NK細胞不分泌引起細胞因子釋放綜合征(CRS)的炎癥因子，如IL-1、IL-6；

　　CAR-NK細胞除了CAR介導的靶向殺傷之外，還可以通過NK細胞自身抗腫瘤的特性，識別并殺傷CAR靶標下調或缺失的腫瘤細胞，提高免疫治療效果；

　　異體NK細胞的來源廣泛：包括外周血、NK細胞系、臍帶血、誘導多能干細胞、NK-92等細胞系。

　　目前已有多項關于CAR-NK的臨床試驗，這些臨床試驗多集中于血液腫瘤以及嘗試解決CAR-T未能解決實體瘤的研究。

　　→博生吉醫藥科技（蘇州）目前至少有4項分別靶向CD19、CD7、CD33 和MUC1的CAR-NK臨床研究正在開展。

　　→MD安德森癌癥中心的研究人員正在研究CAR-NK細胞療法，使用臍帶血來源NK細胞，并經過基因改造插入了識別CD19的CAR。目前正在進行2017年開始的臨床試驗(NCT03056339)。受試者患有復發性疾病，并且正在關注B淋巴惡性腫瘤、非霍奇金淋巴瘤以及急性和慢性淋巴細胞白血病。

　　→ 2017年底，科濟生物聯合上海市腫瘤研究所、上海交通大學附屬仁濟醫院在權威醫學期刊Molecular Therapy發表了第一篇靶向GPC3的CAR-NK治療肝細胞癌的研究論文。

　　結果顯示，由科濟生物聯合上海市腫瘤研究所利用自主知識產權抗體制備的GPC3-CAR-NK細胞株(NK-92/9.28.z)在體內外均能夠特異性地靶向并殺傷表達GPC3的肝細胞肝癌，并且不受血清水平可溶性GPC3、實體瘤低氧環境和TGF-β的影響。與目前的CAR-T細胞治療相比，CAR-GPC3-NK治療方案節約大量成本。

　　細胞療法 3.0：ipsC來源

　　Fate公司認為，目前主流的患者自身(自體)或健康供體來源的細胞療法都是“批量到批量”的工程，成本高昂且費時，并導致顯著的產品異質性 -每個生產批次都由初級T細胞中數以百萬計的可變工程事件組成。

　　那么，在早期成功的基礎上，如何從同種異體過程過渡到轉變為經濟高效的優化細胞產品？答案可能是ipsC這樣的可再生主細胞系。

　　通過選擇、表征和再生使用單個細胞，ipsC來源的細胞療法有可能改變細胞癌癥免疫治療的游戲規則。

　　早在2013年，Dan Kaufman博士(加州大學圣地亞哥分校醫學院再生醫學科和細胞治療主任醫學教授)和他的團隊開發了一種從人類ipsC中大量擴增NK細胞的方法，以用于癌癥的治療。相關成果在Stem Cells Translational Medicine上發表。

　　經過大量的臨床前試驗， FDA于去年11月批準Kaufman博士和Fate公司開展I期臨床試驗，測試ipsC衍生的同種異體NK細胞療法FT500對晚期實體瘤患者的療效。

　　2019年2月， Fate公司宣布FDA批準另一款NK細胞療法FT516的IND申請，初步研究將評估其用于治療某些晚期血癌的安全性和耐受性。

　　CAR-T療法

　　去年5月，Mesoblast與Cartherics宣布建立合作伙伴關系，開發用于治療實體瘤的具有多種靶向受體的同種異體的現成CAR-T細胞。兩家技術平臺的結合旨在促進大規模生產iPSC來源的同種異體CAR-T細胞。臨床級制造和儲存方法將用于將基因編輯的ipsC轉化為潛在的無限數量的殺傷性T細胞，從而消除生產自體CAR-T細胞所需的昂貴資源，以為大量癌癥患者提供具有成本效益的“現成的”CAR-T細胞治療。

　　2019年7月，武田制藥公司與京都大學的CiRA(iPS細胞研究與應用中心)宣布將該大學的首個基于ipsC的CAR-T療法(簡稱iCART)授權給武田。武田將對該療法進行臨床開發，擁有開發和商業化iCART產品的獨家權利，CiRA將獲得該療法臨床開發和應用的里程碑付款。預計iCART將在2021年進行第一次人體測試。

　　此外，近期獲得2.5億美元融資的Century Therapeutics專注于開發針對血液和實體腫瘤的ipsC同種異體細胞療法。其平臺是一種可以從成體干細胞中產生的干細胞平臺，具有無限的自我更新能力，可以進行多輪細胞工程改造。這些工程化改造將產生修飾細胞的主細胞庫，從而可以擴大和分化成免疫效應細胞，提供大量的同種異體和同質治療產品。

　　結語

　　基于ipsC的細胞療法已經成為聚光燈下的新主角，就成本而言，有可能是從幾十萬美元轉變到幾千美元的巨大飛躍！