關于《化妝品中三價鉻和六價鉻的檢驗方法》等8項方法的問答

　　針對國家藥監局近日發布的《關于將〈化妝品中三價鉻和六價鉻的檢驗方法〉等8項方法納入化妝品安全技術規范的公告》（2026年第51號），我院起草配套問答，具體內容如下：

　　一、化妝品中三價鉻和六價鉻的檢驗方法

　　（一）本標準的制修訂背景是什么？

　　鉻是一種在自然中廣泛存在的物質，是自然界硬度最大的金屬。常見鉻化合物為三價、六價和二價，由于二價鉻化合物極為不穩定，故主要以三價和六價化合物形態存在。三價鉻在一定含量水平以下對人體有益，六價鉻為致癌物。

　　《化妝品安全技術規范（2015年版）》規定鉻、鉻酸及其鹽類（以Cr6+計）為化妝品禁用原料，但此前并未收錄相應的檢驗方法。國內關于鉻價態的標準主要集中在農業、環境保護、煤炭等領域。為保障化妝品質量安全，有必要制定相關檢驗方法統一檢驗技術要求。

　　（二）本標準的主要內容有哪些？

　　本標準規定了采用高效液相-電感耦合等離子體質譜法測定化妝品中三價鉻和六價鉻含量的方法，適用于膏霜乳類、液體（水、油）類、凝膠類、粉劑類、塊狀類、泥類化妝品中三價鉻和六價鉻的測定。

　　在制定過程中，通過調研生產企業和檢測機構實際情況，充分考慮企業實際，優化前處理流程，增強適用性。同時，在滿足安全監管需求的前提下，合理規定必要的檢出限要求，最大限度降低企業執行標準難度和成本。

　　（三）標準的實施對行業有什么影響？

　　一方面，通過對三價鉻、六價鉻進行區分檢驗，精準管控有毒有害的六價鉻，從而強化風險源頭管控，筑牢產品安全防線，切實保障消費者健康權益。另一方面，本標準建立了化妝品中三價鉻、六價鉻的檢驗方法，有效解決了以往行業檢測方法不統一的問題。該標準采用國內常規檢測實驗室普遍具備的分析技術，選擇適宜、可行、便于實際操作的分析條件，保證檢驗方法的精確性和重現性。

　　二、化妝品中月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽的檢驗方法

　　（一）本標準的制修訂背景是什么？

　　近年來，隨著消費者對產品質量安全的持續關注和法規標準要求的不斷提高，加上傳統防腐劑可能存在的過敏性和刺激性等問題，化妝品行業逐步轉向應用新型、天然類防腐劑，構建綠色安全的防腐體系。2020年12月28日，國家藥監局批準月桂酰精氨酸乙酯HCl作為化妝品防腐劑使用，并納入《化妝品安全技術規范（2015年版）》第三章的化妝品準用防腐劑（表4）。

　　月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽在化妝品領域的應用日益增多，而《化妝品安全技術規范（2015年版）》及化妝品相關國家標準和行業標準中均無該防腐劑的檢驗方法，產品質量管理和監管工作缺乏統一的檢驗技術支撐，因此亟需建立配套的檢驗方法以支撐監管和行業發展。

　　（二）本標準的主要內容有哪些？

　　該標準規定了化妝品中月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽的檢驗方法，適用于液體（水、油）類、膏霜乳類、粉劑類、凝膠類化妝品中月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽含量的測定。該方法以甲醇為溶劑提取樣品中的月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽，經高效液相色譜儀分離，二極管陣列檢測器檢測，采用保留時間和紫外光譜定性、峰面積定量，以標準曲線法計算含量。若液相色譜方法中樣品檢測結果存在干擾或者結果存疑，采用液相色譜-質譜法進行確證。

　　（三）本標準的實施對行業有什么影響？

　　本標準旨在統一檢測方法與判定尺度，不抬高行業準入門檻、不額外增加企業合規成本，對推動行業規范提質、高質量發展具有積極作用。標準有效填補了化妝品領域月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽檢測技術空白，用于該防腐劑在化妝品中使用的質量控制，為化妝品注冊備案、抽樣檢驗、企業自檢及第三方檢驗提供統一權威的技術標準，進一步健全化妝品標準體系。

　　三、化妝品中1-羥乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸鹽等11種原料的檢驗方法

　　（一）本標準的制修訂背景是什么？

　　近幾年，隨著生活水平的提高，染發類化妝品消費需求快速增長，其質量安全問題一直是化妝品監管與社會關注的重點。目前1-羥乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸鹽等多種準用染發劑尚未建立對應的檢驗方法標準，導致企業產品質量控制、行業安全風險管控存在一定的不足。為進一步加強化妝品質量安全監管，規范準用染發劑的使用，筑牢化妝品安全防線，切實保障公眾消費安全與身體健康，有必要制定相關檢驗方法，持續健全我國化妝品標準體系。

　　（二）本標準的主要內容有哪些？

　　本標準規定了化妝品中11種染發劑原料的檢驗方法。主要包含以下內容：

　　一是采用高效液相色譜方法對待測物質進行定量分析。本標準規定了試劑和材料、儀器和設備、標準溶液配制、色譜條件，最后以待測物質峰面積通過標準曲線法測定供試品溶液中各原料的濃度，從而準確計算含量。

　　二是采用液相色譜串聯質譜對樣品檢驗結果確證。對于存在干擾或者結果存疑時，需要進一步確證以保證測定結果的準確可靠。本標準規定了確證方法的參考色譜條件、參考質譜條件和參數設定，提供了定性判定方法。

　　三是提供了供參考的高效液相色圖譜和結果確認質譜圖，明確待測組分存在干擾時的處理方式，以及實驗室可根據實際情況調整合適的標準系列溶液質量濃度范圍等說明，增強了標準的可操作性和實用性，便于標準的實施。

　　（三）本標準的實施對行業有什么影響？

　　本標準的實施有利于規范染發類產品的管理和使用。一方面，該標準為化妝品中1-羥乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸鹽等11種原料的檢驗提供了權威的標準方法，補足了此前的方法缺口，完善了染發劑檢驗方法標準體系。另一方面，該標準在保證染發類化妝品質量安全方面提供了技術支持，有助于加強產品質量管理和保障消費者安全，有助于促進化妝品行業更加高質量發展。

　　四、細菌回復突變試驗方法

　　（一）本標準的制修訂背景是什么？

　　本方法以《化妝品安全技術規范（2015年版）》中的細菌回復突變試驗方法為基礎，遵循科學、規范、公開透明的原則進行修訂。修訂工作主要參考經濟合作與發展組織（Organisation for Economic Co-operation and Development，簡稱OECD）2020年更新的指南TG 471 Bacterial Reverse Mutation Test和我國《食品安全國家標準 細菌回復突變試驗》（GB 15193.4-2014），結合我國化妝品監管工作中遇到的實際情況，以及注冊備案檢驗的實踐經驗，對原有試驗方法進行修訂完善，確保方法科學、規范，并與國際標準接軌。

　　（二）含有組氨酸或色氨酸的受試物是否適合進行細菌回復突變試驗？

　　《細菌回復突變試驗方法》是利用組氨酸或者色氨酸缺陷型試驗菌株，測定受試物引起細菌回復突變的試驗方法，當受試物中含有組氨酸或色氨酸時，可能對試驗結果產生影響，出現假陽性。因此，對已知和經證實含有組氨酸或色氨酸并可能影響試驗結果的受試物，必要時通過預處理去除受試物中的組氨酸、色氨酸，或者采用其他基因突變試驗方法進行檢測。

　　（三）對受試物劑量設置進行了哪些修改？

　　一是明確要求“需結合受試物的溶解度及對細菌的毒性，通過預試驗確定各菌株的最高劑量”；二是針對受試物為原料或產品兩種情況，詳細制定了不同情形下的最高劑量設計原則；三是將受試物劑量組數量由“至少4個”修訂為“至少5個”。

　　（四）是否需要對可疑陽性結果和陰性結果進行重復驗證？

　　為確保試驗結果的可靠性和準確性，修訂后的《細菌回復突變試驗方法》中要求“如試驗中出現可疑陽性，應通過改變試驗條件（如調整受試物或S9濃度，改變培養條件），對可疑陽性的受試物進行重復試驗”和“陰性結果需要驗證（即重復一次）”，即對可疑陽性結果和陰性結果都需要進行重復驗證。

　　五、體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗方法

　　（一）本標準的修訂依據是什么？

　　本標準以《化妝品安全技術規范（2015年版）》中的《體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗》為基礎，遵循科學、規范、公開透明的原則進行修訂。修訂工作主要參考OECD于2016年更新的指南TG 473 In vitro mammalian chromosomal aberration test，結合我國化妝品監管工作中遇到的實際情況，以及注冊備案檢驗的實踐經驗，對原有試驗方法進行修訂完善，確保方法科學、規范，并與國際標準接軌。

　　（二）本標準的適用范圍是什么？

　　本方法用于檢測培養的哺乳動物細胞染色體畸變，以評價受試物致突變的可能性。本方法不適合用于測定染色體的數目畸變。

　　（三）對作染色體分析的細胞數進行了哪些調整？

　　原方法對受試樣品實行差異化細胞計數標準，其中化妝品終產品選擇100個分散良好的中期分裂相細胞進行染色體分析，化妝品原料需選擇200個中期分裂相細胞，且對細胞分析的記錄要求較為簡略。修訂后的方法統一了計數標準，明確常規試驗條件下，需至少選擇300個分散良好的中期分裂相細胞開展染色體分析，且需將細胞數量平均分配至各組平行培養物中。此外，修訂后的方法明確規定若試驗過程中觀察到大量發生染色體畸變的細胞，并且受試物試驗結果可判定為陽性時，計數的中期分裂相細胞數量可以減少（一般不少于100個）。

　　（四）為什么增加實驗結果分析？

　　為規范實驗數據分析和記錄，加強操作性，修訂后的方法對染色體分析和結果記錄進行了更為詳細的規定。包括應評估具有結構染色體畸變的細胞百分比。應按亞型（斷裂、交換）分類的染色單體型和染色體型畸變，分別列出其在實驗組和對照組中的數量及頻率。裂隙應單獨記錄和報告，但不計入總畸變頻率。當觀察到多倍體和/或核內復制細胞時，應報告其百分比。應記錄主要畸變試驗中所有處理組、陰性及陽性對照的同步細胞毒性測定數據。

　　六、90天經口毒性試驗方法

　　（一）該標準的制修訂背景是什么？

　　隨著我國化妝品行業監管體系不斷完善，化妝品原料檢測需求持續增加。《化妝品安全技術規范（2015年版）》中亞慢性經口毒性試驗在實施過程中，各檢驗檢測機構對原方法條款的理解與執行尺度存在差異，從而對化妝品原料的注冊備案及日常檢驗造成一定的困擾。在此行業監管與技術應用背景下，亟需對原有標準內容進行修訂完善，適配化妝品原料安全評價的規范化需求。

　　本方法在《化妝品安全技術規范（2015年版）》亞慢性經口毒性試驗的基礎上，結合OECD 于2025年更新的指南TG 408 Repeated Dose 90-Day Oral Toxicity Study in Rodents，以及《28天重復劑量經口毒性試驗方法》（國家藥監局2024年第12號通告）和《食品安全國家標準 90天經口毒性試驗》（GB 15193.13-2015）對受試物劑量設計、受試物給予、臨床觀察、血液學檢查指標、血液生化檢查指標、尿液檢查、病理檢查等方面進行具體化和明確化，有助于提升相關評價工作的科學性、規范性和可操作性。

　　（二）該標準的主要內容有哪些？

　　本方法規定了化妝品原料90天經口毒性試驗的基本原則、要求和方法，主要包含以下內容：范圍、試驗目的、定義、試驗的基本原則、試驗動物的要求、劑量設計、受試物給予、臨床觀察、眼科檢查、臨床檢查、病理檢查指等內容。

　　（三）該標準需要特別關注的內容有哪些？

　　1.動物的性別和數量：嚴格執行標準中要求的動物組別和數量，確保毒性評價及毒性可逆性觀察的樣本量滿足試驗要求。

　　2.受試物給予：受試物給予方案為每周7天，如采用其他給予受試物方案（如每周5天），應說明偏離標準方案的理由并提供支持性數據，明確論證所選方案能夠滿足研究既定目標。

　　3.臨床檢查、病理檢查：該方法完善了血液學檢查、血液生化檢查指標、病理檢查指標，也對受試物毒性特征和動物臨床表現，增加針對性檢測指標。

　　七、90天經皮毒性試驗方法

　　（一）該標準的修訂依據是什么？

　　本方法以《化妝品安全技術規范（2015年版）》中亞慢性經皮毒性試驗方法為修訂基礎，整體遵循規范性、科學性及可操作性原則。修訂工作主要參考OECD指南 TG 411 Subchronic Dermal Toxicity: 90-day Study和2025年更新的指南TG 408相關內容，結合國內化妝品原料安全評價監管需求和注冊備案檢驗實踐經驗，對原有試驗方法進行修訂完善，確保方法既接軌國際通行技術體系，又適配我國化妝品行業監管實際。

　　（二）該標準主要修訂內容有哪些？

　　相較于《化妝品安全技術規范（2015年版）》亞慢性經皮毒性試驗方法，主要修訂內容包括：更新標準名稱、優化試驗目的與術語定義、完善試驗基本原則、細化實驗動物準入與飼養要求、規范劑量設計與分組原則、明確受試物給予方法、細化臨床檢測指標、增加內分泌毒性相關評價指標、完善大體解剖與組織病理學評價要求，提升了化妝品原料經皮毒性評價的規范性與科學性。

　　（三）該標準的實施對化妝品行業有什么影響？

　　本標準的實施有利于規范90天經皮毒性試驗數據，提升化妝品原料監管效能。一方面，本次標準修訂在保留經典經皮毒性評價框架的基礎上，同時吸納OECD指南更新的技術要點，進一步完善了化妝品毒理學評價標準體系。另一方面，該標準為化妝品新原料質量管控提供了技術支撐，有助于強化產品安全管控、保障消費者使用安全。

　　八、人體長期試用試驗方法

　　（一）本標準的制訂背景是什么？

　　我國對祛斑美白新原料實行注冊管理。《化妝品新原料注冊資料技術通則（征求意見稿）》明確，具有祛斑美白功能的新原料應當提交長期人體試用安全試驗資料。在此背景下，制定《人體長期試用試驗方法》，是對祛斑美白高風險新原料安全評價要求的進一步細化，有助于提升相關評價工作的科學性、規范性和可操作性。

　　祛斑美白原料通常通過抑制酪氨酸酶、干預黑素小體成熟或轉運等機理發揮功效。但如果原料具有過強的干預黑素細胞生理代謝的功能，在長期使用過程中可能引發色素異常等皮膚不良反應。日本杜鵑醇事件提示，杜鵑醇相關產品曾在日本引發大量白斑樣色素脫失報告，且相關風險并非均為短期、可逆性變化。白斑可在初始暴露祛斑美白產品后數周至數月出現，某些難治病例平均起病時間為19個月，停用后仍可殘留白斑。上述情況說明，對于祛斑美白新原料，僅依靠短期人體試用或一般安全性觀察，難以發現該類嚴重不良反應，因此有必要開展長期人體試用試驗。

　　（二）本標準的核心技術要求是什么？

　　本方法設置不少于52周觀察、完成試驗人數不少于100例的要求，并強調專業觀察評價。上述要求與杜鵑醇事件所反映出的“長期使用后才顯現、發生率較低但后果較重”的風險特征相呼應。通過設置較長觀察周期和一定樣本量，有助于提高對遲發性、遷延性皮膚不良反應的識別能力，為祛斑美白新原料安全評價提供更加清晰、可復核的技術依據。

　　（三）本標準與國際實踐及行業發展有什么關系？

　　從國際實踐看，日本對新有效成分、皮膚適用且日常反復使用的醫藥部外品，原則上要求提供12個月、100例以上安全性數據，并由皮膚科專業醫師觀察。本方法有關試驗周期、樣本量和專業觀察的要求，與上述風險控制思路一致，同時也與我國化妝品新原料管理制度相銜接。

　　將本標準納入《化妝品安全技術規范》，旨在針對高風險新原料給出更清晰、可預期、可復核的技術要求。對行業而言，該標準有助于減少因評價方法不明確造成的反復補正和合規不確定性，并支持企業在合規前提下開展創新和高質量發展。