雙波長分光光度法測定乳濁液中烈香杜鵑油含量

卿彬菊, 郭　敏, 劉海寧, 葉秀深, 李　權, 葛　飛, 吳志堅
(1. 中國科學院青海鹽湖研究所,青海西寧810008 ;
2. 中國科學院研究生院,北京100049)
摘　要:本文建立了雙波長分光光度法測定乳濁液中烈香杜鵑油的分析方法,烈香杜鵑油含量在0. 005～0. 8 g?L - 1 的范圍內線性關系良好( R = 0. 9999 , n = 9) ,平均回收率為99. 92 % ,相對標準偏差為1. 64 %。該測定方法簡便快速,結果準確,為性質相似的其它油性藥物在乳濁液中含量的分析測定提供了參考。
關鍵詞:烈香杜鵑油;雙波長;分光光度法;乳濁液
中圖分類號:O657. 39 　　文獻標識碼:A 　　文章編號:100626144 (2010) 0120113204
烈香杜鵑為杜鵑花科杜鵑屬植物,主要分布在我國青海、甘肅、陜西、四川等地。烈香杜鵑葉所含揮發油對慢性氣管炎有較好療效,具有清熱解毒,止咳平喘,解痙行氣,健胃消腫之功效,且毒性小,副作用少。
烈香杜鵑油(Savoury Rhododendron Oil ,SRO) 成分復雜,能與乙醇互溶,極難溶于水,通常采用揮發油測定法[ 1 ] 進行測定,但方法比較繁瑣,時間冗長。在杜鵑油的使用及藥效評估過程中,需要知道杜鵑油在水乳濁液中的含量。
目前尚未見用分光光度法測定杜鵑油在水乳濁液中含量的報道。本文發揮紫外2可見分光光度法快速簡捷的特點,建立用分光光度法測定杜鵑油在水乳濁液中含量的方法,這對于杜鵑油在水乳濁液中含量的快速測定,杜鵑油緩釋制劑可控釋放性能的研究有重要意義,而且所建立的方法對于性質相似的其它油性藥物在水乳濁液中含量的快速分析測定有一定的參考價值。
1 　實驗部分
1. 1 　儀器及材料
TV21810 型紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司) ; KQ5200 型超聲清洗器(40 kH ,200W ,昆山市超聲有限公司) 。
吐溫280 為化學純;氫氧化鈉、鹽酸和氯化鈉均為分析純。實驗用水為重蒸水。烈香杜鵑油(青海大地藥業有限公司) ,相對密度為0. 93～0. 98 g/ L 。
1. 2 　實驗方法
杜鵑油不溶于水,為了在水中分散杜鵑油,需要加入表面活性劑,形成乳濁液,才能用光譜法測定杜鵑油含量。T280 為比較常用的藥物添加劑和藥物可控釋放調節劑[ 223 ] ,在本實驗中選用T280 分散水中的杜鵑油。為了進一步促進杜鵑油在水中的分散,用KQ5200 型超聲清洗器(40 kH ,200 W) 對乳濁液進行超聲處理,考察超聲與未超聲樣品的光譜性質及吸光度的穩定性。
以NaCl調節乳濁液的離子強度,考察離子強度對吸光度的影響;以鹽酸或氫氧化鈉溶液調節乳濁液的p H 值,考察p H 值對吸光度的影響。
在確定了基本的測定條件之后,配制杜鵑油含量不同的一系列乳濁液,得到標準曲線,最后確定測定方法的回收率和精密度。
2 　結果與討論
2. 1 　超聲處理對吸光度的影響
配制含杜鵑油0. 27 g?L - 1 、吐溫0. 17 g?L - 1 的乳濁液(未加酸、堿及鹽調節p H 值及離子強度) ,取50mL 于100 mL 玻璃瓶中,置于40 kH、200 W 的超聲清洗器中,超聲20 min 。對超聲及未超聲樣品進行紫外2可見光譜掃描,結果如圖1 所示。結果表明,超聲處理對吸光度有一定的影響,超聲后吸光度減小。
2. 2 　體系的穩定性
超聲及未超聲樣品在300 nm 處的時間掃描結果見圖2 。未超聲樣品的吸光度隨放置時間的增加而減小,而超聲樣品的吸光度隨放置時間的變化不大。樣品經過超聲處理之后吸光度更穩定,更適合于光譜分析,因而在以下的實驗中都對樣品進行超聲處理20 min ,超聲后將樣品放置120 min 后進行測定。
2. 3 　離子強度對吸光度的影響
離子強度對吸光度有一定的影響。在定量分析時,為了得到更準確的結果,應該使標準樣與待測樣具有相同或相近的組成,并保持相同或相近的離子強度。在后面的實驗中,不再加鹽調節離子強度。
2. 4 　pH值對吸光度的影響
實驗顯示p H 值對吸光度有一定影響,當p H 值過低或過高時吸光度均較低,分析結果靈敏度變差。
在不加鹽酸及氫氧化鈉的情況下,乳濁液的p H 值為5. 1 ,在該p H 值下,比較適合進行光譜分析。在后續的實驗中,不再加鹽酸或氫氧化鈉調節乳濁液的p H 值。
2. 5 　T280 用量的影響
當杜鵑油的質量達到T280 質量的3 倍以上時,加入水中后,不易形成均勻的乳濁液,有一部分杜鵑油浮于水面,影響測定的準確度。在分析測定的過程中, T280 的用量應該至少保證能形成均勻的乳濁液。由于在杜鵑油含量的實際測定中,采用了雙波長分光光度法,能消除T280 的影響, T280 的用量沒有必要嚴格控制。不過,在保證能形成均勻乳濁液的前提下,應該盡量少加T280 。
2. 6 　測定波長的選擇
圖3 為0. 17 g/ L T280 溶液和由杜鵑油、T280 與水構成的乳濁液(杜鵑油和T280 濃度分別為0. 12 和0. 10 g/ L) 的紫外2可見光譜。T280 溶液在234 nm 處有最大吸收峰,乳濁液則無最大吸收峰。T280 溶液在244 及220 nm 處的吸光度值相同,均為1. 14 ,而乳濁液在這兩處的吸光度值分別為1. 61和3. 16 ,相差1. 54 。為了排除T280 對杜鵑油分析測定的影響,選取244 nm 為參比波長,220 nm 為測量波長,采用雙波長分光光度法測定杜鵑油含量。
2. 7 　標準曲線及線性范圍
配制一系列標準乳濁液,將乳濁液超聲及靜止處理后,然后分別在244 nm 和220 nm 處測定吸光度。以兩個波長處吸光度的差值對乳濁液中杜鵑油濃度作圖, 并進行線性回歸, 其回歸方程為: △A =0. 01245c + 0. 00535 ( R = 0. 9999 , n = 9) ,杜鵑油的濃度在0. 005～0. 8 g?L - 1的范圍內線性關系良好。
2. 8 　方法回收率及精密度
配制一系列已知杜鵑油濃度的乳濁液,將乳濁液進行超聲和靜置后,采用雙波長分光光度法測定吸光度,根據上述標準曲線計算杜鵑油含量,然后計算回收率。根據回收率的結果,計算出平均回收率為99. 92 % ,相對標準偏差為1. 64 %。
配制杜鵑油和T280 濃度分別為0. 103 和0. 0487 g/ L 的乳濁液,平行測定13 次進行精密度分析。通過計算,得出相對標準偏差為0. 98 %。
3 　結論
本文針對采用揮發油測定法測定乳濁液中烈香杜鵑油的含量時,步驟比較繁瑣,需要時間較長的問題,建立了雙波長分光光度法測定乳濁液中烈香杜鵑油含量的分析方法。首先考察了超聲處理、離子強度和p H 值對乳濁液吸光度的影響,在此基礎上確定了測定的基本條件和標準曲線,烈香杜鵑油含量在0. 005～0. 8 g/ L 的范圍內線性關系良好( R = 0. 9999 , n = 9) ,平均回收率為99. 92 % ,相對標準偏差為1. 64 %。該測定方法簡便快速,結果準確。該分析方法的建立對于杜鵑油在水乳濁液中含量的快速測定,杜鵑油緩釋制劑可控釋放性能的研究有重要意義,而且為性質相似的其它油性藥物在乳濁液中含量的測定提供了參考。