地高辛配基隨機標記DNA探針試劑盒成份

1.無標記對照DNA1　此管內有20μl pBR328 DNA100μg/ml,pBR328分別用BamHⅠ,BglⅠt HinfⅠ消化，它們的混合比例為2：3：3，共有16個Pbr328片段，這些片段的大小分別為：4907，2176，1766，1230，1033，653，517，453，298，234，234，220和154×2bp。

2.無標記對照DNA2　此管內有20μl pBR328 DNA200μg/ml，已用EcoRⅠ線性化。

3.DNA稀釋緩沖液　有兩管，每管1ml[成分為：Tris-HCl(10mmol/L),EDTA(1mmol/L),pH8.0(20℃)]內含鮭魚精DNA(50μg/ml)。

4.標記對照DNA　此管內有50μl線性化pBR328DNA，按標記方法已標記有地高辛配基dUTP,含20μg模板DNA，每毫升含5μg合成的標記DNA。

5.六聚核苷酸混合物

6.標記用混合底物　此管內有50μl 10倍濃度的dNTP標記用混合底物，含dATP(1mmol/L)dCTP(1mmol/L),dGTP(1mmol/L),dTTP(0.65mmol/L)和Dig-dUTP(0.35mmol/L),pH6.5(20℃)。

7.DNA聚合酶Ⅰ大片段(標記級)　此管內有25μl DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow)，2U/μl。

8.(Dig)AP結合物　此管內有200μl多克隆羊抗地高辛配基Fab-片段，結合有堿性磷酸酶750U/ml。

9.NBT　有兩管，每管1.25ml，是溶于70%(V/V)二甲基甲酰胺的硝基藍四唑鹽溶液(75mg/ml)。

10.X-磷酸鹽　有兩管，每管0.9ml，是溶于二甲基甲酰胺的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽的甲苯胺溶液(50mg/ml)。

11.封阻試劑　有兩瓶，每瓶有50g粉劑。