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  • 發布時間:2021-11-17 14:05 原文鏈接: 基因組測序

    如果樓主指的是人類基因組計劃,那時用的方法叫做雙脫氧終止法,也叫做sanger法。它的原理是在DNA合成過程中,DNA聚合酶能夠使用ddNTP(雙脫氧核苷酸)來作為原料,但它的反應會在加入ddNTP的時候終止。具體實驗是通過PCR來完成的,但與普通PCR不同,它只需要一個引物而不是一對。在4個相同的反應體系中分別加入普通的dNTP以及4種不同的ddNTP(比如體系1里面缺少dATP,而有ddATP,以此類推)。假設四個體系中分別加入的是ddATP, ddGTP, ddCTP和ddGTP我們就分別把這個叫做A,G,C,T體系,然后每個體系中,會在遇到相應堿基的時候停止反應,這樣就產生了一系列長度不一并且分別在以A,G,C,T時終止的DNA片段,比如A體系中的DNA片段,都是以A結尾的DNA 。接著我們拿著這些片段去進行一個高分辨率的電泳(能夠區分出一個堿基的差別),然后根據電泳結果,我們就能讀出序列了。

    最早的測序方法就是這樣,但是這種方法極其費時間,它需要首先將DNA打斷成無數合適的小片段,然后再在完成測序后將其拼接起來。這就是為什么當時人類基因組計劃需要那么多國家合作并且耗費那么多時間的原因。

    當然,現代的第二代DNA測序技術已經普及了,它們相比第一代測序技術而言,具有低成本,高通量,短耗時等優點。如果用第二代DNA測序技術去完成人類基因組測序的話,現在最多也就耗時一個月左右。

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