天津醫科大Nature子刊：新成果助力反義寡核苷酸治療

　　來自天津醫科大學、牛津大學的研究人員在dystrophin缺陷杜氏肌營養不良癥(DMD) mdx小鼠中證實，己糖（Hexose）可提高寡核苷酸的遞送和外顯子跳躍。這一研究成果發布在3月11日的《自然通訊》（Nature Communications）雜志上。

　　天津醫科大學的尹海芳(HaiFang Yin)教授及牛津大學的Matthew J. A. Wood是這篇論文的共同通訊作者。尹教授畢業于中國農業大學，由她牽頭成立了基礎醫學院細胞生物學系天津-牛津基因治療聯合實驗室。尹海芳教授近三年發 表文章11篇，應邀編寫學術專著2篇，論文累計影響因子約96；獲得國際ZL2項。獲教育部新世紀優秀人才稱號和英國牛津大學突出業績獎。

　　反義寡核苷酸(AOs)是一類重要的治療大分子，其有潛力用于治療包括DMD在內的廣泛疾病。盡管已有兩個針對DMD的先導AO化學成分進入臨床試 驗，實現有效的全身給藥是一個主要的挑戰。二酰胺嗎啉代寡核苷酸（phosphorodiamidate morpholino oligomer，PMO）是一種新型AOs，近年研究人員對它的DMD外顯子跳躍治療潛力進行了深入地研究。

　　研究證實，通過靜脈注射給予mdx小鼠PMO，只能有效提高骨骼肌中的dystrophin表達，野生型水平只達5-10%，表明全身給藥效率有 限。盡管研究人員調查了包括利用高分子聚合物和細胞穿透肽等幾種策略，證實可以提高AO傳遞至肌肉的效率。但在批準用于臨床之前還需要進一步調查它們的效 率和安全性，它們的使用有可能限制于某些AO類型。由此，開發出安全、有效、廣泛適用的傳遞技術對于釋放核酸療法的全部潛能至關重要。

　　輸注碳水化合物，尤其是5%葡萄糖被廣泛用于臨床。5%的葡萄糖緩沖液還被用于靜脈內給藥，提高小干擾RNA (siRNA)-外來體或siRNA-肽復合物的穩定性。在這篇新文章中研究人員證實,在DMD mdx小鼠中同時給予PMOs及葡萄糖可以提高外顯子跳躍活性。他們確定了一種葡萄糖-果糖（GF)制劑可增強PMO活性，完全糾正異常的Dmd轉錄，恢 復骨骼肌中dystrophin水平并挽救功能，且未檢測到毒副反應。這種活性是由于GF提高了肌肉中的PMO攝取所致。他們證實細胞攝取PMO依賴能 量，GF代謝生成的ATP提高了肌肉中細胞攝取PMO。

　　研究人員證實了，在mdx小鼠中能量緊缺條件下GF通過補充細胞能量增強了PMO活性，研究結果闡明了己糖介導寡核苷酸傳遞機制，這對于開發DMD外顯子跳躍療法具有重要的意義。

　　DMD是一種致死性X染色體連鎖遺傳的神經肌肉失調癥，主要發生于新生男孩。其臨床癥狀表現為全身肌肉持續性消耗和退化，病人平均壽命僅20歲左右。到目前為止，臨床上暫無有效治療方法。反義寡核苷酸介導的外顯子跳讀是目前最有應用前景的治療方法之一。

　　2012年12月，美國加州洛杉磯分校的研究人員發現了一種可使針對DMD的反義核苷酸療法變得更為有效的輔助藥物。聯合兩種治療方法將有望顯著減緩這一肌肉消耗性疾病的進展。相關論文發表在Science Translational Medicine雜志上（Science醫學：推動反義寡核苷酸治療的逆襲）。

　　2015年11月，巴西圣保羅大學生物科學學院（IB-USP）和美國哈佛大學等處的研究人員發現，一個叫Jagged1（簡稱JAG1）的基因，可能是開發DMD療法的一個靶標。相關研究結果發表在Cell雜志上（Cell：肌萎縮癥基因療法獲重要突破 ）。

　　在2015年12月31日的Science上，三個獨立研究小組提供了初步的研究證據表明，通過編輯一個與肌肉功能相關的基因，修復杜氏肌營養不良 癥小鼠的一些肌肉功能，可以治愈這一遺傳性疾病。這標志著第一次在完全發育的活體哺乳動物中CRISPR采用一種有潛力轉化為人類療法的策略，成功治療了 一種遺傳疾病（三篇Science文章：利用CRISPR治療遺傳疾病 ）。